桃花芽休眠解除SSH文库构建及相关基因表达分析

 为了深入研究桃花芽休眠的分子机制,利用抑制差减杂交技术（SSH）,以解除休眠期的花芽的RNA为实验方Tester,以休眠期花芽的RNA为驱动方Driver,构建休眠解除cDNA文库,测定分析了180 个上调表达的cDNA 片段,测序成功128个,除去冗余序列,得到28个单一序列。对序列进行BLAST比对及功能注释,发现这些序列分别属于新陈代谢、氧化还原、信号转导、抗性相关等类别基因。运用qRT-PCR 技术对HisH3、Dhn 和Metallothionein基因进行检测,结果表明它们在花芽休眠解除过程中均上调表达。     

两种桃芽总RNA提取方法的比较研究

以‘曙光油桃’芽为试材,采用改良CTAB法、Trizol法进行总RNA提取,并通过凝胶电泳、核酸蛋白分析仪和Q-PCR检测所提取总RNA样品的质量。结果表明:改良CTAB法提取的RNA,经Q-PCR后扩增桃芽HK基因,可以得到与目的片段大小一致的条带,条带清晰,能满足基因表达分析等后续试验的要求;而Trizol法所提取的RNA,条带较弱,经Q-PCR后扩增桃树芽内HK基因,得不到与目的片段大小一致的条带,难以达到进一步试验的要求。     

喷施氨基酸钙对黄金梨光合性能、果实钙含量及品质的影响

研究采前喷钙对黄金梨叶片光合荧光、果肉钙营养元素周期动态变化以及品质的影响,为黄金梨合理补充钙素营养提供理论依据。以13年生黄金梨为试材,从花后两周左右开始,每隔7 d在选取的黄金梨果树上喷施钙肥,试验设4个处理分别为(1)喷施0.5%氨基酸钙溶液;(2)喷施0.5%氨基酸钙溶液+20 mg/L IAA;(3)0.5%氨基酸钙溶液+20 mg/L EGTA;(4)清水对照(CK)。结果表明,喷钙处理提高了果肉的总钙含量,IAA能够促进果实对钙的吸收,在果实成熟期,喷施氨基酸钙和氨基酸钙配施IAA的处理的果肉钙含量分别增加了8.6%、20.7%。喷氨基酸钙和钙配施IAA处理均显著提高了叶片的净光合速率(Pn)、蒸腾速率(Tr)及气孔导度(Gs),使光系统II维持较高的活性,PSII实际光化学效率(ΦPSII)、光化学猝灭系数(qP)、PSII的天线转换效率(Fv’/Fm’)、PSII最大光化学效率(Fv/Fm)显著高于对照,添加抑制剂EGTA明显抑制了光合作用。喷钙处理的果实单果重、硬度、可溶性固形物、可溶性糖、Vc含量均高于对照,添加IAA处理效果明显,分别比对照提高了5.1%、12.7%,11.8%,6.5%,24.2%,同时显著降低了可滴定酸含量,而添加EGTA的果实品质明显降低。因此,幼果期喷施氨基酸钙能够为黄金梨果实补充钙素营养,显著提升叶片的光和性能,并达到了改善果实品质的目的。钙、IAA配施优于单施钙处理。     

苹果bZIP转录因子家族生物信息学分析及其在休眠芽中的表达

【目的】鉴定苹果（Malus×domestica Borkh.）基因组上的bZIP基因（MdbZIP）,为研究苹果bZIP转录因子提供相关信息以及在芽休眠过程中的调控作用提供理论参考。【方法】通过Pfam下载bZIP隐马尔科夫模型bZIP_1（PF00170）与bZIP_2（PF07716）,利用HMMER 3.0鉴定苹果bZIP基因。使用Clustal Omega、MEGA6.0、MapInspect、DNAMAN 6.0和MEME4.10.2等软件对其蛋白序列进行生物信息学分析。采用Microarray分析与qRT-PCR技术检测苹果bZIP基因在不同处理下及其在高需冷量品种与低需冷量品种中的表达情况。【结果】鉴定得到120个苹果bZIP基因,与拟南芥的系统进化树分析将苹果bZIP分为10个亚家族（A-I和S）。染色体定位分析显示,109个苹果bZIP不均匀分布于17条染色体上,其中,11个基因无匹配的染色体定位。8号染色体上分布最多（13个）,1号染色体分布最少（1个）,一些染色体区域基因密度较高。基因结构分析表明,MdbZIP基因家族外显子数量0-23个,其中23个基因无内含子,分布于F亚家族（4）与S亚家族（19）,基因结构进化高度保守。保守元件分析表明,MdbZIP基因家族包含30个保守元件：元件1为bZIP保守结构域;在D亚家族发现的元件10与G亚家族发现的14为已知元件,另外多数元件功能未知。通过Microarray分析显示,多个MdbZIP均可能与芽休眠的解除相关。qRT-PCR结果显示在不同品种中A亚家族8个MdbZIP均呈现出ABA诱导表达,而D亚家族中随着冷处理时间延长,在需冷量不同的品种中出现多种表达模式。【结论】苹果bZIP基因家族结构高度保守,在ABA与冷处理下呈现不同表达模式,可能参与调控苹果芽休眠进程。     

