外源bcl—2基因和脂质体对鸡卵泡颗粒细胞体外分裂和凋亡的影响

选用正在产蛋的罗曼鸡，取其排序第3的卵泡分离层颗粒层细胞，用含血清培养基培养，并用含脂质体每孔0．0，0．6，1．2，2．4，4．8μL和bcl-2基因重组质粒每孔0．2μg转染卵泡颗粒细胞。用流式细胞术等方法分析转基因后的源代细胞和传代细胞的生长与凋亡情况。结果发现，与未转染组相比，转染后的传代细胞分裂速度较快（P＜0．01）、凋亡比率较低，G2／M＋S期细胞极显著高于对照（P＜0．01），且与脂质体浓度有剂量依赖关系。在转染时间为12h、DNA含量为每孔0．2μg的条件下，脂质体最佳转染浓度为每孔1.2μL。这些结果进一步证明，外源bcl-2基因或脂质体具有促进细胞分裂、抑制细胞凋亡、延长细胞寿命的作用。     

鸡卵泡颗粒细胞转染Bcl-2基因对IGF-1分泌的影响

选用正在产蛋的罗曼鸡，取体积排序第一（F1）和第四（F4）的卵泡，分离颗粒细胞层细胞。采用脂质体介导方法将来源于F1和F4卵泡的颗粒细胞用PBS（对照）、空载体或Bcl-2重组质粒处理，然后在不完全无血清培养基（不添加胰岛素）中培养48和96h，用流式细胞术检测Bcl-2蛋白表达，用放射免疫测定技术检测IGF-1的含量。结果发现，转染Bcl-2重组质粒组的Bcl-2蛋白表达量和IGF-1分泌量均多于其他各组。分析来源于不同卵泡期卵泡颗粒细胞的分泌功能，发现随时间的增加F1细胞IGF-1分泌量减少，而F4的IGF-1分泌量基本不变。结果表明，在鸡卵泡颗粒细胞中转染的Bcl-2基因具有表达功能，表达的蛋白具有调节鸡卵泡颗粒细胞分泌IGF-1的作用；鸡卵泡颗粒细胞IGF-1的分泌还受鸡卵泡的大小和颗粒细胞在体外培养时间的影响。     

鸡Bcl-2基因的克隆及其对卵泡颗粒细胞凋亡的影响

将鸡的 Bcl- 2基因克隆到真核表达载体 JL V中 ,构建了重组质粒 JL VB。 0 .2μg/孔 JL VB重组质粒经脂质体介导转染卵泡颗粒细胞 ,应用流式细胞术等方法分析了转染 Bcl- 2基因后原代细胞和传代细胞的生长与凋亡情况。与对照组相比 ,转染后的传代细胞分裂速度较快 (P<0 .0 1) ,凋亡比率较低 ,G2 / M S期细胞比例极显著高于对照组 (P<0 .0 1)。这些结果表明 ,Bcl- 2基因具有促进细胞分裂、抑制细胞凋亡、延长细胞寿命的作用 ,这种作用是直接的。在转染时间为 12 h、DNA量为 0 .3μg/孔的条件下 ,较好的脂质体介导用量为 1.2 μL/孔。     

鸡Bcl—2基因的克隆及其对卵泡闰细胞凋亡的影响

将鸡的Bcl-2基因克隆到真核表达载体JLV，构建了重组质粒JLVB。0．2μg／孔JLVB重组质粒经脂质体介导转染卵泡颗粒细胞，应用流式细胞术等方法分析了转染Bcl-2基因后原代细胞和传代细胞的生长与凋亡情况。与对照组相比，转染后的传代细胞分裂速度较快（P＜0．01），凋亡比率较低，G2／M＋S期细胞比例极显著高于对照组（P＜0．01）。这些结果表明，Bcl-2基因具有促进细胞分裂、抑制细胞凋亡、延长细胞寿命的作用，这种作用是直接的。在转染时间为12h、DNA量为0．3μg/孔的条件下，较好的脂质体介导用量的1．2μL／孔。     

