鲤疱疹病毒Ⅱ型ORF4蛋白在杆状病毒表达系统中的表达及其免疫原性分析

为进一步研究鲤疱疹病毒Ⅱ型 ( Cyprinid herpesvirus 2, CyHV-2) ORF4蛋白的功能, 通过PCR扩增CyHV-2 ORF4基因, 并构建重组穿梭质粒pFastBac HTA-ORF4, 将其转化至大肠杆菌DH10 Bac感受态细胞后获得重组杆粒Bacmid-ORF4; 采用脂质体法转染Sf9细胞后, 利用间接免疫荧光法 ( IFA) 和West-ern blot鉴定重组蛋白, 采用His亲和层析柱纯化重组蛋白, 并通过小鼠免疫试验分析其免疫原性.结果表明: 转染72 h后Sf9细胞逐渐呈现出细胞变圆、细胞核明显增大的形态变化; 间接免疫荧光结果显示, 重组杆状病毒感染的Sf9细胞中出现了明显的绿色荧光; Western blot结果显示, 纯化的CyHV-2 ORF4蛋白能够与抗His单抗发生特异性反应; 小鼠免疫试验显示, 纯化的CyHV-2 ORF4蛋白能诱导小鼠产生特异性免疫反应.研究表明, 本研究中获得的CyHV-2 ORF4蛋白有较好的免疫原性, 为CyHV-2 ORF4蛋白的功能解析提供了良好材料.     

六价铬对普通小球藻的急性毒性效应

为探究重金属铬在水环境中的致毒机理和生态风险，本实验开展不同浓度Cr⁶⁺(0、0.1、0.75、1.5、2.25和3 mg/L)对受试生物普通小球藻(Chlorella vulgaris)的急性毒性实验，分析藻密度、叶绿素a(Chl-a)含量、多糖含量、蛋白(TP)含量、活性氧自由基(ROS)含量、丙二醛(MDA)含量、细胞膜通透性、总抗氧化(T-AOC)能力、总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性、谷胱甘肽(GSH)含量、植物螯合肽(PCs)含量和吸附效率等指标的影响。研究结果表明在96 h内Cr⁶⁺各浓度组均会抑制藻细胞的生长，其中3 mg/L处理组抑制率最高，为57.32%,96 h-IC₅₀为2.067 mg/L。叶绿素a(Chl-a)含量和藻细胞生物量的变化呈现一致性，3 mg/L处理组最低，仅为对照组的26.60%。藻细胞胞内多糖和TP含量随着胁迫浓度的升高而降低。胁迫浓度的增加诱导了ROS含量的升高，3 mg/L浓度组ROS水平为对照组的6倍，MDA含量呈现相同趋势。此时藻细胞受到氧化损伤，细胞膜通透性显著增强...