三角梅4,5-多巴双加氧酶基因的克隆与表达分析

本研究通过同源克隆技术对三角梅(Bougainvillea glabra Choisy)甜菜色素合成途径中4,5-多巴双加氧酶(4,5-DOPA dioxygenase,DOD)基因进行了克隆分析。随后将获得的三角梅DOD基因克隆到表达载体pET30b(+)上,构建原核表达载体pET30b(+)-DOD,并转入大肠杆菌Rosetta(DE3)进行诱导表达。同时结合实时荧光定量PCR技术分析了遮光处理对三角梅DOD表达量和甜菜红素含量的影响。结果表明,三角梅DOD基因的cDNA序列长度为804 bp,编码268个氨基酸,GenBank登录号为KY676801。系统进化树分析显示该DOD与叶子花(Bougainvillea spectabilis Willd.)和紫茉莉(Mirabilis jalapa L.)DOD亲缘关系比较近;原核表达得到约37 k D的目的蛋白,这与预测结果相符合;实时荧光定量PCR结果表明,遮光处理使DOD表达量降低;同时,甜菜红素含量也表现为下降。这些研究结果为解析三角梅甜菜色素合成途径提供了理论依据,为三角梅花色形成机制的研究提供了基础资料。     

提高内切葡聚糖酶活力及其在毕赤酵母中的表达研究

以中性内切葡聚糖酶基因EG和真菌Corticium rolfsii的碳水化合物结合模块(FCBM)为模块,构建融合基因重构体EG-FCBM和CD-FCBM,并利用高效表达载体在毕赤酵母中对其进行高效表达。酶活及性质分析显示,EG-FCBM和CD-FCBM在诱导表达84~96h后,其对微晶纤维素的活力分别为951和676 U·mL-1,较原始基因EG(526U·mL-1)提高81%、28%,而酶学性质两者间无较大差异。这一结果表明,FCBM在催化水解纤维素的过程中有着极为重要的作用,通过增加FCBM来提高纤维素酶活性方法可行。     

金龙胆草查尔酮合酶基因(CHS)的克隆及其在花期不同组织的表达量分析

查尔酮合酶(chalcone synthase,CHS)是植物类黄酮化合物合成的第一关键酶。为了获得金龙胆草(Conyza blinii Lévl.)CHS基因,本研究采用快速扩增cDNA末端(rapid-amplification of cDNA ends,RACE)技术克隆得到了金龙胆草CHS基因的DNA和cDNA全长序列,并进行生物信息学分析,通过RTPCR检测该基因在花期不同组织部位中的表达情况并检测对应部位的相对花青素含量。结果表明,获得的CHS基因DNA全长2 098 bp,包括2个内含子;cDNA全长为1 692 bp,含有完整开放阅读框(1 197 bp),编码399个氨基酸,包含查尔酮合酶的标志性序列,命名为CbCHS(GenBank登录号:KJ155749)。序列比对结果显示,金龙胆草CbCHS基因与已报道的其它植物的CHS氨基酸序列具有很高相似性(最高为95%)。半定量RT-PCR结果显示,在叶和茎的表达量最高,相对表达量分别达到87.03%和98.33%,表达量之间没有显著差异(P0.05);在根中CbCHS基因表达量最少,相对表达量仅为9.43%,表达量与其余部位具有显著差异(P0.05)。花青素含量也以茎和叶中最高,根中微量,表明CbCHS基因与花青素的蓄积有一定相关性。本研究首次克隆了金龙胆草CbCHS基因的全长DNA及cDNA序列,研究了其在花期不同组织器官中的表达量差异及与花青素的含量关系,为进一步研究CbCHS基因对金龙胆草黄酮含量的影响及其调控机制提供了基础资料。     

金龙胆草SRAP 银染反应体系的建立与优化

建立适宜金龙胆草DNA 的SRAP-PCR 扩增体系为金龙胆草分子标记打下基础,针对常规银染方法从 是否固定银染液组成银染时间显影液组成等方面优化了金龙胆草SRAP 扩增产物的检测方法同时探索了金龙 胆草SRAP-PCR 反应程序,并对金龙胆草SRAP-PCR 反应体系的各影响因子进行优化结果建立了一个银染步骤 快速高效的银染检查方法筛选的退火温度为51.3,最佳SRAP-PCR 反应体系(15 L) 为院DNA 40 ng,引物浓度 0.7 mol/L,dNTPs 0.25 mmol/L,Mg2+1.9 mmol/L,Taq 聚合酶0.6 U,10buffer 2 L,双蒸水补足该程序和体系能很好 地满足金龙胆草基因组SRAP 扩增的要求SRAP 标记应用于金龙胆草遗传研究是可行的。     

