嗜吞噬细胞无浆体SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法的建立及应用

为建立荧光定量PCR方法检测嗜吞噬细胞无浆体(Anaplasma phagocytophilum),针对GenBank A.phagocytophilum 16S rRNA基因保守序列(JN558815),设计1对引物1-25F/183-205R。以已知引物EE1/EE2和该引物进行巢式PCR扩增出预期大小片段(205bp),构建含有16S rRNA基因的重组质粒,以质粒为模板构建了标准曲线。以1-25F/183-205R为荧光定量PCR引物,建立A.phagocytophilum荧光定量PCR检测方法,并进行特异性、敏感性、重复性试验和临床样本检测。结果表明,该方法在6.4×10~3~6.4×10~8 copies/μL相关系数为0.99,显示出良好的线性关系;所建方法能特异地检出A.phagocytophilum,对绵羊无浆体、牛无浆体和环形泰勒虫基因组DNA和灭菌双蒸水均无交叉反应;可检测到6.4×10~2 copies/μL的标准质粒DNA,比常规PCR敏感性高100倍;批内及批间变异系数均低于2.0%,具有较高的重复性和稳定性;利用该方法对30份羊血液临床样品检出率比巢式PCR高16.67%。该研究为A.phagocytophilum临床检测和定量分析病原感染程度奠定理论基础。     

河南省规模化兔场兔贾第虫感染情况调查

为了解河南省规模化兔场兔贾第虫感染情况及评价其公共卫生意义,采用卢戈氏碘液染色法对河南省6个地区9个规模化兔场共1 027份粪便样品进行检查,发现贾第虫感染率为7.8%,其中3～7月龄兔贾第虫感染率最高,为11.2%;不同品种兔感染情况存在一定差异,以肉兔感染率最高,为11.3%。调查结果表明,河南省规模化兔场兔贾第虫感染较为普遍,应加强其综合管理和人兽共患防控措施。     

兔球虫病流行病学及其防治

<正>球虫病是家兔最常见且危害最严重的疾病之一,严重制约着养兔业的发展。兔球虫病是由艾美耳属(Eimeria)或等孢属(Isospora)的球虫寄生于兔的小肠或胆管上皮细胞内所引起的一种原虫病,给养兔生产造成很大的损失,是养兔生产中长期存在的一个难题[1]。各品种的家兔均易感染,1~3月龄幼兔最易感染,且感染后发病时间长,难控制。据聂奎等[2]报道,幼兔的球虫感染率为90%,死亡率为60%。耐过球虫病未死亡的,或经治愈的家兔成为长期带虫者,并成为该病的传染     

河南省部分地区仔猪球虫流行病学调查

应用饱和糖水漂浮法分别对河南省鹤壁、许昌、洛阳等地的3个种猪场、1个养猪专业户和一些散养户进行了仔猪球虫感染情况的调查。感染率分别为5．6％、15％、6．25％、5．36％、21．4％，平均感染率为8．78％。在上述所调查猪场中，仔猪球虫感染均为阳性。感染日龄主要集中在11～20日龄，感染率最高达33．3％，其次在1～10日龄，感染率为20％。主要球虫种类为猪等孢球虫(isospora suis)，其次为艾美耳属球虫，仔猪球虫感染在所调查地区具有普遍性。     

