circRNA-Zfp609对C2C12成肌细胞增殖和分化的影响

【目的】试验旨在探究circRNA-Zfp609调节C2C12成肌细胞增殖和分化的潜在分子机制。【方法】利用RT-PCR和测序分析小鼠骨骼肌组织和C2C12成肌细胞中circRNA-Zfp609的表达,实时荧光定量PCR检测小鼠心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胃、小肠、骨骼肌组织及增殖12、24、36、48 h和分化0、1、3、5 d的C2C12成肌细胞中circRNA-Zfp609的相对表达量;实时荧光定量PCR检测分化0、1、3、5 d的C2C12成肌细胞中肌细胞生成素（MyoG）和肌球蛋白重链（MyHC）的相对表达量。用circRNA-Zfp609的干扰表达载体（siRNA）干扰细胞,通过CCK-8测定siRNA对C2C12成肌细胞增殖率的影响;用实时荧光定量PCR检测siRNA干扰对circRNA-Zfp609、MyoG和MyHC相对表达量的影响。通过TargetScan 7.0和miRDB软件预测circRNA-Zfp609上与肌肉分化相关的miRNA位点,将筛选的miRNAs的过表达载体转染HEK293T细胞,利用双荧光素酶报告试验验证circRNA-Zfp609与miRNA的互作关系。根据miRNAs对circRNA-Zfp609的互作,构建circRNA-Zfp609的野生型和突变型载体并转染HEK293T细胞,利用双荧光素酶报告试验验证circRNA-Zfp609对miRNA的靶向关系。【结果】PCR和测序结果表明,小鼠骨骼肌中可表达circRNA-Zfp609;circRNA-Zfp609在小鼠骨骼肌中表达水平最高,在其他组织中的表达量由高到低依次是肾脏、肺脏、心脏、肝脏、胃、脾脏和小肠。与12 h相比,在C2C12成肌细胞增殖的36和48 h circRNA-Zfp609的相对表达量显著增加（P<0.05）;与分化第0天相比,在C2C12成肌细胞分化的第1、3和5天circRNA-Zfp609的相对表达量均显著增加（P<0.05）,MyoG、MyHC的相对表达量均极显著增加（P<0.01）。与NC组相比,siRNA组C2C12成肌细胞的增殖率和circRNA-Zfp609相对表达量均极显著降低（P<0.01）,MyoG和MyHC的相对表达量显著降低（P<0.05）。circRNA-Zfp609上有miR-150-5p、miR-327、miR-344g-3p和miR-615-5p 4种与肌肉分化相关的miRNAs。circRNA-Zfp609与miR-615-5p的吸附能力最强,具有靶向结合作用。circRNA-Zfp609可以作为分子海绵与调控肌肉分化相关的miR-615-5p相互作用。【结论】circRNA-Zfp609在小鼠的组织中广泛表达,在骨骼肌中表达水平最高;circRNA-Zfp609在C2C12成肌细胞增殖和分化的不同时期差异表达,circRNA-Zfp609上有4个与肌肉分化相关的miRNAs,其中miR-615-5p与circRNA-Zfp609具有靶向关系。本研究结果可为与家畜骨骼肌生长发育相关的研究提供参考。     

基于地域文化下的校园景观内涵设计研究

校园景观内涵设计包含历史文化的传承、主题、场所精神以及空间的感受性和体验性等多方面的内容。通过国内外理论研究和项目案例实践的研究,提出地域文化的介入方式和设计理念的思考方式,在设计中基于地域文化,结合功能、艺术、思想以及植物等多方面元素对校园景观进行深度研究,渗透于校园景观的相关场所的设计思考,从而建设具有内涵的场地。     

北方乡村旅游景观设计研究

乡村旅游景观研究以景观内涵和构成要素为研究基础,该研究简述了乡村旅游景观的文化价值和经济价值的研究,提出设计控制的宏观、中观、微观的3个尺度,并通过对凌源老虎沟自然风景区设计的案例分析研究,得出乡村旅游景观中保护、传承、创新的3个主轴线,为北方地区古村落保护、美丽乡村建设等有地域特色的乡村旅游景观营建提供参考。     

