猪伪狂犬病病毒野毒株的分离鉴定及gC、gD基因序列分析

2019年河南某猪场暴发疑似猪伪狂犬病疫情,本试验采集发病猪的病料组织,进行伪狂犬病病毒(PRV)毒株的分离鉴定,并分析分离毒株的生物学特性。结果显示：分离毒株HNCY的TCID₅₀为10^-8.48/0.1 mL;一步生长曲线显示,分离毒株在12～24 h复制较快,48 h到达最高峰;分离毒株对小鼠具有较强的致死性,且肺脏中病毒含量最高;序列分析显示,HNCY株gC基因核苷酸序列与国内外PRV分离毒株的同源性为95.9%～100.0%,gD基因同源性为98.9%～100.0%;gC氨基酸序列与国内外PRV分离毒株的同源性为92.9%～100.0%,gD氨基酸同源性为97.5%～100.0%,且国内同源性高于国外;遗传进化分析显示,HNCY分离株gC、gD基因与欧美毒株在不同的大分支上,亲缘关系远;与国内分离株在同一分支上,且与2011年之前分离的PRV毒株在不同的小分支上,表明HNCY分离株属于国内变异毒株。     

猪伪狂犬重组抗原间接ELISA诊断方法的建立

本研究应用重组抗原,成功建立了检测猪伪狂犬病病毒血清抗体的间接ELISA诊断方法。通过方阵滴定确定了抗原最适包被量为1.45μg/孔,血清最适稀释度为1∶80,其作用时间为60 min,酶标抗体最适作用时间为60 min。其阳性临界值为OD≥0.123。此外,该抗原不与猪其他疾病的阳性血清反应,具有良好的特异性;批内重复试验,变异系数小于10%。该方法与进口诊断试剂盒的符合率为96.3%。本研究为现地免疫猪群抗体检测和进行PRV流行病学调查提供了一种简便的血清学诊断方法。     

猪伪狂犬病病毒闽A株gE基因的表达及其多肽的变性复性研究

gE为伪狂犬病病毒(pseudorabiesvirus,PRV)的非必需基因。由于gE缺失疫苗在病毒侵入神经系统方面被认为比其他单个非必需糖蛋白缺失苗更安全,同时gE不会影响病毒的复制和中和抗体的产生,并     

猪伪狂犬基因工程疫苗研究进展

伪狂犬病(PR)是由伪狂犬病病毒(PRV)引起多种家畜和野生动物的一种重要传染病.该病最早发现于美国,后来由匈牙利科学家首先分离出病毒.目前世界上有40多个国家都有本病报道,据不完全统计,我国已有20多个省、市流行过本病,给养猪业造成了严重的经济损失.     

猪日本乙型脑炎及猪细小病毒复合PCR检测方法的建立

根据GenBank上登录的日本乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)与猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)参考基因序列,设计合成2对特异性引物,在建立优化单项PCR检测方法的基础上,建立了PPV-JEV复合PCR检测方法,可扩增出预期的238 bp和152 bp特异性片段。该方法敏感性高、稳定性好、特异性强,临床样品检测结果与单项PCR检测结果符合率100%,该方法适合JEV和PPV的联合检测和鉴别诊断。     

动物养殖带来的环境污染问题之思考

近30年来,随着人民生活水平日益提高,国人的日常生活食品结构也发生了重大变化,对肉、蛋等畜产品的消费需求不断增加,加上先进的生产设备和科学的饲养技术在动物养殖上的应用,动物养殖业得到迅猛发展.现代化、规模化、技术化的大型养殖场大量建成,畜禽饲养量急剧上升,我国肉、蛋产量连续保持世界首位,2001年我国禽蛋产量达到2336.73万t,禽肉产量达到1273.18万t.在过去的十年中,世界蛋类增长1717.5万t,其中来自我国的有1448.7万t,占增长量的84.3%[1].但是动物养殖业,特别是养猪业、养禽业的规模化高速发展,动物养殖业从分散饲养到规模生产化的转变所带来的严重问题是养殖场排泄物导致的环境污染问题.据相关研究统计,一万只鸭饲养规模的养殖场每天产粪可达1 t,一个饲养周期养殖场就要产生粪便50 t[2].同时,农业生产中大量使用化肥,致使有机粪肥闲置,禽畜粪便不能及时还田,使得畜禽粪便对环境的污染与日俱增.     

食品微生物检验学试卷分析评价

分析和评价2005级动物防疫与检疫专业一份试卷的质量,采用统计学方法对学生考试成绩进行处理,分析试卷的出题质量。结果表明：学生的考试成绩呈正态分布,平均成绩为71.2分,平均难度0.68,信度0.65,总区分度0.374。这份试卷能较全面地评价学生对课程的掌握程度,试题难度适中,区分度好,考试成绩可信。     

猪细小病毒检测基因芯片的构建及初步应用

本研究以猪细小病毒VP2基因为目的基因设计引物和探针,通过不对称PCR扩增Cy3标记的DNA片段与固定于芯片上的探针进行杂交,对杂交芯片进行扫描分析,根据荧光信号的强度来确定是否存在猪细小病毒。结果表明,采用浓度为5μmol/L的探针与PCR产物于47℃杂交1 h即可得到清晰的荧光信号,检测灵敏度可达34.5 ng/μL,同时用制备的基因芯片对临床20份疑似猪细小病毒病感染的病料进行检测,检测结果与PCR检测结果符合率达100%,表明基因芯片检侧技术是一种灵敏度高、特异好的检侧方法。该方法的建立可以快速有效地对猪细小病毒做出诊断,具有较好的应用前景。     

肉仔鸡沙门氏菌的分离鉴定与防治

<正>肉仔鸡沙门氏菌病是由沙门氏菌引起的肉仔鸡的一种细菌性传染病。主要表现为水样下痢,闭目,精神萎靡,机体消瘦,死亡率呈递增趋势。本文对肉仔鸡沙门氏菌进行分离鉴定,并经药敏试验筛选敏感药物,为临床预防和治疗奠定基础。1流行病学调查2011年11月,在河南省安阳地区肉仔鸡流行一种传染病,以排白色和黄绿色稀便、消瘦、死亡等为主要症状的疾病,病程持续时间短,发病率高。经了解鸡群地面饲养,饲养密度较大,鸡舍内通风     

应用伪狂犬病毒表达载体研制重组疫苗的研究进展

随着分子生物学技术的发展,尤其是DNA重组技术的发展和应用使得疫苗方面的研究正逐渐从传统的灭活和弱毒疫苗向基因工程疫苗过渡,特别是以病毒和细菌为活载体疫苗的研制,以期克服常规疫苗在免疫时出现的毒力返强和散毒、免疫效率较低、过敏反应、用量较大等弊端。随着人们对伪狂犬病病毒分子生物学的深入研究,伪狂犬病毒特殊的基因组结构、宿主的广泛性和生物安全性作为重组病毒载体疫苗株越来越引起人们的关注,以伪狂犬病毒为载体研制基因工程疫苗的研究在国内外已取得了可喜的进展,现就国内外研究概况作一综述。1伪狂犬病毒的分子生物学…