鹌鹑源火鸡隐孢子虫在小白鼠和雏鸡体内内生发育阶段的超微结构比较

用鹌鹑源火鸡隐孢子虫（Cryptos poridium meleagridis）卵囊分别感染昆明系小白鼠和固始雏鸡，用透射电镜和扫描电镜观察比较了C．meleagridis在两种试验动物体内的内生发育虫体超微结构和致病性的差异。利用扫描电镜观察发现，鹌鹑源火鸡隐孢子虫（C.meleagridis）在小白鼠和雏鸡体内的寄生部位有较大差异，在小白鼠体内寄生于十二指肠，但在雏鸡体内主要寄生于回肠；C．meleagridis深嵌于小白鼠肠微绒毛丛内，微绒毛较为完整；但在雏鸡回肠，C．meleagridis似黏附在肠黏膜表面，微绒毛脱落明显，对雏鸡致病性明显比对小白鼠的致病性强。利用透射电镜在两种试验动物的样品中均观察到不同发育阶段的滋养体、裂殖体和大配子体以及正在孢子化的卵囊。滋养体和裂殖体在发育过程中可明显见到粗面内质网结构，裂殖生殖中期阶段粗面内质网尤其发达；小白鼠体内的C．meleagridis虫体与肠黏膜接触处形成一凹陷，寄生部位较深，而在雏鸡体内无此现象。此外，利用透射和扫描电镜均观察到虫体寄生部位周围微绒毛密度高而且也比其它部位长。形成这些差异的原因有待于进一步探讨。     

鸡寄生虫病及其防治对策

1原虫病1.1球虫病球虫病是危害禽类的寄生虫病之一,流行范围广、传播速度快、死亡率高,各种禽类对球虫都有易感性,对养禽业构成很大威胁。据调查,河南地区鸡群的球虫感染率平均为60%左右,其中集约化鸡场的球虫感染率达到80%。     

猪囊尾蚴特异性单克隆抗体的制备及其识别抗原成分的鉴定

通过SDS-PAGE方法对猪囊尾蚴囊液抗原成分进行了分离鉴定,并分别分离纯化了其中的16 000和10 000特异性蛋白质成分;将16 000和10 000纯化蛋白质成分分别做成佛氏佐剂苗,分组免疫BALB/c小鼠,超免后,无菌取脾脏制备脾细胞,分别与NS0骨髓瘤细胞进行融合,经阳性筛选和特异性鉴定获得2株分泌猪囊尾蚴特异性单抗的杂交瘤细胞,命名为TSCF-1611H12B8和TSCF-1012G5B5。免疫学鉴定结果表明,单抗TSCF-1611H12B8和TSCF-1012G5B5与猪细颈囊尾蚴、旋毛虫、住肉孢子虫和蛔虫抗原间不存在交叉反应;单抗TSCF-1611H12B8识别囊液中16 000和10 000蛋白质抗原条带,而单抗TSCF-1012G5B5识别囊液中的10 000蛋白质条带。     

某种猪场猪疥螨感染情况调查及治疗试验

采用显微镜直接检查法和虫体浓集法,对河南某种猪场的保育猪、育肥猪和种母猪疥螨感染情况进行了调查,结果其感染率分别为55.0%、67.2%和40.0%,平均感染率为58.82%。分别应用1%伊力佳、阿力佳注射剂按0.3 m g/kg体重1次皮下注射,或预混剂按1.5 kg/t料混饲连喂1周或2周、或按2 kg/t料混饲连喂1周对疥螨病猪进行治疗,用药后15 d,螨虫转阴率均达100%,平均病变记分减少率为84.83%(81.6%~88.4%),表明上述2种药物不同剂型和用法、用量对猪疥螨病均具有良好疗效。建议规模化猪场使用1%阿力佳预混剂,按1.5 kg/t料,混饲连喂1~2周防治猪疥螨病。     

脑囊虫病抗体检测方法研究进展

囊虫病是由猪带绦虫幼虫——猪囊虫引起的一种重要的人畜共患病。猪囊虫可寄生于猪、野猪、人、骆驼、猫等动物的肌肉、大脑、皮下和眼部等多个器官等,能引起不同程度的发病。仔猪患该病后发育不良,肉品质下降。人感染囊虫会引起不同部位的病变,其中最为严重的是脑囊虫病,它主要是由于人摄入猪带绦虫虫卵或猪带绦     

猪囊尾蚴循环抗原和排泄分泌抗原研究进展

猪囊尾蚴病是由带科(Taeniidae)带属(Taenia)的猪带绦虫(有钩绦虫)(Taenia solium)的幼虫-猪囊尾蚴(Cysticercus cellulosae)寄生于猪的肌肉和其他器官中而引起的一种人畜共患寄生虫病,俗称囊虫病。该病主