地源性优势青贮发酵乳酸菌的筛选与鉴定

为了获得饲料青贮发酵优势乳酸菌株,用其研制高效青贮微生物添加剂.通过产酸和抑菌效果试验,对前期分离得到的6株地源性乳酸菌进行检测,然后采用PCR技术和最适生长条件试验,将产酸和抑菌效果均优良的乳酸菌株作进一步鉴定筛选.结果表明,6株地源性乳酸菌菌(编号为F1、F2、F3、T1、T2、T3)中的F1和T2株产酸效果最好(...     

家兔人工授精技术的应用

人工授精是用人为的方法获得公兔的精液,然后通过一定的手段输入母兔子宫内,使母兔怀孕的一项技术,它是家兔繁殖、改良最经济、最科学的一种方法,受胎率可达80%～90%。1人工授精的优势1.1品种改良优势人工授精能最大限度的发挥优秀种公兔的利用价值,提高公兔的配种效能。加快兔     

蛋鸡产蛋期死淘率过高的原因分析及防治对策

近几年来，蛋鸡在产蛋期死淘率不断上升，影响了蛋鸡的产蛋性能，难以取得最好的经济回报。据报道，优良品种鸡产蛋期存活率应达９５％以上，但经过我县疫病监测中心对陕西商南地区、湖北孝感地区、南阳１３个县市及驻马店市等１１５０多个场家的监测发现产蛋期死淘率超过１０％以上，甚至高达２０％以上，通过大量的调查和分析，并参考有关的文献，认为造成上述情况的原因主要是疫病防治措施不力和饲养管理水平较差所致。１ 发生原因１．１ 疫病防治方面 疫病防治是养鸡业的关键。据统计，产蛋期死淘鸡中有７０％死于疾病。尽管目前我国比…     

禽网状肉皮组织增殖病的研究进展

禽网状内皮组织增殖病（Reticuloendotheliosis RE）是由反转录病毒科中的禽网状内皮组织增殖病病毒（RE Virus REV）引起的鸡、鸭、火鸡和其他禽的一群病理综合征，该综合征包括急性网状细胞肿瘤形成、矮小病综合征以及淋巴组织和其他组织的慢性肿瘤形成。该病能引起禽的免疫抑制．并可导致严重的疫苗污染．对养禽业造成了极大的威胁。Robinson和Twiehaus于1958年首次在美围分离了REV（T株）。     

发酵饲料生态宝制剂对蛋鸡生产性能的影响

研究发酵饲料生态宝制剂对蛋鸡生产性能的影响。选取400日龄健康海蓝蛋鸡2400只,随机分为4组,每组6个重复,每个重复100只。第1组为空白对照组,饲喂基础日粮,第2、3、4组在基础日粮上分别添加3%、5%和7%生态宝,试验期30 d。试验结果表明,第2、3、4组与对照组相比,3个试验组蛋鸡的平均蛋重显著提高(P<0.05),破蛋率和料蛋比显著降低(P<0.05);与第2组相比,第3、4组蛋鸡的破蛋率和料蛋比均显著降低(P<0.05);与对照组相比,第15、30天各试验组的蛋壳厚度均显著提高(P<0.05)。第30天试验组鸡蛋的蛋黄比重显著提高(P<0.05);蛋鸡应用发酵饲料制剂15 d和30 d后,新城疫疫苗抗体水平均明显高于对照组(P<0.05),其中第3组最好。结果表明,生态宝能提高产蛋后期蛋鸡的生产性能和蛋品质、提高蛋鸡的抗体水平、提高蛋鸡生产的经济效益,综合比较以5%的量添加时效果最佳。     

