| 猪细小病毒体外培养适应毒株的培育及动物感染试验 |
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| 引用本文： | 李胜斌,危艳武,唐青海,吴洪丽,刘建波,郭龙军,王一平,刘丹,刘长明.猪细小病毒体外培养适应毒株的培育及动物感染试验[J].动物医学进展,2012(11):1-7. |
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| 作者姓名： | 李胜斌 危艳武 唐青海 吴洪丽 刘建波 郭龙军 王一平 刘丹 刘长明 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(31101837);公益性行业(农业)专项(201203039);“863”家畜病毒病基因工程疫苗创制项目(2011AA10A208) |
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| 摘 要： | 从初产母猪流产胎儿的肠系膜淋巴结中分离到一株猪细小病毒(PPV),采用无污染的猪睾丸传代细胞系(ST)对该毒株传代,培育成一株细胞适应毒株,命名为PPV-HJ毒株。该毒株经ST细胞连续传50代,于第25代起毒价显著提升,第40代毒价维持稳定(107.2 TCID50/mL)。用免疫过氧化物酶单层细胞染色试验(IPMA)检测表明,病毒感染的阳性细胞染成棕红色,病毒抗原主要分布在细胞核中。免疫电镜观察到PPV粒子呈球状,直径约21nm。基因克隆测序证实,该毒株的NS1基因序列与GenBank中PPV-ZJ毒株同源性最高,达98.41%。用该毒株第50代培养物(1×107.2 TCID50/mL)接种35日龄仔猪,未表现出明显的临床症状,剖检未观察到明显的病理学变化,PCR法在猪的肺脏、扁桃体、腹股沟淋巴结、下颌淋巴结、小肠中检测到病毒核酸,表明该毒株对易感动物具有一定的感染性。本研究成功地培育出一株PPV体外细胞培养适应毒株,其繁殖性能稳定,为今后开展PPV与猪圆环病毒2型(PCV-2)混合感染的协同致病性研究,以及联合疫苗的研制奠定了基础。
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| 关 键 词： | 猪细小病毒 分离鉴定 毒株培育 |
Cultivation and Pig Infection Test of Porcine Parvovirus Culture-adapted HJ Strain |
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| LI Sheng-bin,WEI Yan-wu,TANG Qing-hai,WU Hong-li,LIU Jian-bo,GUO Long-jun, WANG Yi-ping,LIU Dan,LIU Chang-ming.Cultivation and Pig Infection Test of Porcine Parvovirus Culture-adapted HJ Strain[J].Progress In Veterinary Medicine,2012(11):1-7. |
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| Authors: | LI Sheng-bin WEI Yan-wu TANG Qing-hai WU Hong-li LIU Jian-bo GUO Long-jun WANG Yi-ping LIU Dan LIU Chang-ming |
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| Institution: | (Division of Swine Infectious Diseases,State Key Laboratory of Veterinary Biotechnology,Harbin Veterinary Research Institute,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Harbin,Heilongjiang,150001,China) |
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