长双歧杆菌BBMN68菌株的耐氧驯化研究

双歧杆菌是一种经典的益生菌,其对人体健康的促进作用已得到了广泛的研究证明,在功能食品及药品中具有巨大的应用价值。目前成功应用的双歧杆菌多局限于耐氧能力较强的动物双歧杆菌。由于双歧杆菌对氧敏感的特点,大量性能优良菌株的应用受到了限制,而耐氧驯化是解决这一问题的有效手段。通过逐步提高氧分压的方式对一株来自长寿老人肠道的双歧杆菌BBMN68进行耐氧驯化,成功分离到1株耐氧能力提高的菌株;通过16S r DNA测序确定驯化菌株具有稳定的遗传性;通过原始菌株及驯化菌株对酸及胆盐的耐受能力测定,确定驯化菌株具有稳定的耐受性能。     

航天诱变高产单细胞蛋白啤酒酵母YB-6菌株的筛选

通过对经航天诱变的啤酒酵母多级平板分离、摇瓶筛选,得到了一株能在玉米秸秆水解液中生长且高产单细胞蛋白的YB-6菌株.结果表明YB-6菌株在玉米秸秆粉酶解液培养基中,30℃培养72 h后,生物积累量达到27 g/L左右,比出发菌株提高了约34%,为利用啤酒酵母YB-6进一步降解玉米秸秆生产单细胞蛋白饲料提供了基础.     

基于体外模拟肠道微生态系统的乳双歧杆菌MN-Gup益生元筛选及其发酵特性研究

体外肠道微生态模拟是一种研究食源性成分对肠道菌群组成和代谢产物组成的手段。本研究建立了成人的体外肠道菌群生态模拟体系,研究筛选低聚果糖、低聚半乳糖、菊粉、低聚木糖和低聚甘露糖与乳双歧杆菌MN-Gup协同增效调节肠道有益菌的作用。结果表明,添加1.5%比例低聚木糖组能够显著提升菌群中双歧杆菌的比例,而同样添加1.5%的低聚半乳糖组对乳杆菌提升更为明显,各益生元组对阿克曼菌的比例并无显著影响,菊粉组可以显著提升厚壁菌门/拟杆菌门的比值。以上结果表明,乳双歧杆菌的不同合生元组合对于肠道菌群的调控作用有明显差异,在体外肠道模拟体系下含有低聚木糖的合生元组合更有助于提高菌群中双歧杆菌的比例。     

赖链霉素多杀性巴氏杆菌菌株的辐射诱变筛选

研究提出在多杀性巴氏杆菌辐射诱变育种中选择辐照剂量的依据,建立了一种有效地筛选赖链霉素菌株的改良平板筛选方法,在国内外首次应用~(60)Co-γ射线诱变获得赖链霉素多杀性巴氏杆菌菌株。选出的赖链霉素多杀性巴氏杆菌SD_(724)菌株免疫鸡,能保护22/23,具有良好的免疫原性。     

诱变耐金霉素,土霉素腊样芽胞杆菌菌株的实验研究

腊样芽胞杆菌经过反复诱变得到能耐金霉素、土霉素的菌株．该菌株形态、培养特性、生化反应及毒性与诱变前相同。     

利用原生质体诱变筛选植酸酶高产菌株

对产植酸酶的纯化黑曲霉用混合酶制取原生质体进行了研究。研究发现,经诱变后的原生质体在再生过程中菌落形态发生了明显变化,从中选育出了一株植酸酶的高产菌株,并对其遗传稳定性进行了鉴定。     

发酵羽毛粉的细菌菌株筛选及诱变

从自然界分离出一株产角蛋白酶的G-短杆菌。通过紫外线和亚硝酸钠复合诱变,筛选出产角蛋白酶活力强的诱变株RUN25.903,通过优化试验得到复合诱变的最优条件为15 W紫外灯进行紫外线诱变,诱变距离30 cm,诱变时间25 s;0.2 mol/L亚硝酸钠溶液等体积诱变,诱变时间90 s。诱变株RUN25.903产角蛋白酶活力最高达0.936 U/m L,比诱变前提高86.1%,发酵液的氨基酸含量达23.82 mg/m L。研究为工业化生产生物发酵羽毛粉培育优良菌种。     