羊螨病的防治措施

羊螨病是由疥螨和痒螨寄生在体表而引起的慢性寄生性皮肤病。螨病又叫疥癣、疥虫病、疥疮等,具有高度传染性,往往在短期内可引起羊群严重感染,危害十分严重。1病原1.1疥螨疥螨寄生于皮肤角化层下,并不断在皮内挖凿隧道,虫体即在隧道内不断发育和繁殖。疥螨的成虫形态     

赞比亚比姆巴地区的轮垦制度

在《农业考古》的前几期中,我们拜读了一系列有关中国境内少数民族地区现存的“刀耕火种”农业的研究文章。本文介绍的是非洲南部赞比亚比姆巴地区的一种称为特殊的原始农耕制度。作者从生态系统、耕作与迁徙过程、食物的构成以及劳力的分配等方面对这种农作方式进行了深入细致的调查研究。这对我们在世界范围内进行早期农业的发展阶段及耕作过程的比较研究当具有一定的参考价值。本文译自丹麦国家博物馆英文杂志《工具与耕作》一九八五年二月号(总第五期)     

奶牛胚胎移植技术的应用效果观察

奶牛胚胎移植技术是目前国内奶牛繁殖领域中比较先进的生物技术．它可以使生产性能低的奶牛或黄牛。繁殖生产出品质优良，生产性能高的奶牛后代，从而增加优秀奶牛的数量。提高奶牛的单产水平。密山市作为全省奶牛生产的重点市县，近2年来，承担了省计委和省财政厅下达的奶牛胚胎移植技术的推广和应用项目．现把情况报告如下：     

在生产条件下牛冷冻胚胎直接移植的效果

以１８Ｍ乙二醇或１６Ｍ丙二醇作抗冻剂冷冻牛胚胎,解冻后在Ｍ－ＰＢＳ中一步脱除抗冻剂体外培养或不脱除抗冻剂直接移植给受体母牛。结果表明用１８Ｍ乙二醇直接移植法的体外培养存活率和移植妊娠率均显著高于１６Ｍ丙二醇组,分别为８４８％比６５５％和４８５％比４００％（Ｐ＜００５）,但与对照组（１４Ｍ甘油常规法）之间无显著差异,分别为８４８％比８６７％和４８５％比５００％（Ｐ＞００５）。     

油用型向日葵杂交种白葵杂13选育报告

油用型向日葵新品种白葵杂13是以不育系00801A为母本,恢复系RF008R为父本杂交育成的油用型向日葵杂交种。吉林省区域试验平均产量2 623.50 kg/hm2,比对照品种白葵杂6号增产5.21%。2010年生产试验平均产量2 288.63 kg/hm2,比对照品种白葵杂6号增产11.06%。该品种的特点是高产,高油(子实含油率47.37%),抗病,适应性广。     

甘蔗开花生物学特性及花粉活力研究

在温室内观察甘蔗开花动态,用TTC法测定甘蔗花粉活力,联苯胺-过氧化氢法测定柱头可授性。结果表明:花穗上小蠡花开放顺序,一般是自上而下,由外至内;ROC22和科五花粉活力于开花第1天达到80%以上,第2天有小幅度上升,之后迅速降低,第7天仅采到少许花粉,但活力仍在32%左右。甘蔗雌蕊柱头开花前1天具有可授性,自交授粉后的1~2 d内保持强可授性,之后柱头迅速变黑枯萎;未授粉柱头花开后的9 d内一直保持靓丽的艳红色,具强可授性。柱头可授性的最佳时期为开花后第1~9天,甘蔗的最佳授粉期为母本开花2 d后再授以父本花粉,4 d内即可完成杂交过程。     

食用向日葵产量与主要性状相关及通径分析

研究了食用向日葵杂交种的12个性状与产量的相关关系,并进行了通径分析。结果表明:各性状与产量的相关系数大小依次为,单盘粒重株高茎粗单盘结实数百粒重单盘总粒数结实率籽仁率叶数粒宽盘径粒长。产量与盘径呈不显著正相关,与粒宽和粒长呈不显著负相关,与另9个性状呈极显著正相关。株高、百粒重、单盘粒重和单盘结实数对产量的直接作用效应较高。