iTRAQ技术及其在水稻蛋白质组学中的应用研究进展

同位素标记相对和绝对定量技术(iTRAQ)是一种新型的高通量的蛋白质测序技术,其通过与高精度的质谱仪串联,可同时对多达8个样品进行定性与定量分析,测定蛋白范围广泛、检测限低、分析结果可靠、精度高;目前已广泛应用于植物体的结构、功能、表达等方面的研究。水稻是人类的主要粮食作物,也是首个完成基因组测序的谷类模式植物,在蛋白质组水平上研究水稻的生长发育、调控机制具有重要意义。综述了iTRAQ的原理、操作流程和优缺点,重点就iTRAQ技术在水稻组织器官、亚细胞水平、逆境胁迫、激素诱导、突变体等方面的蛋白质组学研究进行了分析,并对iTRAQ技术在水稻蛋白质组学上的应用研究进行了展望。     

添加酶制剂和乳酸菌对水稻秸秆青贮质量的影响

本文通过在稻秸中分别添加乳酸菌制剂、酶制剂、乳酸菌和酶制剂,以不加任何添加剂为对照组,研究不同添加剂对稻秸发酵品质的影响,结果表明,与对照组相比,添加乳酸菌能明显改善稻秸的青贮感官品质,添加酶制剂对稻秸青贮感官品质影响不大;添加乳酸菌能增加稻秸的粗蛋白质含量(P 0.05),显著降低pH、氨态氮含量、氨态氮与总氮的比值、丁酸含量、NDF及ADF含量,显著增加乳酸的含量(P 0.05);添加酶制剂能显著降低氨态氮含量、氨态氮与总氮的比值(P 0.05),降低NDF、ADF及粗蛋白质含量(P 0.05),对有机酸含量影响不大,没有乳酸菌组发酵效果好;综合考虑,共同添加乳酸菌和酶制剂对稻秸青贮品质改善最大,可获得优良的稻秸青贮饲料。     

灵芝多糖热水提取条件的优化试验

为确定灵芝多糖的热水浸提条件,以苯酚-硫酸法作为灵芝多糖的测定方法,对浸提过程中的温度、时间及料水比3个因素进行正交试验,并研究浸提次数对多糖得率的影响。结果表明,浸提温度对多糖得率的影响较大。灵芝多糖热水浸提的优化条件为:温度78℃,料水比1∶30,提取时间3 h,在此条件下单次浸提即可获得绝大部分的子实体多糖。     

赤芝菌株的SCAR标记鉴别

赤芝是种重要的药用真菌,品种繁多,由于目前食用菌管理制度不完善,为稳定菌株质量迫切需要建立起快速鉴定赤芝菌株的有效办法。在对赤芝（Ganoderma lucidum）菌株进行SRAP多态性分析基础上,将属于某几个菌株的SRAP特异片段转化为稳定性较高的SCAR标记,共获得17个SCAR标记。聚类分析显示,供试的23个赤芝菌株在遗传距离0.63下分为4类,其中19个菌株在遗传距离0.50下聚成一类。将其中的9个SCAR标记线性组合,建立起赤芝菌株的多标记综合鉴别法,可对供试的23个菌株进行有效鉴别。由此可见,SCAR分子标记能很好地解释赤芝菌株间的亲缘关系,是种快速、稳定、准确鉴别赤芝菌株的方法。     

秀珍菇深层培养条件及菌丝体氨基酸组分分析

通过对秀珍菇液体发酵条件的研究,以菌丝体生物量为测定指标,筛选出秀珍菇菌丝体深层培养的最适碳源为玉米粉；最佳发酵条件为：pH5．0,接种量10％；以菌丝体生物量、还原糖和氨基氮含量为指标确定其最适发酵周期为4 d。秀珍菇菌丝体中含有16种氨基酸(色氨酸未测),其中包含7种必需氨基酸,菌丝体氨基酸总量为54．92 mg/g,其中必需氨基酸占40．24％；发酵液中含有11种氨基酸(色氨酸未测),其中包含5种必需氨基酸,发酵液氨基酸总量为3．97 mg/mL,其中必需氨基酸占55．92％。     

杏鲍菇多糖的提取及其分离的研究

杏鲍菇是一种珍贵食用菌，杏鲍菇多糖具有多种生物活性，本文对杏鲍菇菌丝球样品进行热水提取，去蛋白，乙醇沉淀，无水乙醇离心，真空干燥，得到多糖粗品。再用DEAE—纤维素层析法进行多糖的分离，梯度洗脱收集，采用硫酸—苯酚法测定多糖，结果得到三个主要糖峰。