应用生物素-亲和素系统检测感染兔弓形虫抗体的实验研究

鉴于弓形虫病感染的多样化,病原诊断又较困难,血清学检测逐渐成为常规辅助诊断方法之一.七十年代末国内外相继建立了检测血清中抗弓形虫抗体的酶联免疫吸附试验(ELISA).近年来,生物素-亲和素系统(BAS)已用于多种抗原抗体系统但未见检测弓形虫抗体的报道.本文应用亲和素和生物素标记的过氧化物酶复合物(ABC)为标记物的ABC-ELISA方法检测感染兔弓形虫抗体的实验研究并与常规ELISA法进行对比观察,现将初步试验结果报告如后.     

猪弓形虫病爆发性流行的确诊方法探讨及ZA株弓形虫的初步鉴定

1987年4月,浙江省某种猪场猪发生具有“烂耳”病征的急性疫病。我们采集病猪的血进行血清学检查,结合病变脏器组织接种小白鼠分离到弓形虫,探讨确诊猪弓形虫病暴发性流行的检测方法,并对分离所得的弓形虫株进行初步鉴定。现将结果报告如后。     

浙江省猪弓形体病血清学调查

对浙江省14个县、市的猪弓形体病,采用ELISA进行血清学调查。共检测种猪1228头,阳性率为55.5％。其中,平原地区为63.5％,丘陵地区为51.6％,沿海岛屿为38.9％。有弓形体病流行史的猪场、一般屠宰猪、有弓形体病流行史的户养猪和无明显流行史地区户养猪的阳性率分别为84.5％、53.0％、65.0％和45.5％。     

酶联免疫吸附试验检测弓形虫抗体的有关因素及诊断价值研究

近年来,酶联免疫吸附试验(ELISA)广泛地应用于各种疾病的血清学诊断研究,并在技术上进行不断改进和完善。本文对ELISA检测弓形虫抗体的有关因素及诊断价值进行了探讨,现将结果报告如下。材料和方法1.弓形虫(CN株)速殖子可溶性抗原:系上海市农业科学院畜牧兽医研究所提供。2.羊抗兔IgG酶标记物(简称酶结合物):采用快速过碘酸钠标记法制备。     

弓形体抗原纯化的初步研究

弓形体速殖子粗抗原、纯化抗原 F_1和F_2相比较,F_1活性高于F_2;F_1、粗抗原用于 ELISA 检测弓形体感染兔血清的阳性率分别为100%和87.8%:用于检测其他寄生虫病患者及献血员等,差异均不显著(P>0.05).     

弓形体抗原的纯化与分析

对几种提纯弓形体抗原的方法进行了比较。结果,分别经５０００ｒ、１００００ｒ、１５０００ｒ／ｍｉｎ离心３０分钟的粗抗原,用于检测弓形体抗体的Ｐ／Ｎ值依次为５．０５、５．６０、６．４３。用１００００ｒ／ｍｉｎ３０分钟处理的粗抗原（Ｒ１００００）,经凝胶柱层析分离洗脱,呈现２个蛋白峰（Ｆ１、Ｆ２）,经免疫学测定,其主要的抗原活性部分存在于Ｆ１中。Ｒ１００００抗原用５０％硫酸铵沉淀（Ｓ５０）的蛋白质得率达６４％;用７０％硫酸铵沉淀（Ｓ７０）的蛋白质率为３５％。Ｒ１００００与Ｆ１、Ｆ２、Ｓ５０、Ｓ７０５个抗原,经ＥＬＩＢ后用高免兔血清识别的条带数：Ｆ１和Ｆ２各１条、Ｓ５０Ｚ条、Ｓ７０和Ｒ１００００各３条。除Ｆ２之外,３９～４０ＫＤ为４种抗原的共同反应区带。用上述５种抗原致敏反应检测弓形体抗体,以Ｓ５０具有更高的敏感性和特异性。     

一种简易,快速检测弓形虫循环抗原的酶联免疫吸附试验

应用双抗体酶联免疫吸附试验(ELISA)夹心法,检测人工感染弓形虫兔血清循环抗原(CAg)的结果:潜伏期内的阳性检出率为10％;急性期和亚急性期的阳性率为40％～100％;慢性早期为20％。检出弓形虫抗原量为0.63μg/ml。本法与血吸虫、肺吸虫、丝虫、钩虫、蛔虫及旋毛虫抗原试验,均呈阴性。上述结果表明,本法具有特异、敏感、简易、快速等特点,可作为急性弓形虫病的快速诊断方法。