浅谈动物基因工程疫苗的研究进展及现状

疫苗免疫接种是预防动物传染性疾病有效而实用的一种方法,在畜牧生产中发挥的重要作用。尤其是随着分子生物学及重组DNA技术研究的迅猛发展,基因工程疫苗的出现,更展示了动物疫苗在疾病控制上的巨大潜力。本文阐述了基因工程疫苗的研究进展情况,并指出未来疫苗研究发展的趋势。     

K88菌毛及其蛋白亚基FaeG在防治仔猪腹泻中的应用性研究进展

肠毒素大肠杆菌(Enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)是引起仔猪腹泻的重要病原之一,其致病性主要与菌毛粘附素及其产生的肠毒素有关。ETEC依靠菌毛粘附素与小肠粘膜上皮细胞上的受体特异性结合,这种粘附作用可以使ETEC抵抗肠道蠕动的冲刷作用而定植,并大量繁殖。ETEC在生长过程中,产生大量的肠毒素并不断释放到肠道内,造成肠道内水和电解质比例失衡,从而引起腹泻。不同肠毒性大肠杆菌(ETEC)菌株的菌毛抗原类型不同,主要有K88、K99、987P及F41,其中以K88的流行最为普遍,因而亦尤为重要。1K88粘附素菌毛,又称纤毛或柔毛,由菌…     

PEG胁迫下褪黑素对生菜幼苗形态和生理特性的影响

以‘奥跃生菜’为试材,采用盆栽法,设置正常浇灌营养液（对照,CK）、根系浇灌含有100μmol·L^-1褪黑素的营养液（MT）、根系浇灌含有25%PEG的营养液（D）和25%PEG的营养液+根系浇灌含有100μmol·L^-1褪黑素的营养液（D+MT）4个处理,研究了PEG胁迫下褪黑素对生菜幼苗生长和生理特性的影响,以期为褪黑素在生菜中抗旱栽培的应用提供参考依据。结果表明：干旱胁迫下根施褪黑素生菜幼苗总根长、根体积、根表面积、根平均直径、地上地下部分干质量、根冠比、叶绿素相对含量显著增加（P<0.05）,叶片相对含水量也呈增加趋势,但差异不显著;同时干旱胁迫下褪黑素增加了生菜叶片实际光化学效率和光化学淬灭系数,降低了叶片PSⅡ的非光化学淬灭系数;除根系过氧化物酶（POD）活性外,干旱胁迫下根施褪黑素幼苗叶片和根系超氧化物歧化酶（SOD）活性、POD活性、可溶性蛋白质含量均升高;而丙二醛（MDA）含量下降;其中SOD活性差异在叶片和根系中均达显著水平（P<0.05）。因此,根施100μmol·L^-1褪黑素能够通过调...     

小花棘豆解毒剂对小白鼠的急性毒性试验

试验通过动物急性毒性试验观察解毒剂1号和解毒剂2号的毒性反应,预测2种药品的安全剂量范围,为临床研究提供参考信息.该试验主要分为预试验和正式试验两部分.通过预试验得出解毒剂1号的安全剂量为3 000mg/(kg·bw),解毒剂2号的安全剂量为200mg/(kg·bw).经正式试验,在以上2种剂量下解毒剂1号组和解毒剂2号组的小鼠均未出现临床症状和死亡,证明以上2种剂量为安全剂量.     

不同铵硝比对高山杜鹃侧枝生长和生理特性影响

为探究氮素形态对高山杜鹃侧枝生长的影响,以3年生盆栽高山杜鹃粉精灵为试验材料,单一氮源处理为对照,采用盆栽方式,研究5种不同氮素形态配比供应（铵硝比例分别为T1:100∶0,T2:75∶25,T3:50∶50,T4:25∶75和T5:0∶100）对其营养生长期侧枝生长、光合特性、代谢酶活性及营养元素积累的影响。结果表明,不同氮素形态下粉精灵不同生长期侧枝干物质积累量、苗高增量和侧枝长度均有所差异,以侧芽萌发期T3处理侧枝干物质积累量最高,T2处理在嫩侧枝期、侧枝半木质化期的苗高增量和侧枝长度均显著高于其他处理。侧枝半木质化期,与T1处理相比,T2处理显著提高净光合速率、蒸腾速率、气孔导度、水分利用率及磷含量,降低胞间二氧化碳浓度;叶片Fe元素吸收量以T1处理最高,Mg元素吸收量以T5处理最高。此外,在不同生长期,硝酸还原酶活性均随硝态氮含量的增加而增加,以嫩侧枝期酶活性最高。综上,不同氮素形态对高山杜鹃粉精灵侧枝生长和生理特性的影响有所差异,且混合氮源处理较单一氮源处理更有利于促进侧枝生长,以铵硝比例75∶25促进侧枝生长及提高养分积累和光合效能效果最好。本研究为筛选适合高山杜鹃生长发...     

