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探讨在体外条件下负载灭活口蹄疫病毒(iFMDV)树突状细胞对CD8+T细胞的活化效应。用重组粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)和白介素-4(rmIL-4)将小鼠外周血单核细胞诱导分化成树突状细胞(MoDCs),用信号阻断法从淋巴结T细胞制备CD8+T细胞,利用负载iFMDV的MoDCs与CD8+T细胞共培养,以iFMDV+MoDCs作为对照,用ELISA检测不同时间培养上清液中IFN-γ的含量。用蛋白酶体抑制剂处理MoDCs,2h后再负载iFMDV,并与CD8+T细胞共培养,对照组则用iFMDV+MoDCs+CD8+T细胞,用ELISA检测不同时间培养上清液中IFN-γ的含量。结果表明,同对照组相比,在共培养后9,12,24,36,48h,CD8+T细胞组均产生高水平的IFN-γ。而且,经抑制剂预处理的MoDCs与CD8+T细胞共培养后,其分泌的IFN-γ量不仅没有降低,反而显著升高。因此得出,MoDCs可与蛋白酶体等加工iFMDV抗原,并通过交叉提呈途径激活CD8+T细胞。 相似文献
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为研究负载口蹄疫病毒VP4蛋白的树突状细胞对淋巴结T细胞的活化效应,构建了pET32a-VP4原核表达载体,经过诱导表达和纯化获得重组VP4蛋白.同时制备骨髓源树突状细胞(BMDCs)和淋巴结T细胞,以VP4蛋白负载BMDCs后与淋巴结T细胞共培养.收集不同时间点的共培养上清液,用ELISA法检测其IFN-γ的含量.结果显示,负载VP4蛋白的BMDCs与T细胞共培养后3、9和48 h,试验组上清液中IFN-γ含量与对照组相比,均有极显著差异.这表明负载口蹄疫病毒VP4蛋白的BMDCs可有效激活淋巴结T细胞,使其分泌大量IFN-γ. 相似文献
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为研究负载口蹄疫病毒VPl-VP4融合蛋白质的树突状细胞对淋巴结T细胞的活化效应,通过构建pET32a-VPl-VP4原核表达系统制备VPl-VP4融合蛋白。将纯化VPl-VP4融合蛋白负载骨髓源树突状细胞(BMDC)后与淋巴结T细胞共培养,用ELISA检测不同时间点的共培养上清液中IFN-γ的含量。结果表明,负载FMDVVPl-VP4融合蛋白后的BMDC可通过溶酶体-MHC-Ⅱ类分子途径有效地激活淋巴结T细胞,从而启动Thl细胞免疫应答,分泌大量IFN-γ。 相似文献
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为了降低在薄层色谱分析中苯对人体的危害及对环境的污染,研制可替代黄柏薄层色谱鉴别展开系统中的苯试剂,本研究对常用中兽药三黄散、公英青蓝合剂、公英青蓝颗粒进行了展开剂的开展了系列优化试验。结果表明,以正己烷-三氯甲烷-丁酮-乙酸乙酯-甲酸-水(3∶9∶6∶3∶4∶0.5)为展开剂,能够对以上三种药物达到较好的分离效果,薄层色谱图中主斑点盐酸小檗碱与其上下斑点分离度好,外形清晰圆整,为进一步完善三种药物的质量标准提供了试验依据。 相似文献
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