三种猪瘟抗体检测技术的应用比较

应用猪瘟正向间接血凝法 (IHA)、斑点酶联免疫吸附试验 (Dot ELISA)以及猪瘟抗体免疫金标试纸条对规模化养猪场 1 38份不同阶段猪血清进行猪瘟免疫抗体水平的同步监测 ,检测结果 :IHA ,Dot ELISA ,金标试纸条测出经产母猪的猪瘟抗体阳性率分别为 83 3 %、80 0 %、80 0 % ,其平均值为 81 1 % ;三种方法测出后备母猪的猪瘟抗体阳性率分别为 53 3 %、53 3 %、50 0 % ,其平均值为 52 2 % ;三种方法测出 2 0日龄仔猪的猪瘟抗体阳性率分别为 69 2 %、76 9%、76 9% ,其平均值为 74 3 % ;测出 40日龄猪的猪瘟抗体阳性率分别为 76 9%、80 8%、80 8% ,其平均值为 79 5 % ;测出育肥猪的猪瘟抗体阳性率分别为 30 8%、30 8%、34 6 % ,其平均值为 32 1 %。经过统计学x2 检验 ,对于不同阶段猪三种方法两两之间检测结果均差异不显著 (P >0 0 5) ,表明上述三种方法均可用于猪瘟抗体的检测。     

国家一级保护植物——珙桐

珙桐是世界著名的观赏植物,树姿端庄,亭亭玉立,花朵奇丽,非凡花俗卉所能相比。每到开花之际,满树如群鸽栖止;又因其特产我国,所以欧美各国都称这种罕见的花树为“中国鸽子树”。对于这种美丽神奇的树木,各地有不少动人的神话传说。其中有个神话故事说,相传古代有个皇     

β-hemA-ISCOMs对鳗鲡的口服免疫效果

携带嗜水气单胞菌β-溶血素基因的重组菌可表达具天然活性的β-溶血素。重组菌胞外产物制成的ISCOMs(β-hemA-ISCOMs)经由肠胃途径免疫,可显著提高鳗鲡淋巴细胞的增殖转化能力(P<0.05),并诱导免疫保护,一次免疫的攻毒存活率为44.4%。二次免疫的攻毒存活率为100%。本研究首次将ISCOMs技术应用于鳗鲡口服免疫,试验结果表明ISCOMs技术在发展鱼类口服型疫苗上有广阔的应用前景。     

猪链球菌抗氧化应激蛋白YED和AHH的鉴定

为揭示猪链球菌抗氧化应激的机制,采用比较蛋白组学方法,鉴定猪链球菌抗氧化应激相关蛋白。提取猪链球菌全菌蛋白,以THB培养基培养的细菌作为对照,经H2O2处理后,液相色谱-串联质谱共鉴定出54个差异表达蛋白,其中28个蛋白在H2O2处理组中上调表达,26个蛋白下调表达。这些差异表达的蛋白主要参与代谢、生物合成、抗应激等过程。深入分析,发现7个新的蛋白可能参与猪链球菌抗氧化应激;从中选择在H2O2处理组显著上调表达的2个蛋白YbaB/EbfC家族核苷相关蛋白(YED)和2-氨基-4-羟基-6-羟甲基二氢蝶啶二磷酸激酶(AHH)进行验证。分别构建二者缺失株ΔYED和ΔAHH;生长曲线分析表明,2个缺失株在THB培养基中生长与野生株相似;氧化应激试验表明,经H2O2作用后,野生株存活率为97.12%,而ΔYED与ΔAHH则显著降低,分别为72.69%(P<0.05)和79.49%(P<0.05);小鼠巨噬细胞RAW264.7吞噬与存活试验表明,RAW264.7对野生株和2个缺失株的吞噬率无显著差异,但与野生株相比,2个缺失株在RAW264.7内的存活率均显著降低。本研究鉴定的与氧化应激相关的差异表达蛋白,有助于揭示猪链球菌的抗氧化应激机制,其中YED和AHH与猪链球菌在吞噬细胞内存活相关,提示它们在猪链球菌致病过程中发挥作用。     

威信发现桫椤树群

当年红军长征经过的云南省威信县,最近发现了罕见的大面积古生物“活化石”——桫椤树群。 1987年5月中旬,昭通地区行署林业局关宗福,冉启森等,在威信县     

嗜水气单胞菌重组β-hemA-ISCOMs对鳗鲡的浸泡免疫效果

嗜水气单胞菌重组β-hemA-ISCOMs对鳗鲡的浸泡免疫效果=Immune effects of the eel after immersed with ISCOMs containing recombinant β-hemA of Aeromonas hydrophila[刊，中]/吴宗福(福建省农业科学院生物技术研究所，福建 福州 350003)，龚晖，陈红燕，杨金先，刘晓东，林天龙//水产学报，－2007，31（3），－374～378 应用嗜水气单胞菌β-hemA重组菌表达产物作为抗原，制备成免疫刺激复合物（β-hemA-ISCOMs），通过浸泡途径免疫鳗鲡，测定免疫鱼细胞和抗体应答水平和免疫效力。试验结果表明：（1）β-hemA-ISCOMs在电镜下呈笼格状颗粒，直径约40 nm；（2）一免后第44天，β-hemA-ISCOMs免疫组淋巴细胞转化率显著高于非β-hemA-ISCOMs免疫组（P<0.05）；（3）免疫浓度在30～120 mg•L-1时，β-hemA-ISCOMs免疫组血清抗体效价与浓度正相关，且显著高于ISM1312佐剂组与无佐剂组（P<0.05）；（4）免疫浓度在30～120 mg•L-1时，β-hemA-ISCOMs免疫组存活率与免疫接种剂量正相关，在同等剂量下，β-hemA-ISCOMs免疫组的存活率高于其它组。因此β-hemA-ISCOMs浸泡免疫可诱导宿主产生细胞与抗体介导的免疫应答，产生保护性免疫，ISCOMs技术适用于制备浸泡型渔用疫苗。图3表4参13     

