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一株猪肺炎支原体HN0613株的分离鉴定 总被引:1,自引:1,他引:0
采集疑似猪支原体肺炎病理变化的肺脏,经Friis液体、固体培养基培养、纯化,PCR、测序分析、生化鉴定、生长抑制、代谢抑制和致病性试验证实分离获得一株猪肺炎支原体菌株,命名为HN0613.该菌株能适应人工培养基的培养,且传代生长良好,液体培养基中培养达108 CCU/mL;菌株有较强的毒力,可作为疫苗候选株进一步研究.该菌株的分离鉴定为研制猪支原体肺炎灭活疫苗奠定了基础. 相似文献
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肺炎支原体的培养和保存条件非常苛刻,是疫苗规模化生产的工艺难题。本文针对猪支原体肺炎活疫苗(168株)生产工艺关键技术进行研究。通过培养试验筛选四种培养基配方表明该疫苗株在低血清改良培养基中生长良好;优化发酵培养工艺,使其在发酵罐培养60~70 h的峰值可达到1010CCU/mL;设计筛选该疫苗耐热保护剂和冻干工艺,37℃下保存10 d的耐老化试验结果显示,下降滴度小于100.5CCU/mL。本研究为提供高效、安全和稳定的猪肺炎支原体疫苗产品奠定基础。 相似文献
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通过猪肺炎支原体CJ株接种3种猪肺炎支原体培养基后的生长活性研究发现,与其他2种培养基相比,接种改良Friis培养基培养2~3 d含菌量可达到1.0×109~10CCU/m L,具有生长迅速、含菌量高的特点,可用于猪肺炎支原体CJ株的培养。 相似文献
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猪肺炎支原体DJ-166株的分离鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
从山西某猪场采集疑似猪支原体肺炎肺组织病料,接种CH培养基培养,克隆纯化获得一株菌株。该菌株经PCR、培养特性、生化特性和血清学特性试验鉴定为猪肺炎支原体,命名为DJ-166株。该分离菌株在人工合成培养基上传8代稳定后,活菌计数达到108CCU/m L;菌液培养物气管注射猪后,致病性较弱;免疫原性试验证明该分离菌株具有良好的免疫原性,此结论为猪支原体肺炎疫苗的研究提供了必要条件。 相似文献
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猪瘟和猪呼吸道病综合征(PRDC)给当前猪场造成重要威胁,猪瘟疫苗和猪肺炎支原体疫苗是重要的防制工具。由于两种疫苗同时注射有利于减少猪群应激并减轻劳动强度,本试验旨在探讨仔猪3周龄时同时注射猪瘟疫苗和肺炎支原体疫苗对猪瘟抗体滴度变化的影响。选择3头同期分娩母猪,将每头母猪所产12头仔猪随机平均分到A、B、C、D这4个组。4个组都在3、8周龄注射猪瘟疫苗。A组只注射猪瘟疫苗;B组和C组在1、3周龄接种猪肺炎支原体疫苗,3周龄时猪肺炎支原体疫苗与猪瘟疫苗同时注射,B组为两种疫苗分点注射,C组为混合注射;D组在2、4周龄注射猪肺炎支原体疫苗。统计分析表明,10周龄和13周龄时4个组猪瘟抗体滴度差异不显著,说明猪肺炎支原体疫苗与猪瘟疫苗同时注射并不干扰猪瘟抗体的生成。另外发现,在母源抗体水平较高的情况下,3周龄接种猪瘟疫苗会受到母源抗体的部分干扰。 相似文献
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根据培养物的生长速度和含菌量方面筛选适合猪肺炎支原体CJ株生长的猪血清。配制改良Friis培养基时分别添加6种不同生产厂家的猪血清,由6种不同厂家猪血清配制的改良Friis培养基培养猪肺炎支原体CJ株。从生长时间可知,由厂家1的猪血清配制的改良Friis培养基更适宜猪肺炎支原体CJ株的生长。从测定的含菌量测定结果可知,由厂家1的猪血清配制的改良Friis培养基培养猪肺炎支原体CJ株的含菌量较高。结果表明,由厂家1的猪血清配制的改良Friis培养基培养猪肺炎支原体CJ株的生长时间短且含菌量高。 相似文献
