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[目的]通过对诱导耐药沙门菌成簇间隔的短回文重复序列(CRISPR)比对分析,以及cas(CRISPR associated)mRNA表达水平的变化,探讨CRISPR/Cas与沙门菌耐药性的关系。[方法]对鼠伤寒沙门菌ATCC13311进行耐药诱导分别获得3株体外诱导耐药(环丙沙星、庆大霉素、氨苄西林)菌和1株体内诱导耐药(环丙沙星)菌,设计引物对CRISPR,进行PCR扩增并检测,应用CRISPR Finder分析CRISPR序列,对5株沙门菌的CRISPR序列进行比对;利用RT-q PCR检测耐药前后沙门菌cas1、cas6、casA mRNA表达水平的变化。[结果]成功扩增出2段CRISPR序列(CRISPR1、CRISPR2),耐药菌碱基的突变均发生在前导区和序列末端;CRISPR1序列的突变发生在前导区的1~4 bp和序列末端的1 136~1 144 bp区域内;CRISPR2序列的突变发生在前导区的1~14 bp和序列末端的780~796 bp区域内;重复间隔序列保守且发现有重复序列的退化现象(degeneration repeats,DRs),同时耐药菌cas1、cas6、casA mRNA的表达水平下降。[结论]提示:沙门菌CRISPR序列突变和cas mRNA表达水平下降与其耐药性有关。 相似文献
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对2020年在宁夏和新疆部分动物养殖场和屠宰场分离的沙门菌(Salmonella)进行了相关抗菌药物的耐药性调查，以了解沙门菌的流行特点以及耐药性情况，一方面为国家动物源细菌耐药网提供数据，另一方面为相关养殖场临床抗菌药物的合理使用提供科学依据。首先采用沙门菌选择性培养基进行菌株的分离、纯化及鉴定，采用微量肉汤稀释法检测16种抗菌药物对分离菌株的最小抑菌浓度(MICs),采用玻片凝集法对分离菌株进行血清型鉴定。结果显示：试验共分离到60株沙门菌，其血清型有16种，主要包括鼠伤寒沙门菌(S. Typhimurium)、里森沙门菌(S. Rissen)、汤普森沙门菌(S. Thompson)、肠炎沙门菌(S. Entertidis)、德尔卑沙门菌(S. Derby)、明斯特沙门菌(S. Muenster),检出率分别为26.67%(16株)、15.00%(9株)、11.67%(7株)、10.00%(6株)、8.33%(5株)、6.67%(4株),其他9种血清型的检出率为1%～5%。分离菌株对磺胺异噁唑、四环素和氨苄西林耐药程度较高，耐药率分别达75.00%、70.00%和66.67%;对奥... 相似文献
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