PCR技术在禽病诊断中应用的研究进展

聚合酶链式反应(PolymeraseChainReaction,PCR),又称体外基因扩增技术,是80年代中期由Mullis.发明的一种新的分子生物学技术,与传统的检测方法如生物化学、细菌学、病毒学和血清学方法等相比较,PCR方法具有特异性和敏感性高、操作简便、快速高效等特点,而且应用广泛。在病原方面,它既可作病原体的检测,也可同时进行不同病原或同一病原不同株的检测。特别适合难以培养的病毒和细菌的检测。经过近20年的发展,目前已开发出多种PCR技术,以适应不同试验需要,现综述PCR技术在禽病诊断中的应用。1PCR原理PCR是由三个基本反应组成的反复循…     

猪瘟抗体免疫金标试纸

目前,国内检测猪瘟抗体水平使用的方法有猪瘟抗体Dot—ELISA法,ELISA法和液体猪瘟正向间接血凝法,这些方法都具有微量、特异、准确的优点,但需要比较完备的实验仪器和经验丰富的技术人员操作和结果判定,检测一份样品至少需要3～4小     

一起红鳍东方鲀白口病的调查

2006年6N9月,在福建省宁德市某红鳍东方纯养殖场发生不同日龄的红鳍东方纯爆发白口病,该养殖场在宁德海域几十个网箱中养殖有日龄和体重不同的红鳍东方纯25万尾。2006年5月份以前,河豚发育生长都非常顺利,鱼的体重为0．2--0．4kg,按体重不同分养在几十个网箱中。2006年6月份,由于海水水温逐渐升高,在较小的鱼的网箱中发现有鱼相互追逐和撕咬的现象,     

MALDI-TOF-MS用于微生物鉴定的影响因素分析

影响MALDI-TOF-MS微生物鉴定的因素有很多。本研究主要从微生物培养基、培养状态、菌体前处理、上样量等方面进行MALDI-TOF-MS操作技术和方法的探讨。研究结果显示:进行MALDI-TOF-MS细菌鉴定,培养时间在4～24 h之间为佳;尽量选择无色、不含盐的液体培养基;0.1μL菌液是最低鉴定菌量;上样量对结果无影响;对于菌体前处理,除按照标准化前处理程序操作外,也可将菌体加dd H2O制成混悬液进行点靶鉴定,这样更加简便。本研究有助于减少MALDI-TOF-MS操作盲目性,提高鉴定质量,利于操作的规范化和简便化。     

斑点免疫金渗滤法检测猪生殖与呼吸综合征抗体的研究

应用提纯的猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗原包被硝酸纤维素膜，然后用胶体金标记的金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)建立了检测PRRS抗体水平的斑点免疫金渗滤法(DIGFA)。该法通过胶体金标记SPA直接显色，阳性者出现红色斑点，整个试验过程仅需5min即可判断结果；与猪瘟、猪伪狂犬病、猪细小病毒病阳性血清不发生交叉反应；纯化PRRSV抗原的最低检测量为0．0553mg／mL，即55．3ng／点。对200份猪血清用该法与ELISA同时进行PRRS抗体检测，两种方法的符合率达98％。     

猪伪狂犬病抗体免疫金标快速检测试纸法

应用免疫学原理与胶体金层析技术相结合，采用双抗原夹心法建立了检测猪伪狂犬病抗体水平的“猪伪狂犬病抗体免疫胶体金快速检测试纸法”，用该法与美国Idexx公司的猪伪狂犬病ELISA试剂盒，同时对16纷猪血液或血清进行抗体水平检测，符合率达100％。同时使用金标法对100份猪血液和对应血清进行检测，结果也相同。试验结果显示．金标法与ELISA一样，具有微量、特异、准确等优点，且操作简易，而金标法不需要任何仪器，检测时间短．结果直观，容易判定，适用于基层兽医站、养猪场使用和大面积猪伪狂犬病抗体普查。     

长城沿线生态环境为何脆弱

长城沿线生态越向西越脆弱长城历代位置变化较大,其中保存最完好的明长城沿线大约在北纬40度附近,位于暖温带与温带的过渡地带。在长城东段,由于降水较多,是森林地带,在暖温带是落叶阔叶林,而在温带则是针阔叶混交林带。从气候看,长城沿线东段是半湿润气候,降水量从700毫米～400毫米之间,属森林地带;中段是半干旱气候,降水量从400毫米降至200毫米,属草原地带;西段则是干旱气候,降水量在200毫米以下,属荒漠地带。总之,长城沿线自东向西,逐渐远离海洋,降水逐步减少,气候由半湿润变为半干旱、干旱,呈现自东向西气候逐步干旱的规律。长城是军事…     

金标试纸在猪场疫病防控上的应用

金标试纸具有微量、准确、快速、操作简便、结果直观、容易判定、成本低的优点,可作为疫苗质量的检测、抗体水平的普查、免疫程序的制定、疫病诊断和猪瘟净化的检测试剂。