苍溪兔产业的低碳发展之路

苍溪县位于四川盆地北部山区，地处东经105°43’～106°28’，北纬31°37’～32°10‘，海拔357．1～1377．5m，年平均气温16．7℃，平均无霜期289d，年均降雨量1046．7mm，日照时数1506．5h。幅员面积2330km^2，辖39个乡镇，778个村，总人口78万，其中农业人口66万，属典型的山区农业县。境内气候温和，水草丰茂，四季分明，适宜畜禽的生长发育。     

谷子、水稻与其野生种基因组转座子比较

为探究转座子(Transposable elements, TEs)在谷子、水稻驯化过程中的变异,选取谷子(Setaria italica)、狗尾草(Setaria viridis)、栽培稻(Oryza sativa japonica,Oryza sativa indica)、野生稻(Oryza rufipogon,Oryza nivara)的基因组进行转座子注释,统计分析各类转座子在基因组中的插入数及位置,对调控落粒、分蘖、抽穗期和株高等驯化相关基因进行相似性比对。结果表明：在‘晋谷21’突变体(xiaomi)基因组中插入的转座子数目比狗尾草中多4 865个,‘豫谷1号’基因组中插入的转座子数目比狗尾草中少6 286个,而水稻栽培种基因组中转座子数目及所占比例仅为野生种的1/2。在落粒、米色等驯化相关基因中转座子插入在数目及位置上都存在差异,在谷子落粒基因中,谷子基因存在转座子插入,而狗尾草基因中不存在;在谷子米色相关基因中,狗尾草基因中存在转座子插入,谷子基因中不存在。转座子介导驯化相关基因功能变异,历经较长时间的农业生产将适合栽培的农艺性状稳定了下来。     

职业技术学院如何在农民工再就业中起作用

随着我国的经济不断发展,出现了许多具体的问题,其中很重要的一点就是城市中出现了许多有待再就业的人员,如何解决好他们的出路问题是一个关系到我国稳定和发展的问题,作为职业技术院校,作好农民工短期培训工作是我们义不容辞的责任,同时我们也可以在这个现状中找到适合自身发展的机遇。     

三白西瓜无害化栽培技术

三白西瓜因其白皮、白瓤、白籽故称三白西瓜。山东省枣庄市生产的三白西瓜个大、品质优、耐贮藏，种植历史悠久。三白西瓜还具有消炎、补铁、补钙、补钾等作用，对中暑、高血压、糖尿病、肝炎、肠炎、痢疾等具有独特疗效，并有防癌、抗癌和抗衰老功能，实为罕见的集营养、保健、药用于一体的地方名、优、稀、特农产品。三白西瓜属于晚熟品种，生长期长，植株生长势强，果实个大，采用露地直播方式栽培，9月下旬上市，市场前景广阔。现将其无害化栽培技术介绍如下。     

乳酸菌和糖蜜对构树叶青贮品质和细菌多样性的影响

为改善构树(Broussonetia papyrifera)叶青贮发酵品质,探究乳酸菌和糖蜜对构树叶青贮发酵指标和细菌多样性的影响,本实验以构树叶为原料,设置对照、添加乳酸菌(L)、糖蜜(M)和乳酸菌+糖蜜混合(ML)4个处理,贮藏30天后,测定其营养成分、发酵品质并及细菌群落结构。结果显示,除了添加乳酸菌组,其他添加剂处理pH值均显著降低(P<0.05),乳酸含量提高(P<0.05),乙酸(P<0.05)和丙酸含量下降。微生物分析表明与CK组相比,M和ML组均提高了细菌群落多样性,另外,添加剂处理改变了细菌群落结构,与CK相比,糖蜜处理组(M)乳杆菌属(Lactobacillus)相对丰度显著提升,魏斯氏菌属(Weissella)和肠杆菌属(Enterobacter)相对丰度降低。综上,构树叶青贮添加糖蜜可提高青贮饲料的发酵品质,并改变青贮细菌多样性。