重组酶聚合酶等温扩增技术在动物源性成分鉴定中的应用

在打击肉制品掺假走私、维护市场秩序、保护野生动物资源等方面,对动物源性成分鉴定技术的特异性、灵敏性、重复性提出了很高的要求。本文阐述了动物源性成分的检测鉴定技术,有多样性和局限性的特点。归纳了重组酶聚合酶恒等温扩增技术原理与应用,解决了PCR技术在仪器上的局限性,优化了早期恒温扩增技术的缺点。指出重组酶聚合酶恒等温扩增技术为动物源性成分的快速准确鉴定提供了坚实的技术基础,并在动物疫病诊断方面也有很好的应用前景。     

我国陆生动物疫病诊断技术标准化建设现状

动物疫病诊断技术标准体系的建立,对于防控重大动物疫病具有重要意义。目前,我国92%的陆生动物疫病有相应诊断标准,但仍存在覆盖率有待提高、部分标准内容有交叉或重复、标准老龄化等问题。本文提出了对标准进行清理整合,完善动物检疫标准体系建设,由多家实验室实施标准多方验证,加强具有前沿性和自主知识产权的高技术标准研制等建议,以期为标准制定工作提供参考。     

马驽巴贝斯虫ddPCR检测方法的建立

马驽巴贝斯虫(Babesia caballi)病是马属动物的一种血液原虫病,被农业农村部列为二类动物疫病.本研究旨在建立一种针对马驽巴贝斯虫病的ddPCR检测技术.利用马驽巴贝斯虫特异性引物及探针对反应体系进行优化,测试了方法的特异性、稳定性及灵敏性,对30份可疑样品进行了初步检测.结果显示,该方法具有较好的稳定性,最...     

内蒙古镶黄旗地区牛寄生虫病调查报告

[目的]为了解半舍饲与半放牧条件下牛胃肠道寄生虫病的流行情况,于2011年5月到2012年5月间,较为系统地调查了锡林郭勒盟镶黄旗地区三个不同苏木、镇的牛寄生虫病流行情况。[方法]首先针对不同草场、舍饲与半舍饲条件的牛群,先后共采集了708个粪样。然后借助饱和盐水漂浮法、离心沉淀法和麦克马斯特氏虫卵计数的方法,对粪便样品虫卵进行定性和定量检查。[结果]表明,该地区牛群胃肠道寄生虫总感染率为44.92%。根据虫卵形态特征初步鉴定出9种虫卵,分别隶属于3门3纲3目5科和9属,未检查到吸虫。比较分析了不同地区和不同草场类型牛群的胃肠道寄生虫感染情况。[结论]不同草场类型的牛胃肠道寄生虫感染率有显著性差异(P0.01)。     

反刍家畜9种蠕虫卵显微特征的比较分析与数字化描述

为了比较分析牛、羊等反刍家畜常见蠕虫卵的显微特征和实现虫卵图像的数字化描述,选取已鉴定好的9种常见蠕虫,采用显微解剖方法由其泄殖腔取出大量虫卵制备压片,并借助光学显微镜认真观察,选择轮廓清晰、接近成熟的虫卵进行拍照,建立原始图像库。比较各虫卵的大小和形态特征,并用变形雅可比(p=4,q=3)-傅立叶矩(PJFM’s)对原始虫卵图像进行特征提取和数字化描述。结果发现,不同种虫卵的长径、宽径均有显著性或极显著性差异,同一种虫卵特征的不变矩值基本相等,而不同种虫卵的不变矩值则相差很大。虫卵重建图像试验结果较好,其形态特征基本和原图像一致,说明PJFM’s(p=4,q=3)矩能够很好地提取虫卵图像的关键特征点,可成功描述蠕虫卵图像。因此,该研究结果为实现虫卵的数字化描述和智能识别奠定了重要的技术基础。     

我国陆生动物疫病诊断标准CNAS认可情况分析

中国合格评定国家认可委员会(CNAS)的标准认可对于增强疫病诊断的科学性、准确性和公众认可度具有重要意义。目前,我国73%的进境检疫陆生动物名录疫病已有CNAS认可的诊断标准或方法。但仍存在认可标准数量少、覆盖率低、方法更新和废止不及时等问题。本文提出了加大对标准的CNAS认可力度,加强对CNAS认可标准的监管,促进国家级重点实验室、国家级科研机构参与国际认证和认可工作等建议。     

马驽巴贝斯虫PCR和qPCR检测方法的建立

马驽巴贝斯虫是一种寄生于马属动物的血液原虫,给马产业造成巨大的经济损失。本研究旨在建立两种高效、可靠的PCR诊断技术,为进一步提高口岸检疫工作效率奠定基础。根据马驽巴贝斯虫Bc48基因序列,设计了一对特异性引物和荧光探针,建立了PCR和qPCR检测方法,测试了两种方法的特异性、灵敏性、稳定性。结果显示:建立的两种方法均具有良好的特异性;PCR方法的最低检出限为4.04×10² copies/μL,qPCR方法的最低检出限为4.04×10¹ copies/μL;对33份马血样品进行检测,结果qPCR检出的阳性样品数为23份(69.7%),而PCR检出的阳性样品数为9份(27.3%)。表明两种方法均可成功用于马驽巴贝斯虫的检验,但是荧光定量PCR方法的灵敏度明显优于PCR方法。