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为研究不同毒力的猪肺炎支原体对宿主细胞的黏附作用,本研究采用体外培养的猪气管环检测不同毒力的猪肺炎支原体代表菌株对猪气管上皮细胞及纤毛的损伤情况,初步验证不同猪肺炎支原体代表菌株的毒力.应用间接免疫荧光技术研究不同猪肺炎支原体分离株、标准株、168致弱株及疫苗株对猪肾细胞PK15、肺泡上皮细胞SJPL和猪肺泡巨嗜细胞3D4/31的黏附情况.结果表明猪肺炎支原体野毒株XLW-1能引起猪气管上皮细胞严重病变及纤毛损伤、脱落;国际标准弱毒株J株仅能引起猪气管上皮细胞轻微病变;168疫苗株既不能引起猪气管上皮细胞病变,也不能引起纤毛损伤.野毒株XLW-1、国际标准强毒株232株、弱毒株J株及168疫苗株均能黏附PK15、SJPL和3D4/31,168致弱株可以黏附PK15和SJPL.野毒株、标准强毒株、标准弱毒株、168致弱株及疫苗株均能黏附PK15、SJPL和3D4/31. 相似文献
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我们从外地引进几株猪肺炎支原体标准株和流行株,并从慈溪分离出一株猪肺炎支原体,对其继续培养方法和菌株保存方法进行了一些工作,现小结如下。材料和方法1.猪肺炎支原体液体培养基我们参照中监所的培养基配方,配制了适合于支原体分离和培养的液体培养基,其组成成分为: 0.2%水解乳蛋白Hank’s液400ml 牛心消化液240ml 相似文献
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猪支原体肺炎灭活疫苗的免疫效果研究 总被引:1,自引:1,他引:0
对猪肺炎支原体(J株)进行培养后,采用新型工艺制备了4批猪支原体肺炎灭活疫苗。并对疫苗进行了安全性、免疫效果、免疫期检验。结果表明该灭活疫苗对猪安全有效,并且可使免疫猪的肺炎减少率达到75%以上,免疫期可达到6个月以上。 相似文献
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猪肺炎支原体表面蛋白P46基因的克隆与序列比较 总被引:1,自引:0,他引:1
猪肺炎支原体(Mycoplasma Hyopneumoniae,Mhp)兔化弱毒株R659株、济南强毒株、强毒Z株、国际标准株232,通过A26培养基培养,提取DNA;利用PCR技术从四株猪肺炎支原体中均能扩增出目的条带.将该序列克隆到pGEM-T-Easy载体上测序.结果表明,克隆序列全长1 152 bp,编码383个氨基酸和一个终止子(TAA);该序列中含有3个TGA编码Trp,而不是终止密码子.比较兔化弱毒株与济南强毒株、国际标准株232及NCBI上发布的J株的P46基因序列,发现它们的同源性分别为98.6%、99.2%、99.2%;比较它们编码的氨基酸发现它们的同源性分别为98.7%、99.2%、99.2%.结果表明猪肺炎支原体的P46基因在猪肺炎支原体种内是很保守的,因此建立以P46蛋白为诊断抗原的ELISA具有潜在的意义. 相似文献
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猪肺炎支原体培养存在对营养需求严苛、培养难度大、菌液培养滴度不高等问题.本试验开展了一系列改进猪肺炎支原体高密度发酵培养工艺的研究,采用添加15%猪血清的优化CH液体培养基(初始pH为7.8),按5%接种量接种,在发酵罐中培养、pH降到6.7~6.8时收获菌液,菌液培养滴度可达1×1010 CCU/mL.本试验结果对猪... 相似文献