狂犬疫苗壳聚糖微球制备及细胞免疫特性研究

通过喷雾干燥法制备狂犬疫苗壳聚糖微球冻干粉,以微球吸附疫苗原液的吸附率为主要评价指标,运用均匀设计试验确定制备微球的最佳处方并对最佳处方得到的微球进行粒度分布、吸附率及免疫原性考查;用狂犬疫苗壳聚糖微球、狂犬疫苗脂质体、空白壳聚糖微球和生理盐水分别免疫小鼠,通过脾淋巴细胞增殖试验检测脾淋巴细胞增殖能力。结果表明:采用优化工艺制备的狂犬疫苗壳聚糖微球冻干粉复溶后于显微镜下观察呈圆形或近似球形,分散性好,粒度分布均匀,平均粒径为4.71μm,吸附率为74.21%;在小鼠免疫第7天时狂犬疫苗壳聚糖微球组和狂犬疫苗脂质体组产生的脾淋巴细胞增殖水平(SI值)无显著差异,分别与空白微球组和生理盐水组比较均有极显著差异,说明壳聚糖微球作为疫苗佐剂也可增强机体的细胞免疫。     

PEG3000修饰的脂质体作为流感疫苗佐剂的研究

采用冻融-冻干法制备目标产品,用MTT法以刺激指数作为主要评价指标,通过单因素方差分析确定最佳处方;最佳处方制备的目标产品,通过腹腔免疫小鼠7、14和28 d后,用MTT法和表面标记法以刺激指数和CD4+/CD8+比值为评价指标进行细胞免疫原性研究;用微量血凝抑制法以抗体滴度比为评价指标检测体液免疫原性,探讨聚乙二醇(PEG)3000修饰的脂质体作为流感疫苗佐剂的最佳制备工艺和免疫原性。结果表明:PEG3000占卵磷脂的摩尔百分比为4%时,脂质体成膜后加入PEG3000制备的流感疫苗脂质体冻干粉为最佳处方;在1个免疫周期中, PEG3000修饰的流感疫苗脂质体组和其他组有显著差异(P0.05)。这说明最佳处方制备的PEG3000修饰流感疫苗脂质体免疫原性增强且免疫时效延长。     

流感疫苗类脂质体制备及稳定性研究

用薄膜分散法制备流感疫苗类脂质体混悬液,采用正交设计法优化制备工艺,其最佳制备条件为脂质与疫苗体积比1.5∶1、脂质液浓度1∶60、温度40℃、水合介质30 mL。结果表明:以优选的最佳工艺制备的类脂质体包封率高于65%、颗粒大小均匀、形态呈球形和椭圆形,且重现性较好;(25±2)℃储存7 d基本稳定。说明正交设计法优化制备的类脂质体包封率较高、常温下稳定性好,有望减轻冷链运输的压力。