人白介素-2基因打靶载体的构建、转染及鉴定

为研究人白介素2基因在奶山羊胎儿成纤维细胞中的表达,构建人白介素-2基因的山羊β-酪蛋白位点打靶载体。以质粒pBCI为模板扩增山羊β-酪蛋白上游2．5kb和下游3．5kb的序列作为5’和3’同源臂,将克隆得到的人白介素2基因和neo基因插入到2个同源臂之间,获得山羊β-酪蛋白基因打靶载体pBN153。利用脂质体将重组质粒转染奶山羊胎儿成纤维细胞进行G418筛选,并采用PCR和实时定量PCR方法对人白介紊-2基因在稳定株中的表达进行验证。检测结果表明,本试验构建的打靶裁体pBN153成功转染奶山羊胎儿成纤维细胞,将人白介素2基因成功整合至奶山羊胎儿成纤维细胞基因组中,为通过体细胞核移植法制备人白介素-2基因乳腺生物反应器的研究奠定了基础。     

内蒙古巴彦淖尔市农区舍饲繁殖母羊生产现状

内蒙古巴彦淖尔市饲草料资源丰富,为农区舍饲繁殖母羊提供了坚实的物质基础,随着繁殖母羊养殖技术不断提高,其养殖规模不断扩大,使得该市肉羊产业取得了长足的发展。主要对巴彦淖尔市农区舍饲繁殖母羊生产所取得的成绩和不足作一介绍,并对该市肉羊产业的发展前景进行展望,以期为巴彦淖尔市制定繁殖母羊的下一步发展决策提供参考。     

饲用燕麦草对肉羊育肥效果的影响研究

研究在肉羊日粮中分别添加燕麦干草、不同比例的燕麦与全株青贮玉米青贮饲料混合,并与在日粮中添加羊草和青贮饲料混合做对照,从而为燕麦在肉羊养殖中的推广应用提供科学依据。选取出生日龄和体重相近的本地蒙寒杂交羔羊80只,按体重平均分为4组。试验期内,试验组在育肥户目前饲料配方的基础上适当减少羊草的用量。在对照组(ER)的日粮中添加羊草和青贮饲料,试验组分别以燕麦干草、燕麦与全株青贮玉米饲料(2∶1)混合、燕麦与全株青贮玉米饲料(1∶1)混合替代全混合日粮中的羊草和青贮饲料。结果显示,利用燕麦与全株青贮饲料(1∶1)混合替代全混合日粮中的羊草和青贮饲料,肉羊日增重最大,显著高于对照组和只添加燕麦组(P0.05),试验2组和试验3组宰前活重、屠宰率均高于对照组,尤其是试验3组宰前活重比对照组高2.43 kg,但差异不显著(P0.05)。表明在育肥羔羊日粮中添加一定比例的燕麦和青贮饲料,可以提高肉羊对饲草料的利用效率,提高日增重和屠宰率。     

无抗性标记的人白血病抑制因子打靶载体的构建及表达

为了实现人白血病抑制因子基因(hLIF)在奶山羊乳腺上皮细胞中的稳定表达,本实验利用条件重组元件LoxP序列、山羊β-酪蛋白5'和3'同源臂、正负向筛选标记基因和hLIF基因构建hLIF基因打靶载体。脂质体法转染奶山羊(capra hircus)乳腺上皮细胞,进行遗传霉素(G418)和丙氧鸟苷(GANC)筛选获得同源重组的阳性克隆,并通过PCR、实时定量PCR和Western blot检测阳性克隆中hLIF基因的表达情况。酶切和测序分析结果显示,实验成功构建了hLIF基因打靶载体pLoxP-NT53L。阳性克隆经PCR、实时定量PCR和Western blot均检测到了目的条带。表明打靶载体pLoxP-NT53L已经成功整合至山羊β-酪蛋白基因座中,并能在奶山羊乳腺上皮细胞中特异性表达hLIF蛋白。为无抗性标记的转hLIF基因奶山羊生产提供了打靶载体。