福寿螺组织细胞原代培养及染色体核型分析

无菌分离取得福寿螺肌肉、外套膜、肾脏及脑组织,分别采用胰酶消化法和研磨法进行组织细胞分离,选取DMEM、F12和改良1640培养基分别进行细胞原代培养,光镜下观察细胞的生长状态,MTT法测定细胞活性。细胞培养一定时间后进行染色体制备及染色体核型分析。结果表明,福寿螺组织细胞在不同的培养基培养下活力具有明显差异,用含水解乳蛋白的DMEM培养基培养的福寿螺外套膜和斧足组织细胞活力较好;用M199培养基培养的福寿螺斧外套膜和脑组织细胞活力较好。核型分析结果表明福寿螺染色体为二倍体(2n=28,NF=56),核型为2B型,核型不对称系数为66.4%。     

花生不同品种外植体培养芽诱导的研究

实验比较了11个花生品种在MS和1/2 MS培养基中萌发情况,及其在4种芽诱导培养基中的叶段芽诱导率并观察了70%酒精和0.1%升汞不同处理时间的灭菌效果及其对种子萌发的影响.结果表明花生种子用酒精处理20～30 s和升汞处理10～12min灭菌效果理想,萌发率高;种子萌发率在1/2MS培养基中要比MS培养基高;芽诱导率以汕油523最高,在芽诱导培养基1中为93.1%,汕油31最差,在芽诱导培养基2中仅为9.5%.     

南美白对虾血蓝蛋白对酚氧化酶活性的影响

以采自厦门的南美白对虾(Penaeus vannamei)为研究对象，运用病原菌人工感染、血蓝蛋白浓度和酚氧化酶(phenoloxidase，PO)活性测定等方法探索南美白对虾血蓝蛋白在体内、外对其血清酚氧化酶活性的影响。结果表明，南美白对虾人工感染副溶血弧菌后，其血淋巴中血蓝蛋白浓度和PO活性的变化趋势基本一致。在体外实验中将一定量的血蓝蛋白重组蛋白添加至血清中，其PO活性可明显升高；但同时添加血蓝蛋白重组蛋白和E．coli K12超声破碎液后，其PO活力反而降低。研究提示，血蓝蛋白在一定范围内确实可以正反馈调节PO活性，但在细菌等干扰之下，其又可表现出一定的负反馈抑制活性。     

入侵植物乙醇提取物对福寿螺胆碱酯酶活性的影响

探讨了入侵植物乙醇提取物对福寿螺(Pomacea canaliculata)乙酰胆碱酯酶(Acetylcholinesterase,ACh E)和丁酰胆碱酯酶(Butyrylcholinesterase,BCh E)活性的影响。采用乙醇提取法获得薇甘菊(Mikania micrantha)、南美蟛蜞菊(Wedelia trilobata)和五爪金龙(Ipomoea cairica)3种入侵植物茎和叶组织活性物质,改良Ellam法测定其对福寿螺胆碱酯酶活性的影响。结果表明,3种入侵植物的乙醇提取物对福寿螺ACh E和BCh E的活性均具有较强的抑制作用,薇甘菊和南美蟛蜞菊叶比茎的乙醇提取物抑制作用强,五爪金龙的茎则比叶的乙醇提取物抑制作用强。各提取物对胆碱酯酶的抑制作用存在浓度梯度依赖性特点,在质量浓度为0.100 0 mg/m L时的抑制率接近阳性对照组。五爪金龙的茎和薇甘菊的叶乙醇提取物对福寿螺两种胆碱酯酶的活性具有较强的抑制作用,抑制率可达70%以上,说明这两种入侵植物具有开发为福寿螺植物源杀螺剂的潜力。     

盐生植物总DNA经花粉管通道导入花生研究初报

利用花粉管通道法将海滩盐生植物秋茄总DNA和海边月见草总DNA导入花生,在140mmol/LNaCl溶液处理下,转基因花生后代(T2)的发芽率有明显的提高,转秋茄DNA花生和转海边月见草DNA花生的发芽率分别是原种的2.0倍和1.8倍。     

负压和超声波处理对农杆菌介导的花生遗传转化效率的影响

为了提高根癌农杆菌介导的花生遗传转化效率,研究了不同强度的负压和超声波处理时间对外植体芽诱导率的影响以及对花生遗传转化的作用.结果表明,较低强度(抽拉30次)的负压处理和短时间(2min)的超声波处理对花生遗传转化有促进作用,虽然超声波处理延长了芽再生时间,但是有助于提高花生外植体芽点诱导率.     

农杆菌介导的花生遗传转化研究

对影响花生遗传转化效率的PPT筛选压、根癌农杆菌的侵染浓度、侵染及共培养时间等因素进行研究，采用农杆菌转化花生叶片，成功地将抗虫基因豇豆蛋白酶抑制基因(CpTI)和耐除草剂基因(Bar)导入花生。实验结果表明，外植体在MS 3mg／LBA 0．8mg／LNAA 2mg／LAgNO3 6mg／L Gln培养基上预培养3d，于OD600为0．3的农杆菌菌液中浸泡5～7min后培养2d，再转移至含有3mg／LBA 0．8mg／LNAA 2mg／LAgNO3 6mg／L Gln 500mg／LCb 300mg／LCef 0．25mg／LPPT的MS培养基诱导筛选培养，3个月后得到24个再生株系。经PCR初步检测，有7个株系显示了310bp的CpTI基因核酸片段，Southern杂交证实了5个株系有外源基因的整合。