3种筛选NPT-Ⅱ标记转基因油菜方法研究

为获得一种简便的筛选含有NPT-Ⅱ标记基因的转基因油菜种子的方法,对卡那霉素溶液叶片涂抹法、种子浸泡法以及卡那霉素MS培养基筛选3种方法进行研究.结果表明,3种筛选方法的最佳卡那霉素选择压为200 mg/L;涂抹叶片法4～5天可以明显识别植株对卡那霉素抗性与否,此法筛选到的4株植株PCR检测全部呈阳性,可靠性达100%;浸泡种子法2～3天可以明显识别植株对卡那霉素抗性与否,此法筛选到的5株植株PCR检测全部呈阳性,可靠性100%;MS培养基筛选法一般10天可以明显识别植株对卡那霉素抗性与否,此法筛选到20株植株,移栽后存活5株,PCR检测3株呈阳性,2株是假阳性植株,可靠性为60%.因此,可以认为卡那霉素涂抹叶片和浸泡种子两种方法是转基因油菜进行大规模、快速的筛选及后代的遗传分析的理想方法.     

一种延长马铃薯脱毒试管苗使用年限的方法研究

[目的]介绍一种新的延长马铃薯脱毒试管苗使用年限的方法.[方法]以马铃薯为试验材料,研究通过剪取生长良好的脱毒试管苗顶端带芽茎段来延长试管苗使用年限的新方法,并同传统茎尖脱毒培养的试管苗在成苗时间、移栽成活率和结薯率上进行了比较.[结果]新的方法免去了传统的每年剥茎尖更换脱毒苗的环节,并使脱毒苗的使用年限增加到3～5年;该方法在成苗时间上较常规茎尖脱毒方法提前50 d,成苗率提高25％,且试验苗长势良好;与传统茎尖脱毒繁殖2年的试管苗比较,该方法得到的试管苗移栽成活率提高5个百分点,结薯率提高20％以上.该方法培养的马铃薯脱毒试管苗成苗时间快,成苗率高,且能有效延长试管苗的使用年限和降低生产成本.[结论]为马铃薯试管苗的规模化生产提供了新的思路,是一种值得借鉴和参考的新方法.     

3种筛选NPT-Ⅱ标记转基因油菜方法研究

利用卡那霉素溶液叶片涂抹法、种子浸泡法以及卡那霉素MS培养基筛选法三种方法对含有NPT-Ⅱ标记基因的转基因油菜种子（T0）进行筛选。结果表明,三种筛选方法的最佳卡那霉素选择压为200mg/L;涂抹叶片法4-5d可以明显识别植株对卡那霉素抗性与否,此法筛选到的4株植株PCR检测全部呈阳性,可靠性达100%;浸泡种子法2-3d可以明显识别植株对卡那霉素抗性与否,此法筛选到的5株植株PCR检测全部呈阳性,可靠性100%;MS培养基筛选法一般10d可以明显植株识别对卡那霉素抗性与否,此法筛选到20株植株,移栽后存活5株,PCR检测3株呈阳性,2株是假阳性植株,可靠性为60%。因此可以认为卡那霉素涂抹叶片和浸泡种子两种方法是转基因油菜进行大规模、快速的筛选及后代的遗传分析的理想方法。     

四川地区影响脱毒马铃薯原原种单株产量因素研究

为了提高马铃薯原原种单株产量,降低原原种生产成本,实现工厂化生产,就栽种密度、栽种时间、苗源3个主要因素对原原种单株产量进行研究。结果表明：不同扦插密度对原原种单株产量影响很大,方差分析结果达极显著,栽种密度为400苗/m2时单株产量最高,平均达到2.5粒,栽种密度过低或过高单株产量都会明显降低。不同栽种时间对原原种单株产量的影响也很大,四川地区最适栽种时间为3月15日至4月1日,过早或过迟栽种单株产量都会降低。试管苗和扦插苗的原原种单株产量相当,试管薯效果最好,平均单株产量达到3.5粒。大规模生产脱毒马铃薯原原种企业综合使用合适的栽种密度,掌握栽种时间,使用适当的苗源,是提高原原种总产量的基础。     

