6种草本药用植物种子超低温保存技术研究

以草本药用植物杜若、过江藤、夏枯草、皱果苋、罗勒和山香的成熟种子为材料,探讨了含水量和冷冻方法对种子超低温保存的影响。结果表明,经液氮超低温冷冻后,6种草本药用植物种子发芽率较对照组均有显著差异(p0.05);适宜的含水量下,种子经过超低温冷冻后其发芽率甚至高于对照组。3种冷冻方法中,玻璃化冷冻法更适合过江藤和山香种子的超低温保存,缓慢冷冻法更适合皱果苋、杜若和夏枯草种子的超低温保存,直接冷冻法适合于杜若和罗勒种子的超低温保存。所以,液氮超低温冷冻法保存杜若等6种草本药用植物种子是可行的;含水量对超低温保存前后夏枯草、山香和罗勒种子的发芽率影响显著。     

超低温对降香种子遗传变异和生理特性的影响

采用单因素随机区组试验方案探究降香种子玻璃化超低温保存最适条件,结合显微切片观察和生理生化特性检测对冷冻后细胞形态和生理生化指标变化进行分析,同时运用形态观察法和相关序列扩增多态性（SRAP）分子标记法对超低温保存后的降香植株遗传稳定性进行检测。结果表明：降香种子玻璃化超低温保存最佳条件为：室温（25 ℃）装载 25 min,0 ℃ 玻璃化脱水 30 min,40 ℃水浴解冻 5 min。对比检测不同冷冻时间的降香种子超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）、过氧化氢酶（CAT）、α-淀粉酶、脱氢酶活性、丙二醛（MDA）含量以及电导率等生理生化指标,无明显差异。显微观察超低温保存前后的降香种胚内部结构,未见明显变化。超低温保存后的降香种子发芽时,出现短暂的生长停滞期,恢复培养后,其表观形态指标与对照植株无明显差异。SRAP技术分析了超低温冷冻前后的降香再生植株,其 SRAP 带型基本一致,未见明显差异带型。综上表明,超低温保存降香种子是长期稳定、安全可靠的。     

莪术茎尖玻璃化法超低温保存技术

为莪术种质资源稳定保存提供一条新途径。以莪术组培苗茎尖为试材,用玻璃化法进行超低温保存后,于25℃用0.1%TTC溶液培养24 h后检测生活力。结果表明,切取2~3 mm长、继代培养60 d的莪术组培苗茎尖,避光条件下,用含0.3 mol/L蔗糖的MS固体培养基预培养7 d,室温下,茎尖用60%的PVS2装载液装载10 min,0℃用100%的PVS2玻璃化保护液对茎尖脱水处理30 min,快速投入液氮中进行超低温保存16 h;取出茎尖于40℃水浴中解冻2 min,室温下用US溶液洗涤20 min,立即用0.1%TTC溶液于25℃人工气候培养箱中培养24 h,莪术茎尖的生活力最高可达100%。表明该方法可用于莪术种质资源的保存。     

肉豆蔻种子超低温保存技术及生理生化活性研究

［目的］研究旨在探索肉豆蔻种子超低温保存方法,并检测超低温保存对肉豆蔻种子生理生化指标的影响。［方法］ 以肉豆蔻新鲜种子为材料,分别用玻璃化法、缓慢冷冻法和直接冷冻法进行超低温保存,并测定超低温保存后生活力,对生活力最高的一组超低温保存方法保存的肉豆蔻种子进行生理生化活性测定。［结果］试验结果显示,肉豆蔻种子含水量在24.44%时,用玻璃化冷冻法和缓慢冷冻法进行超低温保存生活力分别为50.00%和46.05%,且随着含水量的增加而减少。用直接冷冻法进行超低温保存时,肉豆蔻种子生活力随着含水量的增加先增加后减少,其中含水量为27.15%时,生活力最高为62.68%。直接冷冻法超低温保存前后肉豆蔻种子浸出液电导率、超氧化物歧化酶活性和过氧化氢酶活性差异不显著,丙二醛含量降低,过氧化物酶活性和α-淀粉酶活性增高。［结论］试验表明,用液氮进行超低温保存肉豆蔻的种子是可行的。     

5种紫金牛属植物种子形态及显微鉴别研究

旨在鉴别硃砂根、矮紫金牛、东方紫金牛、铜盆花、密鳞紫金牛5种紫金牛属植物成熟种子的异同,为紫金牛属植物物种鉴别提供参考依据。以5种紫金牛属植物种子为试验材料,使用体视显微镜及石蜡切片技术对种子的形态、微性状及种子胚细胞的排列方式进行鉴别研究。结果表明,硃砂根种子外种皮棕色圆滑,胚乳外表面光滑;矮紫金牛种子外种皮纹路密集,有凹凸感,胚乳外表面有金黄色粉末镶嵌;铜盆花种子外种皮颜色较浅,纹路较矮紫金牛种子稀疏,有凹凸感,胚乳外表面凹凸不平;东方紫金牛种子较小,纹路交汇处有明显凸起,胚乳外表面呈蜡样光泽,有金黄色粉末镶嵌;密鳞紫金牛种子外种皮呈红棕色,纹路密集且有薄膜连接,胚乳外表面轻微凹凸,可看到褐色条纹;5种紫金牛属植物种子在外观性状上差异较小,而微形态和石蜡切片观察结果均显示出5种种子形态特征存在差异。本研究可为紫金牛属植物物种间鉴别提供依据,为紫金牛属植物进一步研究奠定基础。