利用MS2识别序列标签纯化技术富集猪链球菌小RNA结合蛋白

为建立理想的猪链球菌RNA结合蛋白筛选方法,以该菌小RNA rss04和rss06为研究对象,通过纯化MS2序列识别蛋白MS2-MBP,构建表达MS2融合RNA(MS2-rss04与MS2-rss06)的质粒p SET2-MS2-rss04、pSET2-MS2-rss06及阴性对照质粒p SET2-MS2-negative,将上述质粒分别电转化至猪链球菌小RNA缺失株Δrss04、Δrss06及野生株P1/7,通过MS2识别序列标签纯化,收集洗脱液,提取RNA。结果显示:表达MS2融合RNA的样品,rss04和rss06分别富集16倍和110倍,而阴性对照组未检测到rss04和rss06的富集。结果表明:MS2识别序列纯化体系成功建立,可用于猪链球菌RNA结合蛋白的筛选,为深入研究猪链球菌小RNA功能提供技术平台。     

黄山市的水土流失及其防治对策

<正> 1991年7月2日、4日、7日三次连续特大暴雨,黄山市普遍遭受洪水灾害,给人民生命财产和国民经济造成6亿多元的经济损失,相当于全市全年国民经济总产值的40％,灾情是惨重的,教训是沉痛的。随着灾后反思的进一步深入,保护最基本的水土资源,改善生态环境的问题,已刻不容缓地被提了出来。现就黄山市的水土流失问题及其治理对策探讨如下。     

重庆屠宰场猪链球菌感染的调查

旨在调查2021年重庆地区屠宰场表观健康猪群中猪链球菌的血清型、耐药和毒力特征，为制定该地区猪链球菌病的防控策略提供参考。以2021年重庆地区屠宰场表观健康猪扁桃体样品为试验材料，分离猪链球菌并对菌株进行血清型分型、耐药基因检测、药敏试验、斑马鱼毒力试验，分析猪链球菌的流行特征。结果显示：2021年5—6月于重庆屠宰场共采集表观健康猪扁桃体154份，检出猪链球菌阳性样本80份(51.95%),从中分离到菌株87株；主要血清型分别为16型(16.09%,14/87)、9型(9.20%,8/87)、4型(8.05%,7/87),而血清2型检出率较低，占比4.60%(4/87)。分离株对林可酰胺类、四环素类、大环内酯类抗生素耐药率较高，分别为100%(87/87)、95.40%(83/87)、93.10%(81/87);对氨基糖苷类抗生素耐药率为59.77%(52/87);对利奈唑胺、β-内酰胺类、万古霉素、利福平的耐药率较低，分别为5.75%(5/87)、5.75%(5/87)、0(0/87)、0(0/87);96.55%(84株)的菌株对3类及以上的抗菌药耐药，属于多重耐药菌株。选取19...     

含嗜水气单胞菌气溶素的免疫刺激复合物的制备及其对欧洲鳗的免疫效果

将嗜水气单胞菌气溶素(AerA)基因定向连接到pET-32a(+)表达载体，转化大肠杆菌BL21（DE3），SDS-PAGE分析表明，硫氧还蛋白-气溶素融合蛋白（Trx-AerA）表达量占重组菌总蛋白量的65.5%。将上述融合蛋白与商品化的QuilA混合，分别添加Mega-10、卵磷脂、胆固醇获得Trx-AerA ISCO Ms。其中同时添加Mega-10、卵磷脂、胆固醇组蛋白质回收率最高为10.46%，仅添加QuilA组蛋白回收率为1.82%，两者差异显著（P＜0.05）。分别采用Trx-AerA、Trx-AerA ISCOMs、Trx ISCOMs经腹腔注射免疫欧洲鳗，免疫30d后，每个实验组取5尾实验鱼采集血清，按1：200稀释通过ELSIA法检测抗体水平，同时采用菌数为2.0×106CFU的嗜水气单胞菌ZN1株进行攻击，测定免疫效力。结果显示：Trx-AerA免疫组相对保护率为0%（3/15），Trx-AerA ISCOMs免疫组为83.3%（13/15），Trx ISCOMs免疫组为50%（9/15）； 3个免疫组针对气溶素的特异性抗体水平OD450值分别为0.19，0.52，0.36，Trx-AerA ISCOMs免疫组、Trx-AerA免疫组显著高于Trx ISCOMs免疫组（P＜0.05）。结果表明影响嗜水气单胞菌免疫效力的除了气溶素的抗体水平外，ISCOMs等也能够增强非特异性免疫保护应答。