猪细小病毒体外培养适应毒株的培育及动物感染试验

从初产母猪流产胎儿的肠系膜淋巴结中分离到一株猪细小病毒(PPV),采用无污染的猪睾丸传代细胞系(ST)对该毒株传代,培育成一株细胞适应毒株,命名为PPV-HJ毒株。该毒株经ST细胞连续传50代,于第25代起毒价显著提升,第40代毒价维持稳定(107.2 TCID50/mL)。用免疫过氧化物酶单层细胞染色试验(IPMA)检测表明,病毒感染的阳性细胞染成棕红色,病毒抗原主要分布在细胞核中。免疫电镜观察到PPV粒子呈球状,直径约21nm。基因克隆测序证实,该毒株的NS1基因序列与GenBank中PPV-ZJ毒株同源性最高,达98.41%。用该毒株第50代培养物(1×107.2 TCID50/mL)接种35日龄仔猪,未表现出明显的临床症状,剖检未观察到明显的病理学变化,PCR法在猪的肺脏、扁桃体、腹股沟淋巴结、下颌淋巴结、小肠中检测到病毒核酸,表明该毒株对易感动物具有一定的感染性。本研究成功地培育出一株PPV体外细胞培养适应毒株,其繁殖性能稳定,为今后开展PPV与猪圆环病毒2型(PCV-2)混合感染的协同致病性研究,以及联合疫苗的研制奠定了基础。     

猪圆环病毒2型Rep’蛋白单克隆抗体制备及其抗原表位鉴定

为制备猪圆环病毒2型Rep’蛋白单克隆抗体(MAb),本研究采用淋巴细胞瘤杂交技术制备其MAb,获得了1株能够稳定分泌抗PCV2-Rep’蛋白的杂交瘤细胞株,命名为3D1株。MAb亚类鉴定为IgG1/κ型,腹水效价达1∶819 200。Western blot分析表明,该MAb可与重组杆状病毒表达的PCV2-rRep’和PCV2-rRep蛋白发生特异性反应,具有良好的特异性和反应原性。采用MAb对PCV2感染细胞中Rep’蛋白抗原性进行了鉴定,证明该MAb能够与病毒Rep’蛋白产生特异性反应。采用合成肽扫描法对MAb对应的抗原表位鉴定,其核心序列为61FANFVKKQTFNKV73,位于PCV2-Rep’蛋白的N末端。制备的MAb及其抗原表位鉴定,为该病毒分子生物学及诊断技术的研究奠定了基础。     

猪圆环病毒2型Cap蛋白与猪O型口蹄疫病毒VP1蛋白在杆状病毒中共表达及鉴定

为在真核细胞中共表达猪圆环病毒2型(PCV2)Cap蛋白与猪O型口蹄疫病毒(FMDV)VP1蛋白,本研究将其各自编码基因克隆于杆状病毒双表达载体(pFastBacTMDual)中构建重组转移质粒(pFBD-Cap-VP1),转化至DH10BacTM感受态细胞中制备重组杆粒(rBacmid-Cap-VP1),并转染Sf21昆虫细胞,拯救出能够共表达PCV2-Cap和FMDV-VP1蛋白的重组杆状病毒(rBac-Cap-VP1)。SDS-PAGE和western blot检测结果表明,共表达的重组PCV2-Cap和FMDV-VP1蛋白产物的分子量分别为28 ku和30 ku,各占总蛋白含量的11.6%和3.4%,能够分别与PCV2和FMDV抗体发生特异性反应,表明共表达蛋白具有良好的反应原性。本研究为PCV2和FMDV基因工程二联亚单位疫苗的研制奠定了基础。     

容县“春兰行动”启动

3月24日,容县人民政府在侨乡广场举行广西容县2006“春兰行动”启动仪式。容县兰花资源丰富,种植历史悠久,近年来兰花产业发展方兴未艾,爱兰、养兰在容县蔚然成风。目前,全县种兰养兰人数达3000多人,兰花种植面积近1000亩,具有一定规模的兰花基地5个,兰花产业已成为容县继沙田柚后的又一品牌,一些下岗工人、农村困难户通过种植兰花走上了脱贫致富的道路。鉴于容县兰花资源优势及兰花产业发展的广阔市场前景,容县县委、县政府决定组织开展“春兰行动”,通过对城镇下岗工人、农村有一定劳动能力的困难户(包括五保户)提供兰花种苗,进行栽培技术…     

防治仔猪黄白痢的几种新药和新剂型

仔猪黄白痢是由毒素源性大肠杆菌而致的严重腹泻病。以仔猪腹泻二价基因工程苗或三价基因工程苗于母猪临产前注射，可起到一定的预防作用，但往往免疫效果不确实。有学者认为苗药结合是防治仔猪大肠杆菌病的最佳措施1。但在应用药物防治过程中，临床上经常使用的药物由于长期应用往往疗效不佳，而一些传统剂型或服药剂量不确实，或引起仔猪应激，导致本已降低的仔猪免疫力更为低下，有其缺陷。针对上述情况，本文对几种新药物、新剂型的应用效果加以介绍，供临床工作者及药物研究人员参考。1　新药物1．1　安普霉素安普霉素（Apramycin…