饲料脂肪源和碘酸钾对中华鳖稚鳖生长、存活率、肝肠组织形态和脂类代谢的影响

为了比较饲料中添加鱼油、茶籽油、亚麻籽油以及碘酸钾对中华鳖（）稚鳖生长和脂类代谢的影响，本研究配制了4种油脂含量为10%的饲料，分别为鱼油料（FO，对照组）、鱼油+碘酸钾料（FO+PI，碘酸钾添加量为75 mg/kg）、茶籽油料（TO）和亚麻籽油料（LO），饲喂初重为（5.06±0.05）g的中华鳖66 d。FO+PI组和LO组中华鳖稚鳖的存活率显著低于FO组（<0.05）。各组中华鳖稚鳖血浆中葡萄糖、总胆固醇和甘油三酯水平无显著差异（ACACA）的表达水平，上调了中华鳖-499的表达水平（-23b的表达水平（<0.05）。FO+PI组和TO组的稚鳖肝脏细胞内脂滴空泡较少，同时TO显著影响了肠道组织的黏膜褶。结论认为，相比于鱼油组，在饲料中添加10%茶籽油、亚麻籽油和添加75 mg/kg碘酸钾不会引起稚鳖生长差异，但是亚麻籽油和碘酸钾降低了稚鳖的存活率，茶籽油和碘酸钾影响肝脏的脂类代谢。     

宽体金线蛭不同工艺提取物的抗凝溶栓活性比较研究

宽体金线蛭（Whitmania pigra）具有抗凝溶栓的药理作用,但其药效受提取工艺的影响。为全面评价并筛选出合适的提取工艺,本试验采用脱脂、水提、酸提和酶解等不同工艺制备了14种提取物,并对提取物的抗凝活性、纤溶活性与体外溶栓活性进行分析。结果表明,脱脂胃蛋白酶酶解提取物的抗凝血酶活性显著高于其他提取物,且具有较强的纤溶活性和体外溶栓活性;仿生酶解提取物具有较强的抗凝血酶活性和体外溶栓活性;脱脂仿生酶解提取物具有较强的纤溶活性和体外溶栓活性;脱脂加热的水提提取物具有较强的纤溶活性和体外溶栓活性。脱脂胃蛋白酶酶解提取物中,分子量小于3 kDa的多肽具有较强的抗凝血酶活性和纤溶活性。此外,三个水提提取物、仿生酶解物、脱脂仿生酶解物和粗酶酶解提取物对纤维蛋白原的α肽链均具有溶解作用。综上所述,宽体金线蛭提取物均具有抗凝溶栓的药理作用,酶解提取物优于水提提取物和酸提提取物,脱脂处理有利于活性物质的提取,其中胃蛋白酶酶解提取物效果最佳,并且脱脂胃蛋白酶酶解物的小分子多肽成分具有最佳的抗凝血酶活性和纤溶活性。本试验结果为进一步开发利用宽体金线蛭的药理作用提供了理论依据。     

饵料类型对岱衢族大黄鱼鱼体和肌肉营养成分、体色、肉色的影响

岱衢族大黄鱼为我国优质大黄鱼养殖群体,养殖中所投喂的饵料往往影响着鱼体和肌肉营养成分、体色和肉色,这些均为衡量岱衢族大黄鱼品质的重要指标.本试验旨在通过测定岱衢族大黄鱼鱼体和肌肉营养成分、体色和肉色指标,研究投喂鲜杂鱼和配合饲料对岱衢族大黄鱼品质的影响.试验设置2组,分别投喂鲜杂鱼和配合饲料22个月,采样后所测鱼体和肌肉营养成分指标包括干物质、粗蛋白质、粗脂肪、粗灰分和氨基酸含量,体色和肉色指标包括L、a、b值.结果表明:与投喂鲜杂鱼相比,投喂配合饲料显著降低了岱衢族大黄鱼全鱼的粗脂肪含量(P＜0.05),但显著提高了肌肉的粗脂肪、亮氨酸(Leu)、赖氨酸(Lys)、谷氨酸(Glu)、总必需氨基酸、总呈味氨基酸和总氨基酸含量(P＜0.05);饵料类型对岱衢族大黄鱼的体色和肉色无显著影响(P＞0.05),但岱衢族大黄鱼体表不同部位颜色存在显著差异(P＜0.05),与背部相比,腹部的颜色较亮,且偏红黄.由此得出,相较于鲜杂鱼,采用配合饲料养成的岱衢族大黄鱼肌肉具有更高的营养价值.     

真鲷维持氮需要量的研究

采用氮平衡试验和无氮日粮法研究了体重为50、100、150、200和250 g左右真鲷幼鱼，在饲喂粗蛋白质含量为38%～46%饲料条件下的维持氮需要量(Nm)。氮平衡试验结果表明：在总摄入氮中，氮沉积量的变化为0.15～0.30 mg•g-1•d-1，占总摄入氮12.1%～20.3%；粪氮排泄量为0.20～0.32 mg•g-1•d-1，占总摄入氮16.4%～21.6%；而内源氮排泄量是总摄入氮中主要的氮消耗部分，为0.80～0.96 mg•g-1•d-1，占总摄入氮的62.8%～67.7%。维持氮需要量与体重呈正相关，体重越大，Nm越大；但单位体重的Nm与体重呈负相关，个体越小，单位体重的Nm越大。在试验的体重范围内，单位代谢体重的Nm′，各生长阶段中没有显著差异(P>0.05)，平均为0.498 mg•g-1•d-1。无氮日粮法的结果表明：Nm′与无氮日粮的采食量呈负相关；随着真鲷采食量下降，Nm′增加；当无氮日粮的采食量为零（绝食）时，Nm′值为0.510 mg•g-1•d-1，与150 g体重的氮平衡试验0.508 mg•g-1结果相接近。考虑到试验鱼的应激反应和结果的稳定性，建议在维持氮测定时采用氮平衡试验方法。本试验还给出了不同生长期维持鱼体蛋白质所需要的饲料蛋白质含量。图3表6参22     

