海带种质固相保存技术

将海带种质的无菌采集与配子体固相保存相结合,对种海带的处理、游孢子的采集、配子体的分离与固相接种等关键步骤进行了研究和改进,建立了一种高效的海带配子体固相保存方法,此方法从源头降低了细菌的污染,减少了配子体保存过程中污染细菌的机会,简化了常规固相保存的菌处理流程,提高了保种效率,有利于固相保存方法的大规模应用。     

植酸酶在甲壳动物饲料中的应用

从生长、营养物质消化率、酶活性等方面阐述了植酸酶应用于水产饲料中对甲壳类动物的影响,为饲料行业植酸酶制剂的添加提供参考。     

海参池塘网箱保苗技术

池塘网箱保苗是通过网箱在海参养殖池塘上部水体进行保苗的一种方式。通过选择合适的池塘架设网箱,6-7月份投放10 000~20 000头/kg的小白点进行保苗,养殖成商品苗。     

海黍子人工育苗研究

通过采集荣成海区成熟海黍子（Sargassummutieum），利用维尼纶绳苗帘进行了海黍子育苗试验，对育苗过程中的幼孢子体收集、清洗、泼洒以及育苗过程中的水温控制、光照强度调节等进行了研究，经过1个多月的培养，海黍子幼孢子体幼苗长至约（3．8±0．5）mm，平均密度约（16±7）株／cm2。     

近河口海域淤泥池塘刺参养殖试验

近年来,刺参池塘养殖迅速发展,并具相当规模,但传统的石礁底质围堰养殖及改造沙砾底质的虾池进行刺参养殖已基本利用完毕,制约了刺参养殖业的进一步拓展。而在近河口海域,大片淤泥底质的虾池却没有充分利用,原因有二：一是近河口海域海水盐度相对偏低,尤其到雨季受河水径流的影响,海水盐度变化较大。二是经过前几年的对虾养殖,池底淤泥较深,污泥稀软,发黑发臭,不利于刺参的存活。     

污染严重的海带配子体分离纯化

针对海带(Saccharina japonica)配子体保存过程中严重污染材料的分离纯化进行研究。(1)液相培养分离纯化法:将克隆材料经超声波细胞粉碎仪打碎后重新附着到90 mm培养皿中,利用微毛细吸管在显微镜下分离出状态好且无菌丝附着的细胞段,继续保存。(2)固相培养分离纯化法:将克隆材料4 000 r/min离心5～10 min,弃上清,加灭菌PESI培养液重新悬浮藻液,利用5 mL无菌注射器吸取2 mL粉碎后的配子体细胞,逐点注射入固相平板上,接种后利用Parafilm封口膜密封培养皿,平板培养约60～120 d后观察,将未长出菌落且藻斑直径达2 mm的克隆团挑出,然后在PESI液体培养基中复苏继续保存。     

海带属配子体DNA提取及ISSR-PCR体系优化

为了建立一个重现性好、稳定性高,适用于海带属ISSR遗传分析的PCR反应体系,从海带属配子体材料中提取基因组DNA作为模板,应用正交设计试验对反应体系中各因子的不同浓度进行组合优化。结果显示：适用于海带ISSR 扩增反应的最佳体系(20 μL)为：1×PCR buffer,1.2 mmol/L Mg2 +,0.2 mmol/L dNTPs,1.0 μmol/L ISSR 引物,40 ng 模板DNA,0.25 U Taq DNA 聚合酶;扩增PCR 程序为：95℃预变性3 min;95℃变性45 s,52℃退火45 s,72℃延伸2 min,共38 个循环;最后72℃延伸10 min。在优化的海带ISSR 反应条件下,扩增条带稳定,重现性好,为应用ISSR 分子标记技术进行海带属遗传多样性研究和分子鉴定奠定了技术基础。     

不同种类冷冻保护剂对海带配子体及孢子的毒性评价

为筛选用于海带超低温保存的冷冻保护剂，采用10%二甲基亚砜(DMSO)、10%甘油、10%蔗糖、10%乙二醇、10%DMSO+10%甘油、10%DMSO+8%葡萄糖、10%DMSO+10%蔗糖、10%DMSO+10%甘油+8%葡萄糖、10%DMSO+10%山梨醇等9种单一或复合冷冻保护剂，在0～4℃条件下分别对海带配子体和孢子进行处理，对配子体处理30 min、60 min、24 h,对孢子处理15、30、60 min,通过统计配子体细胞的存活率以及孢子萌发成配子体的比例，对不同种类的冷冻保护剂进行毒性评价。结果表明：9种冷冻保护剂均对海带配子体和孢子有一定的毒性作用，并且毒性随着处理时间的延长而增强。10%DMSO对海带配子体细胞的毒性最小，处理60 min后配子体细胞的存活率为100%;其次是10%乙二醇，处理30 min后配子体的存活率为100%;含10%甘油的单一或复合冷冻保护剂对配子体细胞毒性较大，处理后配子体的成活率显著低于DMSO和乙二醇组(P<0.05)。单一冷冻保护剂对海带孢子的毒性显著低于复合冷冻保护剂，除10%甘油组处理30、60 min外，其他单一冷冻保护...