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本试验旨在研究干扰素刺激基因15(interferon-stimulated gene 15,ISG15)敲除对猪伪狂犬病病毒(PRV)复制的影响。通过CRISPR/Cas9技术构建猪ISG15基因敲除猪肾上皮(PK-15)细胞系,利用CCK-8试剂盒检测PK-15敲除ISG15基因对细胞活力的影响,采用间接免疫荧光技术检测PK-15以及PK15-ISG15-/-细胞感染PRV的增殖差异,通过RT-qPCR检测PRV-EP0、PRV-gE、PRV-VP16和IFN-β的转录水平,Western blot检测PRV-gE和ISG15的蛋白表达水平,以及通过病毒噬斑检测对子代病毒感染力的影响。结果表明,sgRNA1和sgRNA2均成功敲除ISG15基因;CCK-8试剂盒检测细胞活力结果表明,敲除ISG15基因对PK-15细胞活力无影响;间接免疫荧光检测结果表明,PRV感染后,PK15-ISG15-/-细胞中的荧光强度明显高于PK-15细胞;RT-qPCR和Western blot结果表明,敲除ISG15可以促进PRV的转录和蛋白表达;病毒噬斑试验进一步显示,敲除ISG15可以促进PRV的复制。另外,RT-qPCR结果显示,敲除ISG15可以抑制PRV感染引起的IFN-β转录上调。本研究成功构建了PK15-ISG15-/-细胞系,并通过PRV感染试验证实ISG15基因可以抑制PRV在PK-15细胞中的增殖,并推测这种抑制作用可能与IFN通路有关。 相似文献
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断奶猪多系统衰竭综合征(PMWS)是由猪圆环病毒2型(PVC2)感染所致新的病毒性疾病。PVC2感染除了引起PMWS而外,还可导致母猪繁殖障碍、断奶猪和育肥猪的呼吸道疾病、猪皮炎和肾病综合症(PDNS)及猪先天性震颤。 相似文献
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随着社会经济的日益提升,与人们日常生活工作学习紧密联系的建筑市场也得到了飞速的发展。而施工的质量与安全,显然就成了大家广泛关注的问题。露天作业的主要施工形式,加大了安全管理的难度。所以,建筑施工中最需要解决,是安全管理制度上的完善,以及如何将施工安全切实的落实到实际中。本文就建筑施工中存在的一些安全问题作了简要的分析,并针对性的提出了几点安全施工管理防范的措施,希望施工单位能够予以借鉴,避免安全事故的发生。 相似文献
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鸡球虫病对雏鸡和育成鸡的危害十分严重,15~50日龄的雏鸡发病率高,死亡率可达80%以上。
1流行特点球虫的宿主有特异性,即侵袭鸡的球虫不会侵袭火鸡等其他家禽,而感染其他家禽的球虫不会感染鸡。各品种的鸡均有易感性,1日龄雏鸡对本病也敏感,但有母源抗体保护,所以10日龄以内很少发病。15~50日龄发病率和死亡率很高,成年鸡对球虫也是敏感的。 相似文献
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为研究猪伪狂犬病在江苏省猪群中的野毒感染情况,本研究应用美国IDEXX生产的猪伪狂犬病病毒gE-ELISA抗体检测试剂盒,对来自江苏省9个城市2016~2018年间送检的1 700份血清进行了检测,并对其不同市县、不同时间、不同季节以及不同年龄阶段的猪血清学结果进行分析。结果显示,江苏省送检的9个城市均存在PRV的野毒感染,平均阳性率为37.8%;其中宿迁市的血清抗体阳性率最高,达47.0%。冬季该病的野毒感染比例最高(46.9%),且种公猪的血清阳性率较其他阶段的猪高,达到45.1%。从此次的血清流行病学调查结果显示,猪伪狂犬病在江苏省猪群中的感染比较普遍,应该引起重视。 相似文献
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高校实验仪器设备的验收工作主要包括四个阶段,即到货接收、开箱检查、安装调试、试运行及交付使用。其主要验收步骤为成立验收小组进行检验、编制实验仪器设备验收报告、作出验收总结。 相似文献
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