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基于Golden Gate载体构建过程,对CRISPR/Cas9双靶点敲除技术的载体构建系统进行了优化,建立了一种简单快速高效且无PCR扩增的双靶点CRISPR/Cas9载体构建方法。在本方法中,只需将设计好的2个靶点DNA小片段和1个外源片段用T4DNA连接酶构建到CRISPR/Cas9载体上即可。用本方法对10个已报道的水稻基因构建了20个双靶点CRISPR/Cas9载体,阳性率为100%,测序结果显示无突变。该载体系统非常适合大批量CRISPR/Cas9载体的构建,同时也为其他植物中构建双靶点CRISPR/Cas9载体提供借鉴。 相似文献
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无患子种子不同处理方法育苗试验 总被引：1，自引：0，他引：1
研究了几种不同的处理方法对无患子种子发芽势及成苗率的影响及不同育苗密度对无患子秧苗质量的影响初步试验.结果表明,湿沙层积+40％H2SO4处理的无患子种子的发芽势和成苗率都最高,分别为30.3％、50.7％.成苗率比冬播、湿沙层积、湿沙层积+清水3种处理均高出约20百分点;无患子苗木最适合的密度为23株/m2. 相似文献
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