苹果M_7砧木组织培养与抗性筛选

以M7组培苗为试验材料,进行继代扩繁和卡那霉素抗性筛选研究。结果表明,M7芽苗在MS+4.0 mg/L6-BA+0.3 mg/L IBA(3%蔗糖)固体培养基中继代时,出现严重的玻璃化,而MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA(3%蔗糖)固体培养基可大大改善其玻璃化程度,使其恢复健康生长;卡那霉素对M7叶片再生、新梢增殖、新梢生根均有抑制作用,并且随卡那霉素浓度增加,M7叶片再生率、新梢增殖率、新梢生根率不断下降;M7叶片愈伤组织形成、愈伤组织生根、新梢增殖及新梢生根对卡那霉素的敏感浓度分别为20、5、40、10 mg/L。     

不同盐浓度下3种结缕草的耐盐性比较研究

以大穗结缕草、沟叶结缕草和日本结缕草为试材,研究了不同浓度NaCl(0.20%,0.40%,0.60%,0.80%)处理40 d后对3种草坪草叶片中保护酶(POD,SOD,CAT)活性、丙二醛、脯氨酸、叶绿素及可溶性蛋白含量的影响,以确定各自的耐盐性强弱。结果表明,随盐浓度增加,3种草坪草叶片中的保护酶活性、丙二醛、脯氨酸含量呈上升趋势。在0.80%盐浓度下,大穗结缕草叶片中的保护酶活性较高而丙二醛、脯氨酸含量较低;低盐浓度下(<0.40%),3种草坪草叶片的叶绿素含量、可溶性蛋白含量随盐浓度升高而升高,高盐浓度下(>0.60%),随盐浓度升高而下降。在0.80%盐浓度下,大穗结缕草叶片的叶绿素及可溶性蛋白含量较高且下降值较小。表明大穗结缕草具有较高的耐盐性。     

柑橘转基因胚性愈伤组织的筛选与再生

转化子的高效筛选与再生是获得转基因植株的关键。为快速有效地筛选出转化子,并尽可能在较短时间内获得纯合的转基因植株,开展了柑橘胚性愈伤组织的转化研究。以椪柑、冰糖橙、默科特橘橙等胚性愈伤组织为外植体,采用根癌农杆菌介导法进行转化试验,根据愈伤组织再生过程中不同发育阶段的组织对抗生素的敏感程度及在不同筛选压下抗性组织的生长情况,提出了＂5步筛选再生法＂,获得了大量的再生细胞系,并经GUS检测证实为转化子。     

南丰蜜橘胚性愈伤组织诱导及其转化研究

南丰蜜橘是原产于中国的古老柑橘品种,其果实皮薄而内甜,深受消费者喜爱,当前南丰蜜橘的品质发生劣变,影响了其商品价值.为采用基因工程育种以改善南丰蜜橘品质,通过诱导其愈伤组织并以其为试材进行了转基因研究.南丰蜜橘自种子实生苗下胚轴处长产生出愈伤组织,挑选胚性愈伤组织进行增殖后,采用根癌农杆菌介导法进行开花相关基因AP1的转化.结果获得22团抗性愈伤组织,平均产出率为7.3团/皿,表明该品种有较高的转化率.抗性愈伤组织经PCR分析、Southern blot检测证实为转化子.研究结果表明南丰蜜橘胚性愈伤组织是基因工程改良的良好受体,可用于其他基因的转化研究.     

盐胁迫对三个高羊茅品种膜脂过氧化及耐盐性的影响

以高羊茅品种"雅典娜"、"金太阳"和"美洲虎4号"种子为试材,测定分析了其在盐碱土和正常土壤上发芽70d后叶片中保护酶活性和丙二醛(MDA)、叶绿素及可溶性蛋白质的含量。结果表明:盐碱土上的"雅典娜"、"金太阳"和"美洲虎4号"叶片的过氧化物酶(POD)活性分别比在正常土上的升高了10.43%、12.68%和61.83%,超氧化物歧化酶(SOD)活性分别比正常土升高了33.96%、41.70%和16.35%,过氧化氢酶(CAT)活性比正常土上的升高了6.18%、106.34%和2.62%;MDA含量比正常土上增加了56.46%、33.56%和65.21%;叶绿素含量分别比正常土下降了35.35%、27.08%和36.59%;可溶性蛋白质含量比正常土降低了23.04%、7.39%和23.49%。其中"金太阳"在盐碱土上受到的膜脂过氧化程度较轻,叶绿素和可溶性蛋白质的含量下降较少,耐盐性较好。     

极晚熟离核桃新品种‘双冬蜜’

‘双冬蜜’是‘冬雪蜜桃’和‘青州蜜桃’杂交选育的极晚熟桃新品种。果实圆形,果面暗紫红色,果肉绿白色,离核,脆,风味甘甜。果核小,不裂果。单果平均质量148 g,果实硬度11.6 kg·cm~(-2),可溶性固形物含量为14.8%。11月上旬成熟,发育期210 d左右,耐贮运。早果丰产性好,4年生树产量达52 500 kg·hm~(-2)以上。     

