猪血清对猪肺炎支原体培养影响的研究

正一、材料(一)菌株1.猪肺炎支原体P-5722-3株,由美国硕腾动物保健公司提供,哈药集团生物疫苗有限公司保藏。2.猪肺炎支原体P-5722-3株CCU阳性标准品(CCU检测),由美国硕腾动物保健公司提供,哈药集团生物疫苗有限公司保藏。(二)完全培养基1.培养基组分A:根据猪肺炎支原体P-5722-3株培养基配方要求,制备组分A。2.培养基组分B:猪血清3.猪肺炎支原体P-5722-3株完全培养基由培养基组分A与培养基组分B共同制备,培养基组分A由哈药     

乳汉液不同除菌方法对鸡胚成纤维细胞的影响

为了验证不同除菌方法制备的乳汉液对鸡胚成纤维细胞生长的影响，采用了高压灭菌、EKS滤板过滤除菌和进口滤芯过滤除菌3种方法。通过实验表明，经过进口滤芯过滤所得的乳汉液是最利于鸡成纤维细胞生长的。     

猪链球菌活疫苗生产工艺的改进

在猪链球菌活疫苗的生产中,采用发酵罐培养来代替玻璃瓶培养,这种改进后的生产工艺,不但使菌液冻干前菌数和冻干后活菌数明显提高,而且还缩短了培养时间,为及时生产出质量可靠的疫苗提供了保障。     

鸭肠炎病毒gB抗原优势区的表达及其多克隆抗体的反应特性

拟制备鸭肠炎病毒(DEV)gB抗原优势区的多克隆抗体,初步应用于该病毒的检测。以本实验室克隆的DEVC-KCE株ul27基因序列为参考序列设计特异性引物,通过PCR获得DEV gB优势表位区域基因片段gB-AD(331—570bp),并在pET-32a(+)/Rosetta(DE3)pLysS系统中进行原核表达。经IPTG诱导获得与预期大小相符的重组蛋白质,以Ni-NTA柱亲和层析法纯化重组蛋白质,利用DEV阳性血清检测重组蛋白质的抗原性,并用切胶纯化的重组蛋白质免疫家兔,制备兔抗DEV gB-AD血清。结果显示,重组蛋白质可被DEV阳性血清特异性识别,制备的兔源多克隆抗体I-ELISA效价为1∶10 240,且其具有中和活性;兔源多克隆抗体在还原电泳条件下显示DEV gB的相对分子质量约为66ku,而在非还原电泳条件下DEV gB显示为相对分子质量约120和66ku的两条目的带,通过间接免疫荧光试验和中和试验进一步证实制备的兔源多克隆抗体可特异性识别鸭肠炎病毒感染细胞所合成的gB蛋白。结果表明,所制备的兔抗DEV gB-AD多克隆抗体可作为检测DEV的试剂,为DEV检测及gB的功能研究提供必要的基础数据和材料。     

仔猪副伤寒活疫苗生产工艺的改进

仔猪副伤寒活疫苗是由抗原性良好的猪霍乱沙门氏菌强毒株在含有醋酸铊的普通肉汤中传代培养,经传数百代后,筛选出1株毒力弱而免疫原性良好的弱毒菌株,命名为猪霍乱沙门氏杆菌C500弱毒株。