拟南芥质膜水通道蛋白RD28保守区段在大肠杆菌中的表达及其抗体的制备

实验利用ＰＣＲ技术,从拟南芥原膜水旧白ＲＤ２８的ｃＤＮＡ中扩增了所有植物细胞质膜水通道蛋白保守区段（４２０ｂｐ）,并将其构入ｐＧＥＸ－ＫＧ。酶切、测序分析表明重组质粒ｐＧＥＸ－ＲＤ２８结构正确。０．１ｍｍｏｌ／Ｌ的ＩＰＴＧ可诱导表达分子量约４０ｋＤ融合蛋白ＧＳＴ－ＲＤ２８,该蛋白主要以非包涵体的形式存在。诱导表达后的菌体超声裂解液经谷胱甘肽活化的Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ４Ｂ亲和层析柱纯化得到了高纯度Ｇ     

正义和反义Calpastatin cDNA真核表达载体的构建

本研究利用真核表达载体ｐＲＣ／ＲＳＶ，将位于ｐＢＳ－ＳＫ质粒中的ＣａｌｐａｓｔａｔｉｎｃＤＮＡ以正反两个方向构入载体；经酶切分析，构建的质粒结构正确。所构建质粒ｐＲＣ／ＲＳＶ正义、反义ＣａｌｐａｓｔａｔｉｎｃＤＮＡ两个表达载体，为进一步转化肌细胞，人为控制Ｃａｌｐａｓｔａｔｉｎ基因的表达，从而控制Ｃａｌｐａｉｎ活性，深入研究钙蛋白酶在肌肉发育及肉嫩化中的作用打下基础。