检测产单核细胞李氏杆菌溶血素的胶体金试纸条制备及初步应用

产单核细胞李氏杆菌为重要的食源性病原菌,本研究旨在建立快速、灵敏、特异的检测方法,提高检测效率和检测通量。李氏杆菌溶血素(LLO)蛋白经原核表达后, 制备单克隆抗体, 测定单克隆抗体的亚型、效价及亲和力。柠檬酸钠法研制LLO胶体金试纸条,并对试纸条的特异性、敏感性、重复性、稳定性及模拟样品进行检测,并初步应用于实际海产品的检测。结果发现,制备的LLO单克隆抗体特异性强、稳定性高、重复性佳、灵敏度较高,亲和力好,亲和力常数为4.25×10⁸ L·mol^－1。人工污染样品试验表明灵敏度与纯细菌培养物基本一致,为3.0×10⁵CFU·mL^-1。将LLO胶体金试纸条应用于500份海产品的实际检测中,产单核细胞李氏杆菌的阳性检出率为2.20% (11/500),略低于国标检测方法(GB4789.30—2010)的2.40%(12/500)和PCR检测方法的2.40%(12/500),三者之间符合率为91.67%。另外缩短检测时间至15 min,检测效率大幅度提高。本研究建立的LLO胶体金检测方法可用于产单核细胞李氏杆菌的快速检测。     

植物蛋白原料抗营养因子及其消除方法的研究进展

鱼粉是渔用饲料的主要蛋白源,但是目前正面临着短缺的问题,因此,寻找合适的鱼粉替代物显得尤为迫切。植物蛋白作为鱼粉替代品有很多的优点,目前已经得到了广泛的应用,但同时也存在着一些问题。植物蛋白含有一定种类和一定量的抗营养因子,因此在应用之前必须采用合适的方法进行处理以消除抗营养因子,否则会影响使用效果。本文对目前主要的三种处理方法(物理法、生物法和化学法)进行综述。     

中华鳖胚胎肝成纤维细胞的原代培养及其聚肌苷酸胞苷酸(Poly I:C)刺激模型构建

为建立中华鳖胚胎肝成纤维细胞的体外分离培养体系,研究聚肌苷酸胞苷酸(Poly I:C)刺激对细胞干扰素生成通路相关因子的影响,从而最终构建基于该成纤维细胞的干扰素生成通路激活模型,以发育至23期的中华鳖胚胎为实验材料,采用胰蛋白酶消化法得到肝成纤维细胞,结合细胞形态学、生长曲线和PCR法进行鉴定,并分析其生物学特性.之...     

黄颡鱼促甲状腺激素受体基因的克隆及其对饲料中添加碘化钾的表达反应

本试验旨在得到黄颡鱼促甲状腺激素受体(TSHR)基因的c DNA全长序列,同时掌握其组织表达差异,并揭示饲料中添加碘化钾对黄颡鱼甲状腺TSHR基因表达及生长性能的影响。采用c DNA末端快速扩增(RACE)技术克隆TSHR基因c DNA全长序列,再应用荧光定量PCR技术检测TSHR基因的相对表达量,并制备了碘化钾添加量分别为0(对照)、10、50和100 mg/kg的4种试验饲料进行为期27 d的黄颡鱼养殖试验。结果显示:本试验成功克隆得到长度为2 786 bp的TSHR基因c DNA的全长序列,其中开放阅读框2 238 bp,编码745个氨基酸,Blast程序分析表明黄颡鱼TSHR氨基酸序列与其他已知鱼类的相似性为60%~87%。组织表达分析结果表明TSHR基因在甲状腺组织中的相对表达量较高,其次是肝脏、肌肉和肠道。养殖试验结果表明,100 mg/kg组甲状腺TSHR基因相对表达量显著高于其他各组(P0.05),50和100 mg/kg组的增重、特定生长率和饲料系数显著优于对照组(P0.05)。由此得出,饲料中添加适量的碘化钾不仅影响TSHR基因的表达,还能有效促进黄颡鱼的生长。     

蜂胶、蜂花粉、蜂王浆抗肿瘤效果的比较研究

用蜂胶、蜂花粉水提液和蜂王浆稀释液分别灌胃S180 实体型小鼠 ,15d后解剖称取瘤重 ,计算抑瘤率。结果发现 ,蜂胶、蜂花粉水提液和蜂王浆稀释液的抑瘤率分别达 79 92 %,6 9 0 6 %和 75 83%。     

MicroRNA-499对中华鳖脂类代谢相关基因表达的影响

采用体内注射microRNA-499特异性抑制剂antagomirs的方法,揭示microRNA-499对中华鳖脂类代谢相关基因的调控作用。选取健康稚鳖15只,随机分成3组,分别设为空白对照组、注射生理盐水组和注射miR-499 antagomirs组。在同一时间点连续注射3 d后,测定中华鳖血清和肝脏中甘油三酯和总胆固醇含量,采用实时荧光定量PCR测定肝脏中microRNA-499和脂类代谢相关基因表达水平。结果表明,相对于空白对照组和注射生理盐水组,注射miR-499 antagomirs导致中华鳖肝脏甲状腺激素应答蛋白(THRSP)和钠/碘共同转运体(NIS)的表达水平升高,肉碱棕榈酰转移酶1(CPT1)表达水平降低(P<0.05)。microRNA-499影响中华鳖脂类代谢相关基因的表达水平,这可能与中华鳖脂肪生成和脂肪酸β-氧化有关。