重组脱乙酰基酶在大肠杆菌中的表达及活性检测

NodB是来源于根瘤菌的脱乙酰基酶,可水解脱去几丁寡糖非还原端糖基的乙酰基。试验将体外合成的重组nodBNX和nodBBX基因,分别插入质粒pET-28a的lac启动子的下游,构建了可以表达融合蛋白NodB1(T7-tag+NodB+His-tag)和NodB2(NodB+His-tag)的重组大肠杆菌pET-NodB-NX和pET-NodBBX,在0.1 mM IPTG诱导下,两种重组菌均可表达目的蛋白NodB1和NodB2,分子量分别为30 kD和26 kD,经包含体复性、Ni柱亲和层析得到NodB纯化产物,以重组NodB催化几丁五糖的脱乙酰基反应,酶解产物通过薄层层析和ESI-MS检测。试验结果表明:融合蛋白NodB1和NodB2均具有转乙酰基活性,但NodB2活性大于NodB1。     

杞柳丰产栽培的“五改”技术

杞柳丰产栽培的“五改”技术文／刘恩贺武传菊王兆华山东省博兴县杞柳栽培历史悠久，发展面积已达１３３３公顷。近几年来，他们总结出杞柳丰产栽培的“五改”技术，使干条公顷产量由原来的３０００－４５００公斤提高到９０００公斤，干条质量和工艺价值明显提高，柳编工...     

一株改善木薯酒糟发酵蛋白饲料品质的酵母菌株筛选、鉴定和应用

本研究从发酵酒醅中分离出四株具有典型酵母形态的菌株,经过筛选最终获得一株耐酒精且在木薯酒糟中可良好发酵的酵母菌株,命名为JJ-2菌株。经过生理生化特征和18S rDNA鉴定,核苷酸序列与库德里阿兹威毕赤酵母（Pichia kudriavzevii）的同源性达到100%,确定JJ-2菌株为Pichia kudriavzevii。在经过10%黑曲霉处理的木薯酒糟上清液中添加JJ-2菌株可将上清液的化学需氧量（COD）降低33.91%,在木薯酒糟固体发酵过程中,添加JJ-2菌株可以将粗蛋白质含量提高9.29个百分点,真蛋白的含量提高6.83个百分点,有效地改善了木薯酒糟发酵蛋白饲料的品质。 [关键词] 酵母|筛选|鉴定|木薯酒糟|发酵