剑麻AhKH1775基因克隆及其酵母双杂交诱饵载体构建

KH结构域蛋白参与调控植物开花时间、花器官形成、叶发育、miRNA产生和对生物非生物胁迫的响应。前期实验发现AhKH1775可能参与调控剑麻株芽的发育,但是其调控机制仍不清楚。KH结构域蛋白可以通过复合体的方式参与转录后基因表达调控。为获得与AhKH1775相互作用的蛋白,本研究克隆了AhKH1775的完整编码框,构建了酵母双杂交诱饵载体,并检测了诱饵载体的毒性和自激活性。结果显示,克隆获得一个918 bp的编码框,成功构建了诱饵载体,诱饵载体无毒性,但存在自激活性,25 mmol/L的3-AT可以抑制诱饵载体的自激活性。本研究结果为进一步筛选与AhKH1775相互作用的蛋白和深入研究AhKH1775在剑麻中的功能提供依据。     

有机氯农药对肉蛋类的污染与防治

肉类、蛋类是人们营养最丰富,食用最广泛的食品。防止这些食品被农药污染,是关系到广大人民身体健康的大问题。近年来,各国陆续禁止或限制使用六六六(六氯化苯或六氯环乙烷),滴滴涕(二氯二苯三氯乙烷)。我国也采取了一     

烟草疫霉PnRXLR5863的克隆及信号肽鉴定

烟草疫霉引起的剑麻斑马纹病是剑麻生产的主要病害之一。RXLR效应蛋白是疫霉菌中数量最多的一类效应蛋白。为了分离鉴定烟草疫霉中对剑麻产生致病作用的RXLR效应蛋白,本研究基于生物信息分析结合PCR技术克隆候选基因,并利用酵母信号肽捕获系统对信号肽进行功能研究。本研究从烟草疫霉中克隆了一个编码RXLR效应蛋白的基因,命名为PnRXLR5863;该基因长度为402个碱基,编码的蛋白含有134个氨基酸;分子量为15.46 kD,等电点为5.27,是一个疏水性蛋白;SignalP 4.0预测该蛋白含有一个长度为23个氨基酸的信号肽;进化分析结果显示,PnRXLR5863与来自烟草疫霉的蛋白亲缘关系最近;实验结果表明,PnRXLR5863的信号肽,能够使YTK12酵母菌株在CMD-W和YPRAA培养基上生长,并且能将TTC溶液转变为砖红色,表明PnRXLR5863的信号肽具有分泌活性。本研究的结果为进一步研究烟草疫霉侵染剑麻过程中Pn RXLR5863的致病功能提供依据。