提高波尔山羊繁殖效率的意义与方法

波尔山羊为季节性多次发情品种 ,产羔率较低 ,但肉用性能好 ,与国内多个品种杂种对生长速度和肉用性能有良好的杂种优势。为了提高肉羊生产经济效益 ,提高波尔羊繁殖效率具有重要意义。季节、光照和温度以及饲养管理等因素对波尔羊繁殖力有影响。加强选育和饲养管理 ,诱导青年羊发情排卵 ,缩短成年羊产羔间隔 ,提高窝产羔数 ,合理应用胚胎移植技术 ,提高公羊性欲和精液品质及保存效果等 ,均可提高波尔羊的繁殖力。     

波尔山羊在徐州的生长发育和杂交利用

徐州自 1 998年开始从南非引进波尔山羊以来 ,现存栏 34 9只。波尔山羊生长发育良好 ,1 8月龄体重公、母分别是 63.3kg和 4 1 .8kg。 1 999年累计用鲜精配种徐淮白山羊 1 4 .2 8万只 ,情期受胎率平均为73.4 % ;应用冷冻精配种徐淮白山羊 1 3.5 9万只 ,情期受胎率平均为 5 4 .7%。波尔山羊×徐淮白山羊杂交一代的初生重 ,公、母分别为 3.5和 3.3kg;断奶重公、母分别为 1 6.8kg和 1 5 .3kg。哺乳期公、母日增重分别是 1 4 7.1kg和 1 33.4kg。 8月龄公羔屠宰前活重为 30 .2kg,胴体重为 1 5 .2kg ,屠宰率为 4 9.1 %。     

白色念珠菌和鼠伤寒沙门氏菌的荧光标记及其对细胞粘附作用的影响

比较了几种荧光染料标记白色念殊菌和鼠伤寒沙门氏菌的效果及其对病菌生长和与Hela细胞粘附能力的影响，旨在为建立简便有效的荧光标记方法奠定基础。将2种致病菌分别在添加了罗丹明B、荧光素Na盐或吖啶橙的LB培养液，37℃条件下培养1d，结果发现这2种致病菌都可以被荧光素Na盐标记，鼠伤寒沙门氏菌还可以被罗丹明B标记，但这2种致病菌都不能在吖啶橙中生长。测定致病菌荧光强度发现，随罗丹明B标记剂量的增加，致病菌荧光强度增强，而荧光素Na盐小剂量组处理的致病菌荧光强度最强。此外还发现，致病菌与Hela细胞的粘附不受荧光标记的影响。     

鸡卵泡颗粒细胞转染Bcl-2基因对IGF-1分泌的影响

选用正在产蛋的罗曼鸡,取体积排序第一(F1)和第四(F4)的卵泡,分离颗粒细胞层细胞.采用脂质体介导方法将来源于F1和F4卵泡的颗粒细胞用PBS(对照)、空载体或Bcl-2重组质粒处理,然后在不完全无血清培养基(不添加胰岛素)中培养48和96 h,用流式细胞术检测Bcl-2蛋白表达,用放射免疫测定技术检测IGF-1的含量.结果发现,转染Bcl-2重组质粒组的Bcl-2蛋白表达量和IGF-1分泌量均多于其他各组.分析来源于不同卵泡期卵泡颗粒细胞的分泌功能,发现随时间的增加F1细胞IGF-1分泌量减少,而F4的IGF-1分泌量基本不变.结果表明,在鸡卵泡颗粒细胞中转染的Bcl-2基因具有表达功能,表达的蛋白具有调节鸡卵泡颗粒细胞分泌IGF-1的作用;鸡卵泡颗粒细胞IGF-1的分泌还受鸡卵泡的大小和颗粒细胞在体外培养时间的影响.     

性别基因调控与性别控制研究进展

该文阐述了性别基因调控原理以及采用流式细胞仪、免疫技术、控制输精时间等方法控制性别的最新研究进展。     

猪卵泡抑制素α模拟肽基因在大肠杆菌中的融合表达

克隆了猪抑制素 α1 - 3 2 基因 (简称抑制素基因 ,INH) ,与 p ET- 32 c载体的 Thioredoxin基因重组 ,表达的 INH-Thioredoxin融合蛋白相对分子质量约 140 0 0 ,在 E.coli DH5α中表达效率较高。在 IPTG浓度为 0 .34 0 m mol/L、诱导16 .8h条件下 ,有最大表达量 ,电泳扫描净灰度达 38.78%。