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1.
在植物体内,FBPase酶是卡尔文循环内一个不可缺少的酶,在干旱、高温、盐碱等非生物胁迫中FBPase同样起着重要的作用。本试验从典型的耐极端低温的植物天山雪莲(Saussurea involucrata Kar.ER Kir.)中克隆了一段FBPase序列,命名为SikFBP1,同时也克隆出了一段SBPase序列命名为SikSBP。实时荧光定量显示2个基因对寒冷胁迫都做出了响应,为验证其抗寒性功能分别转入了烟草中。通过RT-PCR验证获得转化植株,低温胁迫下,通过丙二醛(MDA)含量、相对电子渗透率(REL)、过超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化氢酶(CAT)活性、PSⅡ最大光化学效率(Fv/Fm)及光合效率(Pn)的测量,发现转SikFBP1基因株系与转SikSBP基因株系在光合效率上提高较为微弱,但在耐寒性方面得到了一定的提高,为FBPase的功能研究提供一定参考。 相似文献
2.
以马齿苋子叶和下胚轴为外植体,研究了外源激素对其不定芽的诱导及不同浓度6-BA、NAA、GA3对不定芽伸长的影响,并测定了马齿苋子叶和下胚轴对草丁膦的敏感性。结果表明:MS+2.0mg/L 6-BA+100mg/L水解酪蛋白为下胚轴不定芽再生最适培养基,不定芽再生率达96.65%;MS+3.0mg/L 6-BA+100mg/L水解酪蛋白为子叶不定芽再生最适培养基,不定芽再生率达100%;最佳的不定芽继代培养的培养基为MS+0.5mg/L 6-BA+0.05mg/L NAA+0.2mg/L GA3;生根培养基为MS+2.0mg/L IBA,生根率达100%;以子叶和下胚轴为材料研究其对草丁膦的敏感性,发现子叶对草丁膦更敏感,0.050mg/L草丁膦对子叶的致死率达到89.0%;对下胚轴的致死率为71.5%。该研究建立了马齿苋植株高频再生体系,并确定了其对草丁膦的敏感性,可为该品种的基因工程研究提供必要的理论和实践基础。 相似文献
3.
采用林间试验,在苹果小吉丁虫幼虫期对受害野苹果树进行不同施药方式和施药浓度的组合处理,探究16%虫线清乳油对野苹果小吉丁虫化学防治效果。试验结果表明,采用打孔注药和输液法施药方式在30 d后校正防效均达到90%以上;采用输液法及施药浓度为1倍稀释时,在整个防治期内校正防效均高于其它处理。对返青率进行比较分析时发现,对于野苹果树生长,最适合的施药浓度为2倍稀释。因此,在虫害防治前期采用1倍稀释浓度、防治后期采用2倍稀释浓度进行施药防治的效果较好。 相似文献
5.
以蛋白桑的幼嫩叶片为外植体,以MS为基本培养基,采用正交实验设计,研究不同浓度的植物生长调节剂对蛋白桑植株再生的影响。结果表明:叶片诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+TDZ 1.0mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1);最佳分化培养基为MS+TDZ 0.2mg·L~(-1)+NAA 0.09mg·L~(-1),分化率为21.65%;培养基1/2MS+PVP 0.2g·L~(-1)+NAA 0.5mg·L~(-1)生根率最高,达到66.70%;对草丁膦的敏感性试验中,草丁膦浓度0.04mg·L~(-1)为蛋白桑叶片半致死浓度,草丁膦浓度0.05mg·L~(-1)对蛋白桑叶片的致死率为75.00%,草丁膦浓度0.07mg·L~(-1)的致死率为100.00%。 相似文献
6.
杂花苜蓿高效再生体系的建立 总被引:5,自引:0,他引:5
通过对新疆塔城杂花苜蓿品种下胚轴再生植株的系统研究,经筛选获得种子萌发培养基为:1/2MS无糖培养基;胚性愈伤组织诱导培养基:MS+2,4-D2mg/L+6-BA0.5mg/L+蔗糖3%。胚性愈伤组织诱导率为100%;胚状体诱导培养基:SH+2,4-DZing/L+6-BA0.5mg/L+CH250mg/L+蔗糖1%,胚状体诱导率为86.96%;胚状体萌发培养基:SH+GA30.5mg/L+CH250mg/L+蔗糖1%,胚状体萌发率为90%-95%;生根培养基:1/2MS+IBA0.5rag/L+蔗糖1%。生根率为100%。完成再生时间120d左右。 相似文献
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8.
新疆甜瓜高效再生体系的建立及NPR1/HRP双价抗病基因转化 总被引:1,自引:0,他引:1
以厚皮甜瓜5d龄无菌苗子叶为外植体,MS和1/2MS为基本培养基,研究了添加6-BA、IAA和卡那霉素不同浓度,进行甜瓜再生体系与根癌农杆菌介导的转化体系的建立。结果表明:甜瓜子叶最适宜的不定芽分化培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+IAA 0.3mg/L,芽伸长培养基为MS+6-BA 0.75mg/L+IAA 0.3mg/L,生根培养基为1/2MS+IAA 0.3mg/L,适宜的转化条件为外植体预培养48h,农杆菌菌液浓度为OD600=0.3~0.4,侵染时间为15min,22℃暗培养48~55h。经75mg/L的卡那霉素筛选,共获得再生甜瓜幼苗21株,其中8棵经PCR鉴定证明NPR1/HRP双价抗病基因已经整合到甜瓜基因组中,即转化率为38%。 相似文献
9.
重组轮状病毒多抗原表位的克隆、表达及植物表达载体的构建 总被引:1,自引:0,他引:1
为了研制基于表位的轮状病毒亚单位疫苗,用PCR的方法得到RV(Rotavirus RV)VP4的抗原表位编码序列,并人工合成了RV VP7的3个抗原表位编码序列,通用辅助性T淋巴细胞表位(PADRE)氨基酸序列和破伤风毒素(Tetanus toxin,TT)上的一个T细胞激活位点[1,2],各位点间以非极性的甘氨酸和脯氨酸分隔以保持各表位的相对独立性,使用搭桥法PCR(Over lapextension PCR)、酶切、连接等基因工程的方法将各个表位片段串联拼接在一起,组合成一条轮状病毒(RV)多表位抗原基因,将其转入原核载体质粒pTHioHis B,在大肠杆菌DH5a克隆,并在BL21中表达,表达蛋白经SDS-PAGE分析,相对分子量与预期结果相符;重组蛋白经轮状病毒快速检测试剂盒检测有抗原性。将此多表位抗原基因插入高效植物表达载体pE1802,为研制重组轮状病毒抗原表位亚单位疫苗、转基因植物口服疫苗做了前期准备。 相似文献
10.
产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)LT和ST是导致人和动物腹泻的主要病原菌。利用PCR方法分别从pGEM-5Zf( )-STI、K88ab(LT ,ST )质粒中扩增到了STI、STII基因,然后通过三引物PCR实现了STI、STII基因的融合,再与LTB基因融合,并置同一阅读框。LTB基因的5′位于STII基因的3′端,并在ST基因和LTB基因之间插入7个氨基酸的连接肽。将融合基因STI-STII-LTB构建到带有核基质结合区序列(MARs)的植物表达载体pBI121-MARs中,并通过冻融法导入根癌农杆菌EHA105。 相似文献