ND胚胎免疫接种的免疫病理学研究——T细胞的免疫应答

本文利用酯酶染色和淋巴细胞转化试验对１８ 日无母源抗体鸡胚接种 Ｎ ＤⅡ系苗后进行了检测。结果发现在出壳当天，对照组与免疫组差异不显著，但免疫组随后即上升，到２１ 日龄时达到最大，两组间相差显著。     

湖南省部分地区实验兔寄生虫病调查

抽样检查了湖南省了3个县的337只实验兔的寄生虫病感染情况，结果发现31个被检查的样本中，兔螨检出率为81．87％（26／31），其中痒螨为19．35％（6／31），疥螨为29．03％（9／31），痒螨、疥螨混合感染者为35．48％（11／31）；兔球虫检出率为100％，血液原虫未查出。     

东方田鼠卵巢癌模型病理学观察

在已建立的东方田鼠封闭群中,收集了12例惠有自发性卵巢癌的病鼠,对其进行了病理观察和病理组织学分类,并通过透射电镜和扫描电镜,观察了它们的超微结构和细胞表面改变.结果发现东方田鼠自发性卵巢癌以腹水和恶病质为其主要临床表现,以类似于人类Ⅰ级和Ⅱ级浆液上皮性卵巢癌为其病理组织学特点.通过病理学比较,认为东方田鼠上皮性卵巢癌与人类上皮性卵巢癌极为相似,可作为一种极有价值的卵巢癌动物模型.     

小鼠诺如病毒数字RT-PCR定量检测方法的建立

为了建立快速、准确定量检测小鼠诺如病毒(murine norovirus, MNV)的方法,试验针对MNV高度保守区的靶向扩增引物和探针构建MNV的数字RT-PCR定量检测方法,优化其退火温度,并对其敏感性、特异性及临床应用效果进行检测。结果表明:建立的数字RT-PCR方法能对MNV进行定量检测;最佳退火温度为57.5℃;分别对MNV、小鼠肺炎病毒、呼肠孤病毒3型等核酸检测,除MNV外均为阴性;最低可检测到7拷贝/μL;对不同稀释度核酸进行3次重复试验,变异系数均小于7%;对20个小鼠盲肠样本进行MNV检测,结果与荧光RT-PCR结果一致。说明试验建立的数字RT-PCR方法特异性强、灵敏度高、重复性好,可应用于MNV的临床快速定量检测。     

日本血吸虫合成表位肽疫苗对小鼠的保护性免疫

为观察日本血吸虫合成表位多肽疫苗诱导的保护性免疫,将用日本血吸虫抗原免疫血清筛选噬菌体随机12肽库得到的、具有较好免疫保护性的4个模拟抗原表位短肽进行人工合成,用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测它们的抗原性.将合成多肽分别与钥孔戚血蓝蛋白(KLH)连接后免疫昆明小鼠,第3次免疫后收集血清,检测其针对各个多肽和可溶性成虫抗原(AWA)的IgG抗体滴度,以及补体介导的小鼠体外杀日本血吸虫童虫作用.结果显示,4个合成多肽均能被相应的抗体识别,具有良好的抗原性;能诱导产生特异性IgG抗体.这些抗体在补体参与下能在体外有效毒杀血吸虫童虫.与正常小鼠血清比较,4个合成多肽免疫血清的杀童虫率分别为31.7%,41.3%,21.1%和17.3%,均具有显著性;与KLH免疫血清相比时,杀童虫率分别为23.7%,34.4%,11.8%(P=0.077,无显著性)和7.5%(P=0.102,无显著性).这些结果表明,这4个合成表位多肽具有良好的抗原性和免疫原性,与KLH连接后能诱导明显的抗体反应和显著的细胞毒作用.     

