甲硝唑胶体金试纸条的研制

为方便药物残留的现场快速检测,利用胶体金免疫层析技术研制出了一种快速检测蜂蜜样本中甲硝唑残留的试纸条。将人工抗原与二抗包被到硝酸纤维素膜上依次作为检测线和控制线,样本中的甲硝唑与检测线上的人工抗原竞争性结合胶体金结合垫上的抗体-胶体金结合物,根据检测线和控制线的显色情况判断样本的阴阳性。实验结果显示：试纸条上人工抗原MNZ-BSA的包被量为0.5mg/mL,二抗羊抗鼠IgG的包被量为0.54 mg/mL;试纸条对于甲硝唑的检出限为1μg/kg,与4种硝基咪唑类药物有交叉反应,但甲硝唑的检出限最低;样本中添加溶液A处理并用乙酸乙酯作为提取剂,单个样本检测时间为20min。适用于甲硝唑残留的大规模现场快速检测。     

T-2毒素免疫胶体金试纸条的研制及其在饲料检测中的应用

本实验采用免疫胶体金技术,建立了一种快速检测饲料中T-2毒素的方法。利用柠檬酸三钠还原法制备胶体金溶液,标记抗T-2毒素单克隆抗体并喷于玻璃纤维素膜上,T-2-HS-BSA及羊抗鼠IgG分别结合于硝酸纤维素膜上,依次将样本垫、胶体金结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫组装在PVC板上,并组装在试剂板中。测试结果表明,T-2免疫胶体金试纸条的检出限为100μg/kg,性能稳定、特异性强、准确率高,15 min内即可完成检测。     

甲基睾酮免疫胶体金试纸条的研制及在水产品中的应用

通过研究胶体金免疫层析技术,建立了一种快速检测水产品中甲基睾酮含量的方法。将待测样品中的甲基睾酮和试纸条检测线上包被的人工抗原(MT-BSA)竞争性结合金标结合垫上包被的胶体金-甲基睾酮单抗聚合物,根据检测线呈现的红色线条深浅来判定样品的阴阳性。结果显示:试纸条上MT-BSA抗原工作浓度为1.0mg/m L,羊抗鼠二抗工作浓度为1.5 mg/m L,试纸条的最低检测限达到10μg/kg,与甲基睾酮类似物的交叉反应率低;使用甲醇提取,4倍PBST稀释,整个检测所需时间仅10~15 min,适用于大规模样品筛选。     

肉鸡组织中氟喹诺酮类抗生素快速检测的胶体金技术研究

为了建立一种简单、快速、灵敏、特异的肉鸡组织中氟喹诺酮类抗生素残留检测方法,试验采用胶体金标记单克隆抗体与竞争抑制方法,组装了检测氟喹诺酮类抗生素残留的胶体金免疫层析试纸条。结果表明:将具有氟喹诺酮类药物母核结构共性特征的环丙沙星(CPFX)与牛血清白蛋白(BSA)偶联,获得了人工抗原CPFX-BSA,免疫6周龄Balb/c雌性小鼠,筛选得到了3株抗氟喹诺酮类抗生素广谱特异性单克隆抗体,分别命名为2D5、3E9、4H8。以4H8单克隆抗体对10种氟喹诺酮类抗生素的广谱性最好、敏感性最强,将4H8单克隆抗体纯化后标记胶体金颗粒作为金标垫,分别以CPFX-BSA偶联蛋白和兔抗鼠IgG作为检测限和质控限,组装了检测氟喹诺酮类抗生素残留的胶体金免疫层析试纸条,该试纸条肉眼于10 min内即可判定结果。检测10种氟喹诺酮类抗生素均为阳性,而检测4种常见药物均为阴性。对CPFX、培氟沙星、达氟沙星、氧氟沙星、诺氟沙星、恩诺沙星、洛美沙星的检测限为3.2 ng/mL,对沙拉沙星、双氟沙星、麻保沙星的检测限为6.4 ng/mL。在37℃条件下可稳定保存60 d,在4℃条件下可稳定保存360 d。检测2015—2016年河北省及周边地区的鸡肉样品3 414份,阳性率为0.76%,其中屠宰场、超市、活禽市场的阳性率分别为0.38%、0.10%、2.31%。说明胶体金检测氟喹诺酮类抗生素残留具有良好的广谱性、特异性、灵敏度、稳定性,且操作简单、检测快速,适合现场检测。