免疫组织化学法定位肝脏中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的初步研究

本研究旨在探索定位肝脏中脱氧雪腐镰刀菌烯醇（deoxynival,DON）的方法,为以后定位全身组织中的DON提供方法依据。选用刚断奶的二元白猪,保定后,耳缘静脉滴注葡萄糖盐水,外科手术法暴露其肝脏,采用微量进样器缓缓注入DON,采用免疫组织化学染色结合显微镜观察,对肝脏中的DON进行定位研究,可以在注射针眼附近定位到DON。免疫组织化学法可以作为一种定位组织中DON的方法。     

免疫组织化学法定位猪脾脏中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的研究

利用免疫组织化学法研究了脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)在猪脾脏分布定位,为DON体内残留及DON对免疫系统影响进一步研究提供依据。选用10头健康阉公猪,随机分为二组,一组经乳静脉注射DON标准品,注射剂量为75μg/kg体重,另一组经乳静脉注射相当体积生理盐水。注射完成后开始计时,并观察记录猪的反应情况,待30min后放血宰杀,并迅速取脾脏,4%多聚甲醛固定,经脱水、包埋及切片后,采用免疫组化法定位脾脏中DON的分布情况。免疫组化法定位结果显示,在75μg/kg体重给药组中,脾组织中的血管壁周围见有DON阳性反应颗粒,而对照组未见阳性反应颗粒。     

猪瘟兔化弱毒免疫猪淋巴细胞亚类及转化水平、IFN-γ的变化与分析

为研究免疫猪瘟兔化弱毒(HCLV)对猪细胞免疫应答的影响,本研究分别采用HCLV脾淋毒单独(A组)、HCLV细胞毒与兔脾淋组织液联合(B组)、HCLV细胞毒单独(C组)及生理盐水(对照组)免疫仔猪,应用流式细胞术、淋巴细胞增殖试验及ELISA方法测定免疫前后外周血淋巴细胞(PBL)亚类比值、PBL非特异性(NSI)及特异性(SSI)刺激指数、IFN-γ浓度。结果显示免疫后各组CD3+/PBL与CD3+CD8+/PBL差异不显著;CD3+CD4+/PBL于第7 d时A、B和对照组显著高于C组(p0.05);CD3+CD4+/CD3+CD8+于第7 d、14 d时A、B和对照组显著高于C组(p0.05),并且C组CD3+CD4+/CD3+CD8+显著降低(p0.05);NSI于第3 d、7 d时A与B组显著高于C组(p0.05),而C组显著高于对照组(p0.05);SSI于第3 d、7 d时A组显著高于B与C组(p0.05),而B与C组显著高于对照组(p0.05);IFN-γ含量由高至低依次为:A、B、C和对照组,并且于第3 d、7 d时差异显著(p0.05)。研究结果表明,HCLV细胞毒引起机体CD3+CD8+相对更快速增殖,而HCLV脾淋毒引起机体CD3+CD4+相对更快速增殖及NSI、SSI、IFN-γ浓度更高,脾淋毒与细胞毒可能侧重不同的免疫分子途径发挥免疫保护效力;兔脾淋组织液对NSI和IFN-γ浓度具有增强作用。     

免疫组织化学法定位猪肾脏中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的研究

脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)是目前全球污染谷物最严重的真菌毒素之一。在所有的易感动物中,以猪最为敏感。该研究采用DON标准品,通过静脉注射的途径,研究该毒素在猪体内肾脏的分布情况,为毒素的残留提供依据。选用10头健康阉公猪,随机分为2组,一组经乳静脉注射DON,注射剂量为75μg/kg体质量,另一组经乳静脉注射生理盐水。注射完成后开始计时,并观察记录猪的反应情况,待30min后放血宰杀,并迅速取肾脏,采用免疫组化法定位肾脏中DON的分布情况。研究结果显示,染毒剂量75μg/kg体质量组,静注后约5～10min开始出现明显的异常反应。具体表现为:狂躁不安,不停的磨牙,咀嚼,之后大量流涎,随之出现呕吐等症状,这一过程的持续时间对该组猪来说存在个体差异。免疫组化法定位结果显示,在肾小囊的壁层见有DON的分布。     

猪延髓中微血管及静脉注射呕吐毒素后阳性细胞的分布

应用组织学方法对猪延髓微血管及静脉注射呕吐毒素(DON)后在猪延髓的分布进行了初步观察.结果显示,进入延髓的动脉有较厚的弹性纤维膜,平滑肌层厚度为弹性膜的一半,向背侧延伸的分支,管壁薄,仅见内皮细胞和周细胞.在网状结构与纤维束间见有微血管,管壁未见弹性纤维.电镜免疫组化染色结果显示,延髓最后区毛细血管内皮细胞间有的部位有紧密连接,而有些部位缺失,内皮细胞与胶质细胞之间有较宽的空隙,有些部位缺少周细胞.D()N免疫阳性反应为棕褐色或棕黄色颗粒,主要分布于延髓微动脉管壁及最后区毛细血管周边神经元细胞质中,细胞核内量少或无反应.结果表明,猪延髓内不同部位的微血管的分布及结构均有差异,为猪的中枢神经系统脑血管的组织学增加了内容.     

链霉菌抗生物素蛋白—过氧化物酶连结法定位肝脏中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的研究

脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON),又名呕吐毒素,是目前全球谷物污染最严重的真菌毒素之一。在所有的易感动物中,以猪最为敏感。本研究选用10头健康阉公猪,随机分为2组,染毒组和对照组,染毒组经乳静脉注射DON,注射剂量为75μg/kg体重,对照组经乳静脉注射生理盐水。注射完成后开始计时30 min后放血宰杀,迅速取肝脏,采用链霉菌抗生物素蛋白—过氧化物酶连接结(streptavidin-perosidase,SP)法定位肝组织中的DON。SP法定位结果显示,在染毒组肝门管区小叶间静脉的血管壁有DON的分布。本研究采用SP法定位DON在猪体内消化器官组织的分布情况,为毒素的残留研究提供依据。