浙江省猪弓形体病血清学调查

对浙江省14个县、市的猪弓形体病,采用ELISA进行血清学调查。共检测种猪1228头,阳性率为55.5％。其中,平原地区为63.5％,丘陵地区为51.6％,沿海岛屿为38.9％。有弓形体病流行史的猪场、一般屠宰猪、有弓形体病流行史的户养猪和无明显流行史地区户养猪的阳性率分别为84.5％、53.0％、65.0％和45.5％。     

弓形体抗原纯化的初步研究

弓形体速殖子粗抗原、纯化抗原 F_1和F_2相比较,F_1活性高于F_2;F_1、粗抗原用于 ELISA 检测弓形体感染兔血清的阳性率分别为100%和87.8%:用于检测其他寄生虫病患者及献血员等,差异均不显著(P>0.05).     

三种血清学方法检测弓形体抗体的比较

对IHA、IFA及ELISA三种方法检测弓形体抗体作了比较。感染兔血清首次检出抗体时间及阳性兔数:IHA为感染后第5天(1/15)、IFA为第6天(1/15)、ELISA为第4天(8/15);达全阳性时间分别为感染后第13、15及6天,GMT分别为4693、1301及8192。对照兔血清的假阳性率均为1.42％。三法检测猪血清的阳性率分别为42.0、41.0及44.0％。结果表明,三法均具有高度的敏感性和较高的特异性,其中以ELISA法最为灵敏,IHA法操作简便,两法均适用于现场血清学调查。     

应用生物素——亲和素系统检测弓形虫感染家兔的特异性循环免疫复合物实验研究

循环免疫复合物(CIC)的检测对某些疾病的诊断和临床监护提供了新的可能。CIC的检测方法虽很多,但大多属于抗原非特异性方法,对CIC的抗原可以识别鉴定的方法尚少。我们应用生物素—亲和素系统的ABC法以抗弓形虫单克隆抗体(McAb)检测人工感染弓形虫家兔血清的CIC(ABC-ELISA),同时与McAb ELISA(常规)及非特异性PEG沉淀试验为对照进行比较试验,探讨ABC-ELISA检测弓形虫特异性     

单克隆抗体应用于ELISA诊断猪弓形虫病的研究

本文应用抗弓形虫单克隆抗体ELISA对猪弓形虫病感染进行现场调查研究。用一般ELISA的间接法、双单抗夹心法、单抗及第二抗体夹心法分别检测Ab、Cag及CIC。杭州地区一般屠宰猪血清阳性检出率分别为52.79%、0%及8.22%;有弓形虫病流行史的某种猪场母猪血清的阳性检出率分别达84.51%、32.65%及68.39%,三者均明显高于屠宰猪。14头疑似弓形虫病猪血清的阳性检出率分别为6/14、10/14及12/14,Cag或和CIC阳性率合计为14/14。初步认为应用ELISA间接法检测Ab可作为猪弓形虫感染血清流行病学检查;应用McAb ELISA夹心法检测CAg及CIC具有早期诊断猪弓形虫病的价值,并可作为历史流行点猪弓形虫病是否存在近期流行或尚有活动性感染及暴发性流行的监测方法。     

应用单克隆抗体-ELISA检测弓形体循环抗原及免疫复合物的有关因素

本文对 McAb-ELISA 检测弓形体 CAg 及 CIC 的有关因素进行了研究.结果表明:(1)用 McAb 包被液致敏反应板的效果,碳酸盐缓冲液(pH9.6)优于磷酸盐缓冲液(pH7.4).(2)纯化的 McAb 及 McAb-HRP 冷藏贮存,一年内对 FLISA 的检测效果无影响.但 McAb 致敏的反应板只能冷藏一个月.(3)McAb 致敏反应板时,置37℃温育2小时的检测效果似较冰箱过夜为优.(4)普通血清、灭活血清及滤纸血的 ELISA 结果,均无明显差别.(5)检测 CAg 的血清及酶结合的孵育方法可采用 ELISA一步法,而检测 CIC 则必须采用常规二步法.