胡葱黄条病毒吉林毛葱分离物全基因组序列测定与分析

使用RT-PCR方法从吉林省疑似感染胡葱黄条病毒(Shallot yellow stripe virus,SYSV)的分蘖洋葱(毛葱)叶片中获得了SYSV吉林毛葱分离物SYSV-JL(MN607702)的全基因组序列。SYSV-JL的全长序列为10?427 nt,与GenBank已登录的3条SYSV全长或近全长序列在多个基因上保持着较高的序列一致性,但在P1基因上核苷酸和氨基酸序列一致性较低,分别为69.5%～84.2%和60.9%～76.9%,进一步通过变异分析发现,P1基因包含369个变异位点,表现出较为明显的高变异特征。系统发育分析显示,不同SYSV分离物具有较为明显的地区差异,SYSV-JL分离物与多个中国分离物系统发育关系较近。     

大豆花叶病毒间接ELISA检测方法的建立及应用

为快速有效地检测大豆花叶病毒(Soybean Mosaic Virus,SMV),本研究利用已制备的大豆花叶病毒衣壳蛋白(Coat Protein,CP)及其单克隆抗体,通过优化ELISA条件为:检测材料抗原包被酶标板37℃1 h,检测抗体工作浓度125 ng/mL,孵育60 min,酶标抗体工作浓度100 ng/mL,孵育30 min;SMV CP蛋白最低检测限为3.23 ng/mL;该方法重复性变异系数小于3%,重复性良好;运用上述检测条件与RTPCR检测方法对田间样品进行随机检测,结果显示一致率高达94%。SMV间接ELISA检测方法的成功建立,为SMV快速检测试剂盒及试纸条的研发奠定了基础。     

吉林、黑龙江部分地区毛葱OYDV感染情况调查

本研究运用ELISA检测方法对吉林、黑龙江多个毛葱种植地区(柴岗、杨树林、哈拉海、前岗乡、三清山、太平山镇、肇州和阿城)的洋葱黄矮病毒(OYDV)感染情况进行了系统的调查。结果表明:八个地区中,OYDV感染情况都比较严重,整体检出率在30%以上,吉林太平山镇OYDV感染率最高,为75%,说明OYDV感染在东北毛葱种植区普遍存在;目测结果与ELISA检测结果符合率的分析发现,柴岗和肇州目测为健康的植株与OYDV-ELISA检测结果的符合率最高,为90%,哈拉海最低,只有10%,说明哈拉海地区种植的毛葱中有OYDV弱毒株感染而植株不显症现象;太平山镇和哈拉海目测为感病的植株与OYDVELISA检测结果阳性的符合率为100%。阳性植株鳞茎中OYDV分布情况为:外层和内层OYDV检出率低,中层检出率高。本研究明确了不同地区毛葱OYDV感染情况及OYDV在鳞茎中的分布,为毛葱的脱毒繁育奠定了理论基础。     

基于全基因序列的中国北方3省(区)马铃薯Y病毒遗传多样性分析

本研究以马铃薯Y病毒(PVY)全基因组为基础,分析吉林、黑龙江和内蒙古3省(区)PVY群体遗传多样性和群体分化,并评估突变、重组、选择等遗传力所起的作用。根据已报道的PVY全基因序列保守区设计4对引物,采用片段重叠法对来自内蒙古和吉林的24个PVY分离物全基因序列进行测定,并联合NCBI中已登录的9个黑龙江分离物全基因组序列进行遗传多样性参数评估、群体分化检验和分子变异等分析。结果显示,我国北方3省(区)PVY群体遗传多样性高,其中内蒙古和黑龙江PVY群体遗传多样性高于吉林群体,并且3个群体之间呈现一定程度的遗传分化。分子变异分析发现在PVY基因组中存在1 786个变异位点,表明我国北方3省(区)PVY群体变异程度较高,并且这种高变异度有85.54%来自各个马铃薯种植区内PVY个体的遗传变异。重组分析和系统发育分析发现,我国北方3省(区)PVY群体中重组株系占比高达90.3%,并具有明显的株系多样性,表明PVY重组株系已成为我国北方3省(区)马铃薯种植区的流行株系。选择压力分析显示,使用FEL和IFEL法分别检测出501个和315个净化压力选择位点,这表明3省(区)PVY群体受净化选择压力为主。以上结果表明,中国北方3省(区)PVY群体遗传多样性高,突变、重组和自然选择都对遗传多样性和群体分化存在一定影响。     

