甘蔗糖蜜原料酸度计算公式浅议

1 引言 广东省糖纸工业公司与轻工业部甘蔗糖业科学研究所合编的《甘蔗糖蜜酒精生产检验方法》一书,虽然是内部资料,但却以其具有较强的实用性而受到各糖厂分析人员的欢迎,对提高我区酒精化验水平起了一定的积极作用。但该书在第三章“糖蜜原料的分析”中关于酸度的计算公式,因注解不够详尽,在使用中若不注意,很容易使人误解而出错。笔者在与我区一些糖厂分析人员接触     

温泉土壤宏基因组文库构建及普鲁兰酶筛选

[目的]构建温泉土壤宏基因组文库并进行普鲁兰酶活性筛选,以期获得高活力、耐高温的新型普鲁兰酶基因.[方法]采用间接法提取温泉土壤样品中宏基因组DNA,经Sephadex G200（含2％ PVPP）凝胶柱和电洗脱两步纯化后,扩增16S rRNA序列,通过序列比对和系统发育进化树分析温泉土壤微生物的多样性;然后以pCC1FOS为载体构建温泉土壤宏基因组文库,并对所获得的宏基因组文库进行活性筛选.[结果]利用宏基因组技术提取温泉土壤样品中微生物的基因组DNA,构建了一个约含1 146个克隆的温泉土壤16S rRNA文库,经遗传进化分析,发现温泉土壤样品中的大部分微生物未被研究过,主要来源于厚壁菌门（Firmicutes）,其次为恐球菌—栖热菌门（Deinococcus-Thermus）和变形杆菌门（Proteobacteria）.用提取获得的宏基因组DNA成功构建了温泉土壤微生物宏基因组Fosmid文库,文库约含2.7万个克隆,平均插入片段长度为40.0 kb,文库外源DNA总容量为1.2×10^9bp;通过活性筛选共获得9个可表达普鲁兰酶活性的克隆.[结论]宏基因组文库技术是获取极端环境微生物新酶的有效手段,可为进一步挖掘普鲁兰酶的应用潜力及研究其耐热机理奠定基础.     

利用葡萄糖、木糖生产燃料酒精的基因工程菌构建

以运动发酵单胞菌的总DNA为模板，PCR扩增Zymomonas mobilis中的乙醇脱氢酶基因（adhB）和丙酮酸脱羧酶基因（pdc）。首先进行单个基因表达，基因表达产物经SDS—PAGE电泳分析和乙醛指示平板检测，确认有酶活性后，将这2个基因串联构建多顺反子表达质粒pSE—pdc—adhB，转入大肠杆菌DH5a内，得重组工程菌株。工程菌株经IPTG诱导，分别在含10％葡萄糖和10％木糖培养基中于37℃培养72h，有乙醇产生，酒精产率分别为对照菌株21倍和5倍。     

标准模块化设计在基因工程实验课程教学中的应用

针对目前基因工程实验课程存在的不足,根据该课程内容的特点进行模块化设计,将相关的实验课程划分成多个可以独立授课的模块,每一个模块都包含标准化的基础实验技能,而这些模块又可以组成系统一体化的综合实验,让学生先按照顺序掌握基本模块的实验操作基本技能,并对单个模块的实验技能进行考核,合格后才能进入下一步实验,这将可以大大提高基因工程实验课的教学效果,并促进学生对理论知识的掌握和实验技能的提高。     

宏基因组文库中的组成型启动子在大肠杆菌中的克隆

启动子是决定基因表达水平的重要因素之一。组成型表达启动子被认为是工业上表达重要蛋白质的理想启动子。本研究利用蔗糖为唯一碳源的基本培养基对榨糖废水浸润的土壤微生物宏基因组文库进行筛选,获得两个阳性克隆。对其中一个克隆的柯斯质粒进行亚克隆,利用在线启动子预测和序列比对工具对其中一个亚克隆子进行分析,获得一个启动子序列。然后,利用PCR方法将该启动子和地衣芽孢杆菌的α-淀粉酶基因一起克隆到T载体上。结果表明该启动子在不加诱导剂的条件下能够在大肠杆菌中启动外源基因的高效表达。本研究结果为在生物领域中组成型启动子的应用研究提供了基础。     

甘蔗糖蜜原料酸度计算公式浅议

广东省糖纸工业公司与轻工业部甘蔗糖业科学研究所合编的《甘蔗糖蜜酒精生产检验方法》一书．虽然是内部资料．但却以其具有较强的实用性而受到各糖厂分析人员的欢迎，对提高我区酒精化验水平起了一定的积极作用。但该书在第三章“糖蜜原料的分析”中关于酸度的计算公式，因注解不够详尽．在使用中若不注意，很容易使人误解而出错。笔者在与我区一些糖厂分析人员接触时，就发现他们误解了公式并一直错误盼使用至今。为了保证检验结果的准确性．纠正在酸度公式使用上的错误，笔者认为，有必要对酸度公式进行一下讨论。