高产纤维素酶菌株的微波诱变及筛选研究

为了能够选育出一株高产纤维素酶的优良菌株,采用微波对其孢子悬液进行不同时间的辐照处理后,筛选出一株能高产纤维素酶的突变菌株B40 1,在最适产酶条件下,该突变菌株所产纤维素酶的滤纸酶活力和羧甲基纤维素酶活力分别是出发菌株的169.9%、110.0%。     

长双歧杆菌BBMN68工业化培养基筛选

本实验以长双歧杆菌BBMN68生长状况为评价指标筛选一种低成本、易配制的工业化培养基。实验比较了菌株在四种常用双歧杆菌培养基中的生长状况,结果表明NPNL培养基生长效果最好（P〈0．05）;通过低成本氮源代替NPNL氮源,发现玉米浆干粉培养效果最好（P〈0．05）,玉米浆干粉最佳用量为55g／L;玉米浆干粉培养基中剔除磷酸盐缓冲液、无机盐溶液、L-半胱氨酸盐酸盐,对BBMN68生长状况没有显著性影响（P〉0．05）。长双歧杆菌BBMN68工业化最佳培养基配方为：55g／L玉米浆干粉,10g／L葡萄糖,1g／L吐温-80,活菌数达到4．4×10^9cfu／mL。     

一株高产中性蛋白酶菌株的筛选与诱变

通过牛奶平板初筛、摇瓶复筛,从土壤中筛选出产中性蛋白酶菌株L01,以紫外线和亚硝酸钠为诱变条件,分别利用单因素和复合诱变方法提高菌株的产酶能力,最后对遗传稳定性良好的菌株L01F进行鉴定。结果表明：菌株L01分别经过紫外线照射60 s和亚硝酸钠处理12 min时,其中性蛋白酶酶活力最高,为459.13 U/mL,是原始菌株的2.07倍。在先亚硝酸钠处理12 min后紫外线照射48 s的最适复合诱变条件下,筛选得到的高产中性蛋白酶菌株L01F,酶活力达到577.87 U/mL,是原始菌株L01的2.61倍,且该菌株传代10次后仍具有良好的遗传稳定性。最后经过形态学和分子生物学鉴定,确定筛选出的菌株L01F为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）。[关键词] 中性蛋白酶|诱变|稳定性研究|枯草芽孢杆菌     

多抗性保加利亚乳杆菌的诱变和筛选

通过紫外诱变和硫酸二乙酯诱变,筛选出抗生素抗性(头孢氨苄和氨苄西林)的保加利亚乳杆菌,同时模拟人体胃酸环境(pH1.5～4.5)和十二指肠高胆酸盐环境(0.1g/100mL～0.4g/100mL)对诱变后的保加利亚乳杆菌的抗性进行了研究。结果表明,保加利亚乳杆菌突变株可抗头孢氨苄和氨苄西林(均为2mg/mL),并且在pH2.5～4.5时具有较强的生存能力,培养4h活菌数仍达108cfu/mL以上,在pH1.5条件下仍有部分存活。在0.1g/100mL～0.3g/100mL胆酸盐条件下培养4h,活菌数仍达106cfu/mL以上,且能在0.4g/100mL胆汁盐中存活。     

紫花苜蓿的航天诱变

航天诱变育种是以高科技返回式卫星为平台的新兴育种方法,其目的是利用太空的特殊环境使种子遗传信号发生改变,地面种植后,获得有益突变体,选育新种质、新材料和培育新品种的植物育种技术。航天育种已在小麦（Triticum aestivum）、水稻(Oryza sativa)、辣椒（Capsicum spp.）、番茄(Lycopersicon esculentum)等农作物及蔬菜上被广泛应用,且已通过国家或省级鉴定了72个品种,我国的航天育种走在世界前列,但牧草航天育种尚处于初始阶段,主要集中于紫花苜蓿（Medicago sativa）方面的相关研究。本文简要阐述紫花苜蓿航天诱变研究的自身特点,以及目前我国紫花苜蓿航天诱变研究进展,并提出当前存在的问题。     

菊苣航天诱变材料RAPD分析及高产品系筛选

菊苣是一种从国外引进的优良牧草品种,产量高、适口性好,现已在生产中广泛应用.该研究以菊苣航天诱变材料和普那、将军2个主推菊苣品种共29份材料为研究对象进行RAPD分析和产量研究.从100个RAPD随机引物中筛选出的多态性强、重复性好且稳定性高的引物15个,15个引物共扩增出78条带,其中多态性带为63条,比例为87.7...     