巧取断裂的东方红履带拖拉机驱动轮螺栓头

东方红履带式拖拉机，它的两侧边减壳各有八颗螺栓，其作用是连接驱动轮和大减速齿轮及驱动轮毂，并向外传送动力，承受着极大的扭矩和剪切力，所以驱动轮螺栓它具有一定的硬度，它和大减速齿轮之间的配合是过盈配合，由于装配时采用方法不合理，导致螺栓头与螺杆结合处裂纹，但内眼又觉察不到。此时拖拉机在工作过程中螺栓受力，螺栓头部就会断裂掉在边减壳里，如不及时取出，造成的后果是非常严重的。比如：工作时通过润滑油将断裂的螺栓头部带到大小减速齿中间夹住，导致打齿、边减壳破裂乃至后桥壳裂纹，所带来的经济损失非常严重。通常…     

利用牛粪生产生物有机肥的试验研究

<正>长期使用化肥会造成土壤板结、地力下降、农作物减产等弊端,更可怕地是会给食品安全带来不利影响。为此,专家们迫切呼吁减少化肥使用量,多使用新型生物肥,多施有机肥;广大农民也迫切需要一种新型肥料来满足农业生产的需要。因此,开发利用畜禽粪便既能变废为宝,减少环境污染,又具有较高的社会效益和一定的经济效益,是创造节约型社会、促进农业可持续发展的必然要求。针对上述因素,以奶牛     

黏虫丝氨酸蛋白酶抑制剂基因的克隆及抗球孢白僵菌功能分析

为探究丝氨酸蛋白酶抑制剂（serine protease inhibitor,Serpin）基因在黏虫Mythimna separata生长发育及免疫防御等过程中发挥的作用,在黏虫转录组中获得Serpin基因的cDNA序列,采用实时荧光定量PCR技术分析Serpin在黏虫不同发育阶段和不同组织中的表达水平,并通过RNA干扰技术分析Serpin在黏虫抗球孢白僵菌Beauveria bassiana过程中发挥的作用。结果显示,获得2个黏虫Serpin基因,命名为MsSerpin-4和Mserpin-5,其cDNA全长序列分别为1 938 bp和2 618 bp,开放阅读框分别为1 188 bp和1 197 bp,分别编码395个和398个氨基酸,GenBank登录号分别为MZ577062和MZ577063。2个基因在黏虫不同龄期和不同组织内均有表达,在成虫期的相对表达量最高,在1龄幼虫期的相对表达量最低;在中肠中的相对表达量最高,在唾腺中的相对表达量最低。RNA干扰6 h时对MsSerpin-4和Mserpin-5表达的抑制效果最好,抑制率分别为52.57%和49.15%;MsSerpin-4和Mserpin-5的表达被抑制后,黏虫对球孢白僵菌更敏感,校正死亡率分别提高了31.47%和14.62%。表明黏虫2个MsSerpin均参与了被球孢白僵菌侵染后的免疫反应,可为后续黏虫的生物防治提供新靶标。     

黑穗醋栗品种亲缘关系的ISSR分析

 采用ISSR标记技术对39个黑穗醋栗品种的亲缘关系进行分析。结果表明：13条ISSR引物扩增的总带数（A）从3到11条不等,平均扩增出6.77条带,平均多态性带百分比（P）为64.37%。聚类分析显示,在相似性系数为0.8496处将39个黑穗醋栗品种分为5组。第Ⅰ组包含8个起源国家的品种,说明世界各国之间基因交流较为频繁。‘Ben Lomond’和‘Kantata’同其他品种的遗传距离较远,两者又有诸多优良农艺性状,可作为黑穗醋栗的优良育种材料。     

新疆野苹果群体遗传结构和遗传多样性的SRAP分析

 采用SRAP标记，对中国新疆野苹果4个种下居群的群体遗传结构和遗传多样性进行了研究。结果表明：10对SRAP引物总共扩增了209条带，其中206条是多态性带（98.56%）。巩留群体、新源群体、霍城群体和裕民群体分别扩增了180、169、178和165条多态性带，巩留群体的随机交配杂合度（hs = 0.3037 ± 0.0058）最高，其次为霍城群体。UPGMA聚类分析和群体间遗传分化系数显示，巩留群体和新源群体之间，以及霍城群体和裕民群体之间，遗传关系最近，群体间遗传变异最低。新疆野苹果群体内遗传变异高于群体间，占总变异的87.9%，主坐标轴分析显示4个群体是相对独立，其中巩留群体和新源群体，霍城群体和裕民群体之间，有较高的基因交流。所有参数分析表明，巩留群体遗传多样性最丰富，故在制定新疆野苹果原地和异地种质保护计划时应优先考虑巩留群体。