牛布鲁菌侵染对HPT-8细胞p38基因转录水平的影响

探讨布鲁菌侵染人胚胎滋养层细胞(HPT-8)过程中对p38基因转录的影响。用牛布鲁菌2308和RB51株分别侵染HPT-8细胞,在不同侵染时间点(0、4、8、12、48h)收集细胞,提取总RNA,反转录获得cDNA;构建p38α、p38β和内参基因GAPDH的克隆质粒,并绘制3种基因扩增的标准曲线;RT-qPCR检测p38α和p38β基因的转录表达。结果显示,获得了HPT-8细胞侵染前后的cDNA,构建了pMD18-T-p38α/p38β/GAPDH克隆质粒,绘制了标准曲线。RT-qPCR结果显示,布鲁菌2308和RB51侵染滋养层细胞后(4、8、12、48h),p38α和p38β的相对表达量比0h均明显下降,差异极显著(P0.01),布鲁菌RB51株和2308株也存在一定差异。结果表明,在布鲁菌侵染HPT-8细胞的过程中,p38 MAPK信号通路被下调,提示p38 MAPK信号通路参与了对细胞生物学效应的调控,且这种调控作用与菌株的毒力强弱存在密切联系。     

浅谈提高无性系油茶造林成活率的方法

<正>无性系油茶造林成活率一般不高,笔者针对油茶成活率现状进行调查分析,结合生产实际,提出了解决的办法。1林地选择与准备油茶对土壤适应性强,但也不能盲目选择。目前油茶造林地多为杉、松主伐后迹地,这些林地土壤板     

保护森林资源 加强国土生态环境建设

林业既是一项十分重要的公益事业,又是一项十分重要的基础产业,既有不可替代的生态效益,又有十分显著的经济效益和社会效益。改革开放以来,我国林业建设取得了举世瞩目的成就,实现了森林面积和蓄积的双增长,森林覆盖率有了很大的提高。     

关于加强五原县农产品质量安全工作的思考

当前,人们对食品质量安全异常重视,无污染、安全、有营养的农产品备受消费者青睐。目前,超市中优质果品比一般果品价格成倍高出,极具市场竞争力。因此,加强农产品质量安全是适应绿色消费需求,增强我县农产品市场竞争力的迫切     

城市草坪绿化向自然绿化转变探究——以广东省河源市为例

在城市发展过程中,草坪绿化的过度与不合理使用,致使城市生态绿地的基本功能不能正常发挥,甚至导致污染土地资源、浪费水资源等负面效应。因此城市绿化应遵循自然规律,推行自然绿化。城市绿地必须进行科学、合理的规划设计;逐步淘汰单一的草坪绿化,应以各种本地乡土物种为主构建乔木、灌木、草地多层次相结合的复合绿化体系;建立和完善城市绿化植物管理体制,端正相应的政策指导,增强相关部门和广大群众对城市生态绿化的正确意识。     

布鲁氏菌Ⅳ型分泌系统效应分子BPE123和BPE275基因的原核表达与鉴定

【目的】克隆布鲁氏菌Ⅳ型分泌系统效应分子BPE123和BPE275的基因并进行诱导表达。【方法】从牛种布鲁氏菌2308株基因组中PCR扩增BPE123和BPE275基因片段,亚克隆到pGEM-T Easy载体中并测序。将BPE123和BPE275基因克隆至融合表达载体pET-28a,构建表达重组质粒pET-28a-BPE123和pET-28aBPE275,在大肠杆菌中进行诱导表达,Western blot分析重组蛋白His-BPE123和His-BPE275的免疫学特性。【结果】PCR扩增获得了462bp的BPE123基因片段和762bp的BPE275基因片段,成功构建了pET-28a-BPE123、pET-28a-BPE275原核表达载体,并在大肠杆菌中成功表达了BPE123和BPE275蛋白,经SDS-PAGE检测,重组融合蛋白BPE123、BPE275的分子质量分别约为22和31ku,布鲁氏菌免疫动物血清能特异性识别表达的蛋白。【结论】克隆了分泌蛋白BPE123、BPE275基因片段,并成功表达了布鲁氏菌Ⅳ型分泌系统效应分子BPE123和BPE275。     

澳大利亚奶业发展模式与经验借鉴

通过对澳大利亚奶业的考察,总结出澳大利亚奶业主要有以家庭牧场为主、监管体系健全、出口竞争力强等特点,提出我国奶牛养殖要种养结合、要支持奶农发展乳制品加工、强化乳制品质量安全监管和健全奶业社会化服务体系的建议。     

牛胎儿弧菌的分离报告

牛胎儿弧菌是引起牛流产或不孕的一种传染性疾病的病原体。我们在大面积上作布氏杆菌病检菌查源时,从送检的10头流产犊分离培养出7株牛胎儿弧菌,从一头流产母牛的子宫粘液分得1株牛胎儿弧菌。对送检     

布鲁氏菌M5-90疫苗株磷酸葡萄糖变位酶基因(pgm)突变株的构建及免疫评价

为获得可以区分自然感染和疫苗免疫且毒力较弱的布鲁氏菌候选疫苗株,本实验研究了磷酸葡萄糖变位酶基因(pgm)对布鲁氏菌(Brucella melitensis)M5-90疫苗株毒力的影响,并对其进行了免疫评价。本实验构建了重组质粒pGEM-7zf-Δpgm,电转化布鲁氏菌M5-90感受态细胞,筛选获得布鲁氏菌疫苗株M5-90的pgm基因缺失株(Δpgm),并对获得的M5-90 Δpgm株进行遗传稳定性、免疫原性检测。结果显示,Δpgm能稳定传15代;Δpgm组的抗体含量较亲本株M5-90组差异不显著;Δpgm在诱导机体产生IL-2的能力要强于M5-90,产生INF-γ的能力低于M5-90;该基因缺失株采用虎红平板凝集试验和试管凝集试验不发生凝集反应;Western blot证实,Δpgm不能诱导小鼠产生抗pgm蛋白的抗体。本研究构建的Δpgm具有很好的遗传稳定性和免疫原性,为研制布鲁氏菌基因缺失疫苗提供了实验依据。     

添加风化煤对蘑菇渣牛粪堆肥的影响

为研究风化煤的添加对菇渣牛粪堆肥的影响,找出合适的添加比例,添加质量分数分别为0、10%和20%的风化煤进行牛粪菇渣堆肥试验,对堆肥过程中温度、水分、pH、C/N等测定分析。结果显示,加入10%风化煤处理,堆体温度62h内即达到50℃以上,比不添加风化煤处理提前6d。堆肥结束时,3个处理有机碳含量下降43.78%、39.44%和40.27%;C/N下降38.56%、40.53%和41.31%。全氮含量分别减少29.55%、11.11%和11.27%;全钾含量增加19.8%、39.8%和33.7%;全磷含量变化不大。由于风化煤的加入,pH略有降低,而NH4+-N和NO3--N的含量变化不大。可见添加10%的风化煤可加快堆肥腐熟,降低氮素损失,增加钾的累积。