基于雨课堂的“兽医寄生虫病学”课堂教学改革与实践

雨课堂是清华大学和学堂在线共同推出的新型智慧教学工具,将手机变成了学习工具,实现了课前、课上、课后的师生的相互沟通和交流。笔者主要介绍雨课堂在动物医学专业"兽医寄生虫病学"课程的应用过程,探讨了雨课堂对教学改革的推动作用,为高校开展基于雨课堂的混合式教学提供参考。     

分子佐剂Ov-ASP-1对弓形虫SAG1核酸疫苗的影响

为了研究分子佐剂Ov-ASP-1对弓形虫表面抗原糖蛋白1(SAG1)核酸疫苗的免疫效力的影响,用含有分子佐剂Ov-ASP-1的pVAX1-Ov-ASP-1-SAG1质粒、对照质粒pVAX1-SAG1、空载体pVAX1免疫鸡,并设置PBS对照组,通过抗体水平与细胞因子水平的检测结果判断免疫效果和免疫应答情况;然后用弓形虫RH株人工感染试验鸡,通过实时荧光定量PCR检测鸡的肺脏、脾脏、肝脏中的弓形虫数量,判断分子佐剂Ov-ASP-1是否增强鸡对弓形虫的抵抗力。结果表明:与其他组相比,试验各阶段pVAX1-Ov-ASP-1-SAG1组免疫球蛋白G(IgG)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-12(IL-12)和干扰素γ(IFN-γ)水平都较高,差异达到了显著或极显著水平(P0.05或P0.01);攻虫后pVAX1-Ov-ASP-1-SAG1组感染弓形虫的鸡荷虫量比其他组极显著降低(P0.01)。说明分子佐剂Ov-ASP-1可以显著增强弓形虫表面膜蛋白SAG1的免疫原性和免疫保护性。     

表达EDA-EmIMP1的重组枯草芽孢杆菌的制备及其免疫效果评价

枯草芽孢杆菌可以作为外源蛋白的表达系统,其作为重组蛋白的递呈载体具有很大优势,而纤维连接蛋白外域A(EDA)是一种能够提高目标蛋白抗原性的佐剂。为增强巨型艾美耳球虫的免疫相关蛋白1(IMP1)的抗原性,本研究从已构建的重组质粒中扩增EDA-EmIMP1和EmIMP1基因片段,并构建重组表达质粒pHT01-EDA-EmIMP1和pHT01-EmIMP1,将获得的重组质粒转化枯草芽孢杆菌感受态细胞,制备的重组枯草芽孢杆菌鉴定正确后增殖培养。将实验鸡分为5组,分别是:EDA组(免疫pHT01-EDA-EmIMP1重组枯草芽孢杆菌)、EmIMP1组(免疫pHT01-EmIMP1重组枯草芽孢杆菌)、枯草芽孢杆菌组、空白组(PBS)和攻虫对照组。每组鸡口服相应菌液(0.3mL1010cfu/mL菌液/只)进行免疫,每隔2周免疫1次,共免疫3次,每次免疫2周后采血。三免2周后攻虫。采用ELISA方法检测各组鸡血清中EmIMP1的抗体滴度以及细胞因子IL-10和IL-4的含量;并对攻虫后各组鸡的增重、肠道病变计分以及卵囊排出量进行计算。结果显示:制备的重组枯草芽孢杆菌可以表达目的蛋白,蛋白大小为70ku。ELISA检测结果显示,EDA组的抗体效价最高,约为1∶3200;三免EDA组的IL-10和IL-4的含量均显著高于其它组(p<0.05);EDA组的卵囊排出量显著低于其它组,而枯草芽孢杆菌组和EmIMP1组的卵囊排出量也均显著低于攻虫组(p<0.05);EDA组对肠道保护效果显著优于其它经过攻虫处理的组(p<0.05),而枯草芽孢杆菌组和EmIMP1组之间无显著差异;EDA组增重显著高于攻虫组和枯草芽孢杆菌组(p<0.05)。本研究证实枯草芽孢杆菌作为EmIMP1的抗原递呈载体可以有效提高免疫原性,其中EDA佐剂组的免疫效果最好。