分子鉴定2种猪食道口线虫熔解曲线分析试验的建立

基于猪有齿食道口线虫和四棘食道口线虫IGS rDNA序列的遗传变异情况,于种内保守、种间差异明显的序列片段设计1对引物,建立了区分2种猪食道口线虫的熔解曲线分子鉴定方法。研究结果显示,该方法可通过熔解曲线差异而准确鉴定猪食道口线虫2个种,与其他线虫和吸虫无交叉反应,特异性良好;能检测猪食道口线虫单虫卵样品和FTA卡片的DNA模板。该研究为猪食道口线虫种类准确鉴定提供了一种新的准确、敏感、特异且快速的分子手段。     

柔嫩艾美耳球虫癸氧喹酯耐药株的诱导研究

采用药物浓度递增法,在实验室条件下进行柔嫩艾美耳球虫耐药虫株的诱导。以5.4 mg/kg癸氧喹酯为起始诱导浓度连续传代,以病变记分减少率(RLS)、最适抗球虫指数(POAA)和抗球虫指数(ACI)3项指标综合判定耐药性,经9次传代,成功地诱导出对54 mg/kg癸氧喹酯具有完全抵抗力的耐药虫株,为进一步的球虫耐药的分子机理研究提供材料。     

垃圾堆肥放线菌发酵过滤液对高羊茅初期生长的影响

通过向草坪基质中加入不同浓度生活垃圾堆肥放线菌发酵滤液,研究了堆肥放线菌发酵液对草坪草高羊茅萌发及初期生长的影响。结果表明:各浓度放线菌发酵滤液对高羊茅的生长指标和叶绿素含量均有显著的促进作用,其中,以稀释4倍的放线菌发酵滤液的促进效果最为明显。在稀释4倍的放线菌发酵滤液的处理下,高羊茅的发芽率、株高、地上干重、地下干重和叶绿素含量分别比对照提高了17.3%、17.9%、20.0%、66.7%和60.3%。虽然,不同浓度的放线菌发酵滤液对高羊茅的萌发和初期生长均具有一定的促进作用,但以稀释4倍的放线菌发酵滤液效果为最佳。     

兔肠艾美耳球虫实时荧光定量PCR检测方法的建立

为建立一种肠艾美耳球虫定量的检测方法,在肠艾美耳球虫核糖体第二内转录间隔区(ITS2)序列设计一对特异性引物,以10倍倍比稀释的已知卵囊含量的肠艾美耳球虫DNA为模板进行SYBR GreenⅠreal-time PCR的扩增和标准曲线的建立。结果显示,最低可检测1个卵囊含量的样品,与同属的黄艾美耳球虫、中型艾美耳球虫、大型艾美耳球虫均不发生交叉反应,重复性变异系数小于2%。表明建立的实时荧光定量PCR检测方法灵敏度高,特异性强,重复性好,可为快速检测肠艾美耳球虫提供有效的方法。     

华南虎绦虫ITS及5.8S rDNA序列扩增与序列分析

以从广州动物园华南虎体内采集的2条绦虫作为研究对象,利用核糖体DNA(rDNA)内转录间隔区序列(ITS)的遗传标记特点,用保守引物BD1和BD2对提取的DNA进行PCR扩增,经胶回收纯化后,连接到pGEM-T Easy载体上,然后转化并鉴定出阳性菌落,对菌落进行PCR扩增并测序,将测序结果与GenBank公布的相关绦虫ITS序列进行对比分析,结果显示,采自广州动物园华南虎的2条绦虫ITS及5.8S rDNA序列总长均为1387bp,序列相似性为100%,与猬迭宫绦虫(Spirometra erinaceieuropaei)、舌形属绦虫(Diphyllobothrium ligula)、宽节双叶槽绦虫(Diphyllobothriumlatum)的ITS及5.8S rDNA序列相似性分别为96.7%、66.5%、71.5%,结果显示,此次分离的绦虫属于迭宫属的猬迭宫绦虫,所测得的华南虎猬迭宫绦虫的ITS序列为首次报道。