甘蓝型油菜正季与反季材料小孢子的培养

本文以甘蓝型油菜Westar的F1代为供试材料,通过对8个正季和同样的8个反季材料进行小孢子培养对比实验。结果表明,相同材料（基因型）正季能获得胚状体的反季一样能获得胚状体,但是相同材料的出胚数反季要比正季少50%,并且出胚时间要晚5～8d。正季与反季材料的成苗百分率相同,平均达到93%,加倍率基本一样,达到80%。由此可见,用反季节材料培养小孢子同样能获得成功,对特殊材料可以利用此法进一步加速育种进程。     

云南地方品种小黄姜快繁技术研究

建立云南地方品种生姜快繁体系,为姜种的快速繁殖提供技术保障,同时为生产应用提供技术支撑.以云南文山地方品种小黄姜为实验材料,研究其组培快繁技术.结果表明:最佳消毒方式是75％酒精消毒20 s+2％次氯酸钠消毒15 min+无菌水清洗3次;最佳诱导培养基是MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+琼脂7...     

表面活性剂silwet-77对floral-dip转化甘蓝型油菜效果的影响

利用表面活性剂silwet-77辅助渗透进行floral-dip转化甘蓝型油菜的结果表明,0．1％以上的高浓度表面活性剂silwet-77处理对植株的结实率存在明显的抑制作用,且转化不稳定。0．05％浓度的silwet-77处理获得的转化率较高,未用silwet-77处理的转化频率明显下降。同一浓度的表面活性剂处理下,6d内每隔1d进行连续3次浸渍处理转化频率优于1、2次处理。对13170粒T1代种子进行Km抗性筛选获得了103株抗性植株,对抗性植株进行GUS组织化学检测表明,目的基因已经导入到甘蓝型油菜中,抗性植株进一步的分子检测和田间性状鉴定正在进行中。     

农杆菌介导floral - dip转基因方法研究进展

农杆菌介导的floral - dip转基因方法是近年发展起来的一种简便、快速、高效、重复性好、稳定性高的非 组织培养转基因方法。介绍了该方法的发展、转化原理、转化条件、后代遗传学分析,并讨论了其存在的问题,展望 了其在基因工程中的应用前景。     

三种不同苗源生产脱毒马铃薯原原种产量比较试验

对3种不同苗源（试管薯、试管苗、扦插苗）生产脱毒马铃薯原原种的产量进行对比试验,结果表明：（1）在常规栽种季节（四川地区春季为3月20日~4月20日,秋季为8月25日~9月25日）的条件下,试管薯生产原原种的产量最高,每株平均为3.5粒,试管苗与扦插苗产量相当,每株平均为2.8粒;（2）在延迟栽种的情况下,其产量高低为试管薯〉试管苗〉扦插苗,试管薯每株平均为1.9粒,试管苗为2.0粒,扦插苗为1.8粒;（3）方差分析表明,常规栽种季节试管薯与试管苗和扦插苗的产量分别达显著水平,延迟栽种条件下3者产量均未达显著水平。因此,大规模生产脱毒马铃薯原原种企业在常规栽种季节建议使用试管薯苗源,而延迟栽种的情况下建议大量使用扦插苗进行生产。     

珍贵野禽绿头鸭的养殖技术

本文以重瓣大岩桐叶片(带叶柄)作为外植体,分别对外植体的选择和消毒、愈伤组织的诱导、丛生芽的增殖、生根条件和移栽进行了初步研究。现将实验结果如实报道,外植体消毒最佳方案为:0.1%HgCl2(10min)最适宜的愈伤组织诱导培养基为MS BA2.0 mg/L NAA0.2 mg/L 3%蔗糖 0.7%琼脂,诱导率为90.32%;最佳增殖培养基为MS BA0.5 mg/L 3%蔗糖 0.7%琼脂;最佳生根培养基为1/2MS NAA0.1 mg/L 2%蔗糖 0.7%琼脂,生根率为83.3%。