猪流行性腹泻病毒E基因真核表达载体的构建及融合蛋白的表达

E蛋白是猪流行性腹泻病毒的小膜蛋白,为了研究E蛋白在病毒侵染宿主细胞过程中的作用,构建了PEDV E基因的真核表达载体。通过RT-PCR技术扩增E基因片段,经双酶切连接至pEGFP-N1载体,酶切鉴定及测序结果证实PEDV E基因成功克隆到pEGFP-N1中,并将重组质粒命名为pEGFP-N1-E。将pEGFP-N1-E转染He La,利用Western Blot和免疫荧光技术检测pEGFP-N1-E的表达以及定位情况,结果显示pEGFP-N1-E在He La细胞中成功表达,并且在胞质胞核均匀分布。结果表明:pEGFP-N1-E已被成功构建,并且在He La细胞中正确表达。为后续研究关于E基因的功能及其在抗病毒中所发挥的作用等方面奠定了研究基础。     

怀头鲶养殖技术之二北京地区怀头鲶池塘套养技术

怀头鲶(Silurus soldatovi)主要分布于黑龙江和辽河水系,在鱼类学上隶属于鲶形目、鲶科、鲶属,是一种凶猛的大型肉食性经济鱼类,也是世界上生长最快的淡水鱼,最大日增重每尾鱼可达75g以上,最大个体体重达120kg以上。怀头鲶适应环境能力强,耐低溶解氧,容易饲养,起捕率高,在冰下也可摄食,当年鱼苗即可养成商品鱼,并且养殖效益高,是一种非常适合于北方地区养殖的名优品种。北京地区池塘条件优越,野杂鱼等天然饵料生物相对充足,且消费市场巨大,大规模养殖怀头鲶在促进水产养殖结构调整、丰富消费市场、提高渔民养殖效益上可发挥重要作用。近几年,北京市房山区水产技术推广站进行了池塘套养怀头鲶的试验,取得成功,并总结了一些养殖经验。     

农产品中农药残留的分析方法概况

自从农药应用于农业生产,就给人类带来巨大的经济利益。但是,由于农药品种和用量的不断增加,农药在食品和环境中的残留问题、安全问题越来越突出。特别是人们对长期摄入低水平农药残留所导致的各种慢性及远期效应的关注和国际贸易等的原因,其负面影响已引起各级部门的关注。     

北京地区虹鳟池塘健康养殖技术

2006年,房山区水产技术推广站在实施“水产科技入户工程”的过程中精心组织、深入服务,确保了水产科技入户工作的顺利完成,特别是技术指导员根据实际情况向有条件的虹鳟养殖示范户重点推广了虹鳟健康养殖技术,积累了丰富的经验,同时取得了较高的经济效益和社会效益,全区推广应用面积达到100亩,虹鳟产量80万公斤,产值1600万元,利润480万元,比2005年产量提高了13%,利润提高20%,病害发生率降低15%,通过虹鳟健康养殖技术的推广,示范户的科技应用能力得到了普遍增强,水产品质量安全意识得到了显著提高。     

EV71病毒诱导细胞应激颗粒形成的初步研究

肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)属于小RNA病毒科,肠道病毒属,肠道病毒A型的成员,是引起婴幼儿手足口病(Hand foot and mouth disease,HFMD)的一种重要病原病毒。但截至目前,EV71病毒与宿主细胞相互作用的机制仍不清楚。为了研究EV71病毒诱导应激颗粒形成的分子机制,研究首先构建了真核表达载体pDsRed2-G3BP1,随后构建了稳定表达融合蛋白RFP-G3BP1蛋白的HeLa细胞系(HeLaRFP-G3BP1),并应用Western Blot和免疫荧光技术证实了G3BP1融合蛋白的正确表达。EV71病毒感染HeLaRFP-G3BP1后,超过40%感染细胞的胞质中出现了应激颗粒。此外,应用微管特异性抑制剂破坏细胞微管完整性之后,显著抑制应激颗粒的迁移聚集。研究证明了EV71病毒诱导细胞应激颗粒的初步形成并且应激颗粒的迁移聚集依赖于微管的完整性。     

房山区芦村渔场精养草鱼获高产

芦村渔场今年进行了以草鱼为主的精养试验，通过一年的强化管理，取得较好效益，现把情况总结如下。     

EV71病毒3C蛋白真核表达载体的构建及表达

[目的]构建EV71病毒3C蛋白的真核表达载体,并验证其在细胞中的正确表达。[方法]采用RT-PCR技术,从EV71病毒基因组RNA中扩增3C基因,克隆到真核表达载体pc DNA3.0-Flag上,并转染He La细胞,通过Western blot和免疫荧光验证3C蛋白的表达。[结果]酶切及测序鉴定显示,EV71病毒3C真核表达载体构建成功。Western blot和免疫荧光结果证实3C蛋白在He La细胞中成功表达。[结论]该研究成功构建了真核表达载体pc DNA3.0-Flag-3C,为进一步研究EV71病毒3C蛋白生物学功能奠定了一定基础。