动物双歧杆菌A6体内外安全性评价

本研究对动物双歧杆菌A6进行了体外及体内的安全性评价,为菌株应用提供基础保障。通过体外试验评价了A6的抗生素敏感性和生物胺的生成;通过体内试验评价了A6的经口毒性及移位风险。试验结果表明,A6不存在菌株特有的抗生素敏感性,排除了抗生素耐性横向转移的风险;在脱羧酶培养基中培养,未发现该菌株产生生物胺;灌胃试验发现,将该菌株分别以2×10^8cfu/mL、2×10^9cfu/mL、2×10^10cfu/mL低中高三种剂量灌胃小鼠,每只小鼠每天灌胃0.2mL,连灌28d,结果小鼠无不良反应,在其血液、肾脏、肝脏未发现该菌株的移位现象。在对动物双歧杆菌A6安全性评价中,未发现菌株的不安全因素。     

常压室温等离子体结合紫外诱变筛选红霉素高产菌株

利用常压室温等离子体射流诱变(ARTP)和紫外照射对红霉素产生菌进行复合诱变,得到4株产量明显提高的突变菌株,4株菌的平均发酵效价较出发菌株提高25.2%;其中一株(12#菌株)经发酵摇瓶验证,红霉素发酵单位可达10029单位/mL,比出发菌株提高了28.6%,且遗传稳定性良好。实验证明ARTP-UV复合诱变是一种简单高效的筛选方法。     

青春双歧杆菌培养基的优化及冻干保护剂的筛选

针对青春双歧杆菌的营养需要,采用单因素试验对双歧杆菌培养基进行优化,得出最佳的培养基配方为:蔗糖2%、酪蛋白胨1%、大豆蛋白胨1%、酵母浸膏0.7%、低聚木糖0.3%、磷酸二氢钾0.05%、甘蓝汁8%。试验测定了青春双歧杆菌在最优培养基中的生长曲线,并同时测定pH值和吸光值的变化,确定发酵培养的终止时间为14~16h,活菌数可达2.0×109cfu/mL;同时通过单因素正交试验筛选出其最佳冻干保护剂为:海藻糖20%、脱脂奶粉20%、甘油1.0%、蔗糖8%、明胶5%。     

凤尾鸡冠花耐盐突变体的NaN_3诱变及筛选

为了获得凤尾鸡冠花的耐盐突变体,试验采用NaN_3诱变凤尾鸡冠花组培苗,并在NaCl胁迫下以未经诱变组培苗为对照,测定并比较了凤尾鸡冠花细胞膜透性、叶绿素含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性以及丙二醛(MDA)和脯氨酸含量,筛选耐盐突变体。结果表明:NaCl和NaN_3均能显著抑制凤尾鸡冠花组培苗的生长和发育,其耐NaCl临界浓度为1.0%,NaN_3的适宜诱变浓度为500 mg/L,处理2 h;突变体的细胞膜透性和MDA含量均显著低于对照(P0.05),叶绿素含量、SOD活性和脯氨酸含量均显著高于对照(P0.05)。盆栽盐胁迫试验中对照全部死亡,突变体的存活率为90%。说明筛选的凤尾鸡冠花突变体具有较强的耐盐性。     

双歧杆菌的研究进展

双歧杆菌是人和动物肠道内最主要的生理性细菌之一，每克肠内容物中约含10^8-10^10个，在微生物学上属于原籍菌群，它与其它生理性细菌成员构成了微生物群落，并与宿主构成一个微生态系统。因为双歧杆菌具有维持微生态平衡、生物拮抗、免疫调节、营养等多方面的生理功能，所以双歧杆菌被开发成微生态制剂，广泛应用于医疗、保健、食品等领域并已成为微生态制剂的核心。下面将对双歧杆菌的形态特征、生理功能和双歧杆菌制剂的应用现状及展望做一综述。     

双歧杆菌的研究进展

双歧杆菌是人和动物肠道内最主要的生理性细菌之一，每克肠内容物中约含10^8～10^10个，在微生态学上属于原籍菌群，它与其他生理性细菌成员构成了微生物群落，并与宿主构成一个微生态系统。因为双歧杆菌具有维持微生态平衡、生物拮抗、免疫调节、营养等多方面的生理功能，所以双歧杆菌被开发成微生态制剂广泛应用于医疗、保健、食品等领域并已成为微生态制剂的核心。