湖南省部分地区实验免寄生虫病调查

抽样检查了湖南省3个县的337只实验兔的寄生虫病感染情况，结果发现31个被检查的样本中，兔螨检出率为81.87％(26／31)，其中痒螨为19.35％(6／31)，疥螨为29.03％(9／31)，痒螨、疥螨混合感染者为35.48％(11／31)；兔球虫检出率为100％，血液原虫未查出。     

兔出血症病毒套式PCR检测方法的建立

根据GenBank登录的兔出血症病毒的VP60基因序列，设计了2对引物，建立了检测兔出血症病毒的套式PCR检测方法．先用外引物扩增一段389bp的DNA片断，继而用内引物以扩增产物为模板进行第2次扩增（即套式PCR），以提高结果的准确性，避免一次性PCR的假阳性结果．用该方法对12份RHD样本进行检测，检出率为100％．     

东方田鼠基因组及相关变异数据的测定分析

东方田鼠由于对日本血吸虫有特殊的抗感染性,在对其进行系列研究后提示这种抗感染性以及其他生物学特征是与它的基因组相关。本研究采取第二代基因组测序技术对东方田鼠进行基因组测序,经生物信息学分析获得了基因组数据概貌和单核苷酸多态性、插入缺失突变、结构变异等变异数据,其结果为:检测到94 708 732个SNP、17 069 380个INDEL、348 146个SV,同时与参考基因组进行了比较分析,发现位于外显子区段的SNP有1 860 429个,其中异意突变有723 244个,同义突变有403 555个;位于UTR3区段的SNP有602 912个,INDEL 133 488个,基因间隔区的SNP有45 691 044个,INDEL 7 706 141个,以上的测序数据为进一步挖掘基因功能以及基因与表型之间的关联和基于基因组选择的东方田鼠各类品系培育打下基础,此外这些数据还有助于阐明东方田鼠实验动物化的基因组机理,为野生动物实验动物化奠定理论框架。     

鼠呼肠孤病毒3型荧光定量RT-PCR检测方法的建立

根据呼肠孤病毒3型(Reo3)M1基因序列保守区设计一对特异性引物,作者建立了一种快速、敏感、特异的实时荧光定量RT-PCR检测方法,并对该方法的特异性、敏感性和重复性进行了评价试验。试验结果显示,标准品浓度在1.0×10^2~1.0×10^10copy/μL之间时,其浓度的对数值与荧光定量R T-PCR实验中的Ct值之间有良好的线性相关性(相关系数R^2=0.9990),且该标准品检出限为1.0×10^2个copy/μL。特异性方面,该方法除对Reo3有扩增反应外,对其它相关病毒均无扩增反应,引物具有良好的特异性。同时,该方法实验间的变异系数为0.54%~1.04%之间,均小于2%,表明该方法扩增稳定性高、重复性强。以上研究结果表明,此研究检测方法建立的Reo3荧光R T-PCR检测方法特异、敏感、稳定,可用于实验动物中Reo3的监测以及流行病学研究。     

东方田鼠活动节律与菌落变化规律的研究

通过观察东方田鼠活动节律与空气中菌落数变化的关系以及空气中细菌种类的分布情况,旨在建立科学的东方田鼠生活环境标准。24h内每3h在不同测定点放置普通营养琼脂,暴露5m in后,37℃恒温培养48h,统计并分析结果;用血琼脂培养基检测空气中微生物并作出常规生化鉴定。结果表明:12∶00和21∶00时左右,东方田鼠饲养室内微生物数量最多;鼠笼Ⅰ日平均落下菌数为(13.95±1.41)个/皿,鼠笼Ⅱ为(18.38±1.36)个/皿,鼠笼Ⅲ为(16.67±1.26)个/皿,笼架为(14.19±1.46)个/皿。经常规生化鉴定,空气中微生物种类有嗜麦芽窄食单胞菌、表皮葡萄球菌、洛菲不动杆菌和金黄色葡萄球菌。东方田鼠经实验动物化后,其活动节律与环境条件和饲养条件密切相关,可采用人工措施调控空气中细菌数。