喷施钙对肥城桃果活性钙含量及其在亚细胞分布的影响

【目的】肥城桃是山东特产,但经常发生缝合线褐变、 不耐储藏等问题,补充钙肥是减轻其生理病害的有效措施。了解肥城桃的需钙规律,为肥城桃补充钙素营养提供理论依据和技术指导。【方法】以11年生红里肥桃为试材,从花后一个月开始,每隔30 d在选取的肥桃果树上喷施钙肥。试验设3个处理: 1)喷施0.5%氨基酸钙溶液; 2)喷施0.5%硝酸钙; 3)喷施清水为对照。从4月28日起每隔30 d采样,测定果皮、 果肉、 果核、 果仁总钙含量及果肉钙组分含量,在成熟期取果实用透射电镜观察果肉细胞内钙的亚细胞分布。【结果】3个处理果实中的钙含量均以幼果期最高,随着果实的成熟,全钙、 水溶性钙、 果胶酸钙含量均呈下降趋势,喷钙处理在一定程度上提高了果皮、 果肉、 果核及果仁的总钙含量,其中果肉总钙含量变化最明显,在果实成熟期,喷施氨基酸钙及硝酸钙的处理果肉总钙含量分别增加了68%、 77%。通过电镜观察,喷钙果肉细胞中钙均匀分布于细胞壁、 细胞膜、 液泡膜上,液泡中有钙的堆积; 未喷钙细胞壁中钙的分布减少,细胞膜、 液泡膜上钙也均匀分布; 发生褐变的果肉细胞内钙分布很少且不均匀。【结论】肥城桃果实中全钙含量随着果实生长而迅速下降。喷施钙肥能提高果实全钙尤其是水溶性钙及果胶钙的含量,增加细胞壁钙的分布,有利于缓解果实发育过程中钙含量的下降。喷施氨基酸钙和硝酸钙都能增加肥城桃果肉的不溶性果胶含量,提高果实硬度。     

月季芽接新方法——换芽法

一、时间:5—10月,接穗枝条的叶腋间有芽苞萌动时。二、用具:剪刀、剔须刀片、塑袋条(薄而耐拉者)。三、方法: 1.将作砧木用的枝条留3—5个节,以上部分全部剪掉。在截短后的枝条上选一个芽眼作为芽接部位(尽可能低点),除去叶片,剥掉枝刺,以便操作。 2.用剔须刀片从芽眼以上0.8厘米处向下削一条长约1.3厘米带芽的皮(枝粗芽大者可长一点)。在芽皮下端向斜下方横切一刀,留个斜插口,取下芽片(尽可能不带木质部,见附图)。若芽皮削掉没留斜插口,可     

生态项目在森林资源连续清查中的应用

论述了生态项目调查的内容,对各因子调查的结果进行了评价。     

三种不同需冷量桃品种休眠诱导期生理变化

以三个不同需冷量的桃品种‘常绿桃’(无)、‘春捷’(102～120 C.U.)、‘青州蜜桃’(1200 C.U.)嫁接在同一桃树砧木‘山桃’上为实验材料,研究不同需冷量桃叶片在自然休眠诱导期(8月20日-11月20日)的生理变化。结果表明:在自然休眠诱导期,桃叶片的抗氧化保护酶活性、光合速率、可溶性糖和淀粉含量发生显著变化。随着休眠诱导的发展,超氧化物歧化酶(SOD)活性一直升高,在休眠诱导期后期(10月10日)‘常绿桃’高于‘春捷’和‘青州蜜桃’,过氧化物酶(POD)活性下降,不同需冷量桃无显著差异,过氧化氢酶(CAT)活性呈双峰变化且常绿桃峰值低于‘春捷’和‘青州蜜桃’;净光合速率呈下降趋势但常绿桃高于‘春捷’和‘青州蜜桃’且峰值分别是‘春捷’和‘青州蜜桃’的1.96和3.13倍;可溶性糖含量降低、淀粉含量增加但‘常绿桃’可溶性糖含量高于‘春捷’和‘青州蜜桃’、淀粉含量低于‘春捷’和‘青州蜜桃’。以上结果表明,‘常绿桃’在休眠诱导期保护酶活性、光合速率和可溶性糖含量均高于‘春捷’和‘青州蜜桃’,淀粉含量低于‘春捷’和‘青州蜜桃’。     

根域蓄水调控对苹果叶片光合特性和抗氧化酶活性的影响

以14年生盛果期红富士/平邑甜茶(Malus×domestica Borkh.‘Red Fuji’/M.hupehensis Rehd.)为试材,研究"埋砖蓄水"根域调控处理对根域土壤环境和苹果树叶片生长、光合性能特性、抗氧化酶活力等的影响,为进一步优化有限灌溉条件下的果树栽培管理技术提供理论依据。试验结果表明:根域蓄水调控能显著提高不同深度土层含水量,增加苹果植株叶片含水量及叶绿素和类胡萝卜素含量、气孔导度(Gs)、胞间CO2浓度(Ci)和净光合速率(Pn);使叶片PSⅡ潜在活性(Fv/Fo)和性能指数(PIABS)提高,Tfm值降低,即提高了光能转化为化学能的转化速率;叶片的SOD、POD、CAT活性及MDA含量均显著低于对照。根域蓄水调控改善了根际土壤水分环境,提高了植株光合碳同化速率和电子传递速率,显著减少活性氧的产生,延缓叶片衰老,延长了叶片功能期。     

我国果树产业发展的时代任务

针对我国果树产业的发展现状,结合国家提出的农业供给侧结构性改革及新旧动能转换与挖掘,果树产业应进一步加强科技创新发展,提高产业效益;并对目前果树生产存在的问题提出合理化建议。