基于改进HRNet的单幅图像苹果果树深度估计方法

针对苹果自动采收获取果树深度信息的实际需求,以及目前单幅图像深度估计算法存在的空间分辨率低和边缘模糊问题,提出一种基于改进高分辨率网络（High-Resoultion Net, HRNet）的单幅图像苹果果树深度估计模型。首先基于HRNet构建多分支并行的编码器网络,提取多尺度特征,并通过引入密集连接机制强化特征传递过程中的连续性;为了减少冗余特征造成的噪声干扰,使用卷积注意力模块在通道及像素层级对融合特征进行重标定,强化特征图结构信息。在解码器网络中,使用条纹细化模块自适应地优化特征图的边界细节信息,突出边缘特征,改善边缘模糊问题,最后经上采样生成深度图。在NYU Depth V2公共数据集和果园深度数据集上进行试验。试验结果表明,引入密集连接机制,添加卷积注意力模块、条纹细化模块均能提升模型性能。提出的改进HRNet网络在果园深度数据集上的平均相对误差、均方根误差、对数平均误差、深度边缘准确误差和边缘完整性误差分别为0.123、0.547、0.051、3.90和10.76,在不同阈值下的准确率达到了0.850、0.975、0.993;在主观视觉上,改进HRNet网络生成的深度图有清晰的边缘以及较多的纹理细节。本文方法在客观指标和主观效果上均有良好的表现。     

促黄体素受体LHR的一种剪接体在牛黄体不同发育时期表达量差异的研究

利用TaqMan—MGB探针实时荧光RT—PCR检测方法,对牛黄体中促黄体素受体（luteinizing hormone receptor,LHR）的一种剪接体（F类）在黄体4个不同发育时期（前,中,后,末）的相对表达差异进行了分析。同时将Real-time PCR中获得的数据用Realplex软件进行相对基因表达差异分析,应用SPSS软件对结果进行统计学分析。结果表明,LHR的F类剪接体在牛黄体发育的4个时期中,中期表达量是前期的0．535倍,后期表达量达到最高,是前期的5．65倍,末期显著下降是前期的0．0116倍,各个时期LHR的F类剪接体表达量间存在极显著差异（P〈0．01）。     

F18菌毛粘附素F基因(fedF)在大肠杆菌中的表达及对小鼠的免疫保护效果

引起早期仔猪断奶腹泻(PWED)的主要致病菌是产肠毒素型大肠杆菌(ETEC),免疫预防是防治腹泻最主要的手段。本研究采用通过大肠杆菌(Escherichia coli)表达的重组F18菌毛粘附素F(FedF)作为抗原,在小鼠(Mus musculus)中探索以此为靶标免疫防治仔猪腹泻的可能性。根据相应F18菌毛粘附素基因(fedF)设计了一对添加EcoRⅠ和SalⅠ酶切位点的引物,以E.coli F18为模板扩增出全长908bp含20个信号肽序列的fedF片段,并与原核表达载体pET-30a(+)连接,导入大肠杆菌BL21,得到基因工程菌E.coli[pET-fedF],后经IPTG诱导及菌液蛋白电泳分析,结果表明,大小约为32.9kD的重组蛋白FedF可成功诱导表达;将重组工程菌口服免疫BALB/c小鼠,可有效地诱导小鼠血清中FedF特异性IgG的产生(P/N值>2.0)及小鼠肠粘膜sIgA显著增加了2.07倍(与空载体组pET-30比较)(P<0.05);攻毒试验表明,口服基因工程菌E.coli[pET-fedF]可显著地有效保护小鼠免予攻毒死亡,免疫保护率可达62.5%。研究结果提示,FedF黏附蛋白基因工程菌可通过口服诱导小鼠特异的体液和粘膜免疫反应,以此保护小鼠免受产肠毒素型大肠杆菌的进攻,因而有望作为一种口服疫苗防治产肠毒素型大肠杆菌引起的仔猪腹泻。     

基于改进FCOS网络的自然环境下苹果检测

为了快速识别和准确定位自然环境下苹果果实目标，提出了一种改进全卷积单阶段无锚框（Fully Convolutional One-Stage Object Detection，FCOS）网络的苹果目标检测方法。该网络在传统FCOS网络基础上，使用模型体积较小的darknet19作为骨干网络，将center-ness分支引入到回归分支上。同时提出了一种融合联合交并比（GIoU）和焦点损失（Focal loss）的损失函数，在提高检测性能的同时降低正负样本比例失衡带来的误差。首先，对田间采集的自然环境下的苹果图像进行数据增强和标注，使用darknet骨干网络提取图像特征，然后将不同尺度待检测目标分配到不同的网络层中进行预测，最后进行分类和回归，实现苹果目标的检测。该研究在计算机工作站上对不同光照条件、不同密集程度和不同遮挡程度的苹果果实进行检测试验，并与传统FCOS网络的检测结果进行对比分析。基于改进FCOS网络的检测准确率为96.0%，检测精度均值（mean Average Precision，mAP）为96.3%。试验结果表明，改进FCOS网络比传统FCOS网络的苹果检测方法在检测准确度上有提高，具有较强的鲁棒性。     

产肠毒素大肠杆菌主要致病因子及其致病机理的研究进展

仔猪腹泻是畜牧业养殖的主要问题之一,每年在世界范围内造成极大的经济损失。肠毒素大肠杆菌(enterotoxigenicescherichia coli,ETEC)是引起仔猪腹泻的主要病原之一〔1〕。肠毒素大肠杆菌致病因子包括:粘附素(adhesion)、肠毒素(Enterotoxins)、水肿病毒素(edema disease princ