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1.
克隆、序列分析及原核表达鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP2基因。根据GenBank已登录的IB-DV VP2基因序列,设计合成一对VP2基因特异性引物,应用RT-PCR技术从陕西省某鸡场分离的IBDV毒株中克隆VP2基因并进行序列分析。再将VP2基因亚克隆于原核表达载体pET-32a中,构建重组质粒pET-32a-VP2,经鉴定正确后转化大肠杆菌BL21菌株进行诱导表达,并进行SDS-PAGE检测。成功克隆IBDVYL毒株VP2全基因序列,核苷酸和氨基酸序列分析表明,YL株为IBDV超强毒株。经IPTG诱导后,SDS-PAGE分析,在宿主菌BL21中成功表达约为53 ku的VP2蛋白。IBDV VP2基因克隆表达成功,为IBDV的分子生物学特性研究提供资料,其表达产物为进一步制备抗IBDV单克隆抗体奠定了基础。  相似文献   
2.
对临床分离产ESBLs的禽源大肠埃希氏杆菌进行了体外抑菌试验,并利用分光光度法进行了酶动力学及酶抑制剂抑酶效应的研究.结果表明,头孢噻呋(CTF)对ESBLs的M IC值>128 mg.L-1,与舒巴坦(SBT)联用(m∶m=2∶1)后平均值降为12.7 mg.L-1,与硫酸黄连素(BBR)联用(m∶m=1∶1 000)后降为16 mg.L-1.SBT和BBR都可以降低ESBLs对CTF的水解;CTF与SBT不同配比(m∶m=2∶1,4∶1)对CTF的抑酶保护率平均值分别为94.4,93.0%,CTF与BBR配比(m∶m=1∶10)抑酶保护率平均值为90.8%;酶动力学方面,SBT,BBR与CTF配比的Km值有明显的升高,即酶与CTF的亲和力变小,Vm ax并没有明显的降低,Vm ax/Km(有效水解率)有明显的降低(P<0.05),CTF与SBT不同配比(m∶m=2∶1,4∶1)的Vm ax/Km(平均值)降为5.6,5.0 s-1,CTF与BBR配比(m∶m=1∶10)降为8.4 s-1,说明CTF与SBT不同配比(m∶m=2∶1,4∶1)间的抑酶效果没有明显差异(P>0.05),但BBR的抑酶效果低于SBT.  相似文献   
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