动物双歧杆菌耐氧航天诱变菌株MN-Gup的筛选

耐氧性能不足是双歧杆菌在酸奶产品中添加应用的一个重要问题。本试验对搭载神舟十一号返回式飞船的动物双歧杆菌菌株进行分离纯化并得到10株突变株。以耐氧系数为评价指标对菌株进行筛选,对野生株BB-11与突变株的遗传稳定性、生长曲线、不同氧浓度条件(氧气浓度为0、5%、10%、15%、21%)下菌株的活菌数等指标进行测定,并对菌株的菌落形态及微观形态进行观察。结果表明,10株突变株中有5株耐氧系数显著高于野生菌株(P0.05),其中有一株突变株耐氧MN-Gup遗传稳定且耐氧系数显著高于野生菌株;耐氧突变株的生长趋势与野生株相似,但是高于野生株。在5%氧气浓度下,耐氧突变株OD600达到1.110±0.02,活菌数最高达到8.46±0.13(log cfu/m L),均高于野生株;形态学观察发现突变株与野生株在表观形态上没有差异。动物双歧杆菌BB-11经过航天诱变后耐氧性能发生改变,突变株动物双歧杆菌MNGup耐氧性能良好且遗传稳定。对BB-11和MN-Gup在p H 2.5(盐酸调节p H)和0.3%的胆盐浓度下进行活菌数检测,结果表明两株菌均具有良好的胃酸和胆盐耐受性,并且两株菌之间无显著差异(P0.05);B1为坚强肠球菌,B2为海氏肠球菌,B3和B4均为屎肠球菌。本研究为防治犊牛腹泻提供了更多的候选菌种。     

洗肠液与抗生素联用对大鼠肠道微生物的清除作用

构建大鼠肠道无菌与低菌环境是开展肠道菌群研究的重要手段之一,传统抗生素去除方法存在用时长和肠道损伤的缺点。为达到肠道好氧菌数量级在102以下、厌氧菌未检出的目的,本文通过与传统抗生素方法对比,采用洗肠液与抗生素联用清除肠道微生物。传统抗生素去除方法耗时21d,空肠出现绒毛顶端脱落、炎症反应;洗肠液抗生素联用仅用时21h,肠道结构未出现明显损伤。由此可见,洗肠液抗生素联用具有用时短、无损伤的优点,能够有效清除肠道微生物实现实验需要。     

动物双歧杆菌A6体内外安全性评价

本研究对动物双歧杆菌A6进行了体外及体内的安全性评价,为菌株应用提供基础保障。通过体外试验评价了A6的抗生素敏感性和生物胺的生成;通过体内试验评价了A6的经口毒性及移位风险。试验结果表明,A6不存在菌株特有的抗生素敏感性,排除了抗生素耐性横向转移的风险;在脱羧酶培养基中培养,未发现该菌株产生生物胺;灌胃试验发现,将该菌株分别以2×10^8cfu/mL、2×10^9cfu/mL、2×10^10cfu/mL低中高三种剂量灌胃小鼠,每只小鼠每天灌胃0.2mL,连灌28d,结果小鼠无不良反应,在其血液、肾脏、肝脏未发现该菌株的移位现象。在对动物双歧杆菌A6安全性评价中,未发现菌株的不安全因素。     

1/2及5/6肾切除大鼠肾脏病变规律研究

本研究采用不同肾切除手术方法,研究大鼠肾脏损伤及疾病病程变化规律。研究表明,肾脏的缺失并未影响大鼠机体体重的改变,术后2周开始不同肾切除大鼠肾脏病变规律发生差异性改变。1/2肾切除大鼠肾脏缺失后存在明显代偿性作用,血肌酐、血尿氮缓慢上升,尿肌酐、肌酐清除率下降迟缓,肾小管、肾小球组织损伤均为轻度损伤;5/6肾切除大鼠肾缺失后肾脏各项指标急剧恶化,血肌酐、血尿氮快速上升,显著高于1/2肾切除大鼠(P0.01),尿肌酐、肌酐清除率显著快于1/2肾切除大鼠下降程度(P0.01),肾小管上皮受损严重,肾小球重度硬化,间质存在炎性细胞浸润。该研究为建立肾脏缺失模型提供了依据。     

嗜热链球菌发酵剂的筛选及其发酵特性研究

嗜热链球菌作为发酵剂菌株,其发酵特性直接影响着酸奶质地和风味。本研究采用选择性平板、形态观察和16S rDNA基因序列分析,从发酵乳制品和植物制品样品中共鉴定出10株嗜热链球菌;并通过测定菌株生长曲线、pH值及乳酸产量,从中筛选出S. thermophilus ST-M-03和ST-P-07两株性能较好的菌株。培养14h发现,ST-M-03和ST-P-07的OD₆₀₀为1.75,pH值分别为4.44和4.47,乳酸含量为241.63和238.17μmol/mL;两株菌株在5h内均可使酸奶的pH值达到4.5;贮藏期结束S.thermophilus ST-M-03和ST-P-07发酵的酸度分别增加了7.64和10.13 T,活菌数为8.74和8.78 lg CFU/g,黏度为3602.78和20140.38mPa·s,离心沉淀率为57.18%和49.99%。表明S.thermophilus ST-M-03和ST-P-07菌株均具有良好的生产性能,其产酸能力、弱后酸、稳定性和低离心沉淀率均与商品化发酵剂菌株相当,是两株性能优良的酸奶发酵剂菌株。