番茄子叶和下胚轴离体再生体系的建立

以‘09-22’番茄无菌苗子叶和下胚轴为外植体,研究了其在MS附加不同浓度6-BA和NAA/IAA的培养基上的诱导分化及不定芽生根情况。结果表明:IAA比NAA更利于该品种子叶的再生;在不同激素组合下,番茄子叶和下胚轴愈伤组织诱导率均达100%,但子叶的愈伤组织生长状态好于下胚轴,不定芽分化率也略高于下胚轴,然而,下胚轴来源芽的生根较快,且生根效果好于子叶来源芽。该研究筛选出‘09-22’番茄子叶和下胚轴不定芽再生的最佳培养基配方为MS+6-BA 1.0mg/L+IAA 0.5mg/L,最佳生根培养基配方为MS+IAA 0.1mg/L。     

桃果实铜锌超氧化物歧化酶基因PpCuZnSOD的克隆与分析

从已构建的硬肉桃(Prunus persica L.)双久红果实SSH文库中获得4条铜锌超氧化物歧化酶(CuZnSOD)基因的ESTs,通过blast比对和电子克隆后进行了序列拼接和经RT-PCR方法,获得桃果实铜锌超氧化物歧化酶基因PpCuZnSOD全长cDNA序列(GenBank登录号:JX217743).该基因全长665bp,包含一个459bp的ORF(120bp-578bp),编码152个氨基酸,推测蛋白分子量为15.38kDa,理论等电点为5.60.该基因具有典型的高度保守的Cu2+和Zn2+活化中心及特征信号,其氨基酸序列与其他植物的CuZnSOD具有很高的相似性.生物信息学分析结果表明,该蛋白定位于细胞质中,是非跨膜的非分泌性亲水蛋白.二级结构分析结果表明,该蛋白主要由无规则卷曲和延伸链等蛋白质二级结构元件构成,三维结构预测结果显示,PpCuZnSOD有3个转角环和8个折叠构成桶状的活性中心.系统进化分析结果表明PpCuZnSOD与小金海棠(Malus xiaojinensis)sod2同源关系最近,而与荔枝(Lichi chinensis)、龙眼(Dimocarpus longan)和拟南芥(Arabidopsis trifoliate)等亲缘关系较远.QPCR结果表明,PpCuZnSOD在幼果中表达量最高,雌蕊和雄蕊次之,花瓣和叶片中表达量最少;果实成熟前后,PpCuZnSOD在硬肉芽变桃双久红果实中的表达量显著高于软肉桃川中岛白桃中的表达量,表明该基因可能在维持果实质地和硬度方面有一定作用.本研究结果为进一步研究该基因在桃果实成熟软化中的作用奠定了基础.     

生长期内三种结缕草对盐胁迫的响应

试验以大穗结缕草、沟叶结缕草和日本结缕草为试材,研究了不同盐浓度(0,0.2%,0.4%,0.6%,0.8%)对生长期内3种结缕草叶片膜脂过氧化及生长的影响。结果表明,3种结缕草的生物量均随着盐浓度的增加逐渐减小;随着盐浓度的提高及处理时间的延长,3种结缕草的可溶性蛋白含量逐渐降低;相对电导率和丙二醛含量增加,在低盐浓度(0.2%~0.4%)下,两者增加幅度较小,当盐浓度为0.8%时,3种结缕草的相对电导率均达最大值,分别是38.71%,41.32%,40.97%,可溶性蛋白含量均达到最小值,分别为2.08,1.15和1.33 mg/g FW。Pro含量在处理后第10天达最大值,之后逐渐下降,后期变化比较平稳。在低盐浓度(0.2%~0.4%)下,CAT和SOD活性逐渐降低,而高盐浓度(0.6%~0.8%)下,两种酶活性呈上升-下降-上升的趋势。3种结缕草相比,大穗结缕草在高盐浓度胁迫下的相对电导率和丙二醛含量最低,而保护酶活性和可溶性蛋白含量最高。试验证明大穗结缕草抗盐能力最强,沟叶结缕草次之,日本结缕草较差。     

干旱胁迫对北美丁香生长和部分抗旱生理生化指标的影响

以2年生北美丁香"詹姆斯"为试材,用盆栽方法人工模拟土壤干旱胁迫条件,研究了其生长和部分抗旱生理生化指标对水分胁迫的响应。结果表明:丁香苗具有一定的抗旱耐旱潜力,当遭遇干旱胁迫时,其可以通过调节自身的渗透调节物质含量和保护酶活性来减轻干旱伤害。随着干旱胁迫加剧,丁香苗植株高度和茎基生长速率逐渐降低,在重度干旱胁迫下生长几乎停止;随着干旱胁迫强度的增加,其叶片叶绿素和相对含水率(RWC)含量逐渐降低;叶片相对电导率、丙二醛(MDA)和脯氨酸(Pro)含量呈现不断增多的趋势;超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和过氧化物酶(POD)活性先升高后降低,在干旱胁迫40d时活性达到最高,在干旱胁迫50d后其含量不断降低。