猪C3d分子佐剂PRRSV GP5基因核酸疫苗的构建及免疫效果的研究

 【目的】构建猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）GP5基因C3d-P28分子佐剂重组质粒,探明C3d-P28分子佐剂的免疫增强效果。【方法】用大肠杆菌疫苗对健康猪进行免疫激活,提取猪肝脏总RNA,RT-PCR克隆C3d-P28并连接至pUC19载体,构建pUC19-P28.n（2、4、6）串联体,然后分别将P28.n（2、4、6）连接至真核表达载体pcDNA3.1构建成 pcDNA3.1-P28.n（2、4、6）。RT-PCR扩增PRRSV GP5基因,分别定向克隆至pcDNA3.1-P28.n（2、4、6）中,构建pcDNA3.1-GP5-P28.n（2、4、6）重组质粒;提取重组质粒进行双酶切、电泳,同时用重组质粒转染Marc 145细胞,经间接免疫荧光进行蛋白表达检测,并用重组质粒免疫小鼠,通过ELISA试剂盒检测小鼠体内抗体、IL-4和IFN-γ的水平,检验重组质粒的免疫效果。【结果】从猪肝脏中克隆了C3d cDNA,构建了pcDNA3.1-P28.n（2、4、6）串联体,并将PRRSV GP5基因定向克隆至真核表达载体pcDNA3.1-P28.n（2、4、6）中,构建了PRRSV GP5重组质粒（pcDNA3.1-GP5-P28.2、pcDNA3.1-GP5-P28.4、pcDNA3.1-GP5-P28.6）;通过检测小鼠血清中抗体、IL-4和IFN-γ的结果显示,抗体效价、IL-4和IFN-γ含量均比对照组高,且以pcDNA3.1-GP5-P28.6组的效果最好,与空白对照及PCDNA3.1-GP5组比较差异均显著（P<0.05）。【结论】构建了猪补体C3d-P28分子佐剂PRRSV GP5重组质粒,该质粒可刺激机体产生较高的体液免疫和细胞免疫水平,补体 C3d-P28分子佐剂能显著增强PRRSV GP5基因的免疫效果。     

蛋鸡产蛋期死淘率过高的原因

目前，集约化养鸡已成为养鸡业的主流，促进了国民经济的发展，满足了人民的生活需要。但近几年来，蛋鸡在产蛋期死淘率不断提高，影响了蛋鸡的产蛋性能，难以取得最好的经济回报。据报道，优良品种鸡产蛋期存活率应达９５％以上，但经过我县疫病监测中心对陕西商南地区、湖北孝感地区、南阳１３个县市及驻马店地区等 １１５０多个场家的监测中发现，产蛋期死淘率超过１０％以上，甚至高达２０％以上，通过大量的调查和分析，并参考有关的报刊文献，认为造成上述情况的原因主要是疫病防治措施不力和饲养管理水平较差所致。１发生原因１．１…     

非洲猪瘟病毒p22蛋白表达、多克隆抗体制备及间接ELISA方法的建立

【目的】试验旨在表达与纯化非洲猪瘟病毒（African swine fever virus,ASFV）的结构蛋白p22,将其作为包被抗原建立ASFV抗体的间接ELISA检测方法,用于诊断非洲猪瘟。【方法】将ASFV p22编码基因KP177R的截短体（24―145位氨基酸）克隆至原核表达载体pET-32a （+）中,将重组质粒pET-32a-p22转化大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞,经0.1 mmol/L IPTG诱导表达5 h,利用镍柱亲和纯化p22蛋白,并进行Western blotting鉴定。利用p22蛋白免疫BALB/c小鼠制备抗血清,并以含p22全长基因的真核表达质粒pCAGGS-EGFP-fp22转染HEK293T细胞为抗原基质,利用间接免疫荧光（IFA）鉴定抗血清的反应性。以重组p22蛋白为包被抗原,优化最佳抗原包被浓度、待检血清稀释度、封闭条件、抗原抗体反应时间、酶标二抗工作浓度等参数,建立ASFV抗体间接ELISA检测方法,并对临床猪血清样品进行检测。【结果】ASFV p22截短蛋白在大肠杆菌中高水平表达,蛋白产量为0.85 mg/100 g菌体;p22蛋白具有良好的免疫原性,小鼠血清抗体效价为1：12 800。本研究建立的ELISA方法（p22-ELISA）的最佳抗原包被浓度为0.125 μg/孔,最佳待检血清稀释度为1：800,最佳酶标二抗稀释度为1：10 000;阴阳性临界值为0.384;与CSFV、PRRSV、PCV2、PRV等抗体阳性猪血清无交叉反应,说明特异性好;批内与批间变异系数均低于10%,表明重复性好。利用p22-ELISA方法检测了263份临床猪血清样品,与商品化ASFV抗体ELISA检测试剂盒的符合率为97.7%。【结论】本研究基于原核表达的p22截短体蛋白建立了用于检测ASFV抗体的间接ELISA方法,该方法特异性强、灵敏度高、重复性好,为ASFV感染诊断和流行病学调查提供了技术支撑。     

皮埃蒙特牛、夏洛来牛杂交改良南阳牛效果比较分析

本文主要介绍了皮埃蒙特牛、夏洛来牛杂交改良南阳牛方面的最新研究成果。测定了大量的皮南杂交牛、夏南杂交牛、南阳牛的体尺体重数据，并对3月龄、6月龄、12月龄各年龄段的体尺体重数据进行比较分析，发现用皮埃蒙特牛改良南阳牛的效果比夏洛来牛的改良效果好。