不同光照周期对雌兔卵泡发育和下丘脑-垂体-卵巢轴的影响

本研究旨在观察不同光照周期对母兔的发情率、同期发情和性腺轴的影响并探讨其机制。选用5月龄未经产新西兰母兔48只,随机分成3组,每组16只,前10 d各试验组采用"12 h光照∶12 h黑暗"的光照制度,后6 d分别采用长光照(16 h光照∶8 h黑暗)、短光照(8 h光照∶16 h黑暗)和正常光照(12 h光照∶12 h黑暗,对照组)的光照制度,光照强度80 lx。试验结束后统计发情率,并采集血清、下丘脑、垂体和卵巢,用ELISA、HE染色、RT-PCR的方法,研究不同光照周期下对雌兔卵泡发育和激素的影响。结果表明:长光照组血清褪黑激素水平比对照组显著低34.8%(P0.05)、比短光照组显著低47.8%(P0.05),而短光照组比对照组高25%(P0.05)。长光照组母兔下丘脑分泌GnRH mRNA表达显著增强,其mRNA表达量比短光照组显著升高453%(P0.05),比对照组显著升高250%(P0.05);而短光照组的比对照组降低36.7%(P0.05)。同样,长光照组母兔垂体的GnRH mRNA表达量较短光照组、对照组分别高70%和41.7%,差异显著(P0.05);短光照组则比对照组降低16.7%(P0.05)。长光照组的血清卵泡刺激素水平分别比短光照组、对照组高33.7%和25.1%,差异显著(P0.05)。长光照组血清促黄体生成素含量比短光照组显著高54.2%(P0.05)。长光照组血清雌二醇水平较对照组显著高34.8%(P0.05),较短光照组显著高47.8%(P0.05);短光照组比对照组低17.6%(P0.05)。长光照组的单位面积初级卵泡数显著多于短光照组120%(P0.05)和对照组68.3%(P0.05),短光照组与对照组相比差异不显著(P0.05)。3个试验组卵巢单位面积窦状卵泡数没有显著差异(P0.05)。长光照组的发情率为81.25%,而短光照组的仅为12.5%,对照组的发情率为31.25%。由本试验可知,长光周期组可抑制褪黑激素分泌、促进下丘脑分泌GnRH活性增强、提高垂体细胞GnRH受体表达、促进垂体分泌LH、FSH、提高了血清中LH、FSH的水平、促使雌二醇分泌、卵泡发育、成熟和排卵,诱导母兔同期发情。     

光照周期对褪黑激素受体在母兔下丘脑-垂体-卵巢轴中分布与表达的影响

旨在观察不同光照周期对新西兰白色母兔褪黑激素受体在"下丘脑-垂体-性腺轴"中的分布和表达模式,从而进一步分析褪黑激素在不同光照周期下调控母兔发情的机制。选用5月龄未经产新西兰母兔48只,随机分成3组,每组16只,前10 d各试验组采用"12 h光照：12 h黑暗"的光照制度,后6 d分别采用长光照（16 h光照：8 h黑暗）、短光照（8 h光照：16 h黑暗）和正常光照（12 h光照：12 h黑暗,对照组）的光照制度,光照强度80 lx,试验期为16 d。试验结束后剖杀动物,取下丘脑、垂体和卵巢,用qPCR、免疫印迹、免疫组织化学方法,研究不同光照周期对母兔的下丘脑、垂体、卵巢中褪黑激素受体亚型分布与表达的影响。结果表明：在下丘脑,短光照组的MT1 mRNA表达量较长光照组高88.8%（P<0.05）,较对照组高54.9%（P<0.05）,长光照组与对照组间无显著差异;MT2 mRNA表达量在不同光周期组间差异不显著（P>0.05）。免疫组织化学染色结果显示,长光照组下丘脑室周核的MT1阳性细胞数明显较短光照组少69.4%（P<0.05）,较对照组少37.3%（P<0.05）,短光照组比对照组显著多104.8%（P<0.05）;同样,长光照组室旁核的MT1阳性细胞数明显较短光照组少52.9%（P<0.05）,对照组明显较短光照组少55.8%（P<0.05）,而长光照组与对照组间差异不显著（P>0.05）。在垂体,短光照组的MT1 mRNA表达量比长光照组显著高164%（P<0.05）,比对照组显著高49.5%（P<0.05）,而长光照组比对照组显著低43.5%（P<0.05）;但不同光周期下MT2 mRNA表达量差异不显著（P>0.05）;长光照组的卵巢MT1 mRNA表达量较对照组低33.3%（P<0.05）,较短光照组低53.6%（P<0.05）,短光照组与对照组间差异不显著（P>0.05）;卵巢中短光照组MT2的mRNA相对表达量比对照组显著高90.0%（P<0.05）,比长光照组显著高100%（P<0.05）,长光照组与对照组差异不显著（P>0.05）。短光照周期显著提高了下丘脑、垂体和卵巢中褪黑激素受体亚型MT1表达,而不是MT2受体亚型。光照周期调控母兔发情的作用机制可能是褪黑激素通过MT1受体途径实现的。