表达谱芯片对灰绿藜和水稻NHX1基因在转基因拟南芥中表达差异的研究

[目的]基因芯片作为高通量、高效率的DNA分析技术,已被广泛地用于植物抗逆性功能基因的分析之中.为探讨盐生植物和甜土植物NHX1基因调控盐应答过程和亲水性C端的功能研究提供借鉴,进一步揭示盐生植物和甜土植物耐盐机制的差异,为植物耐盐机理的实际应用提供依据.[方法]利用Affymetrix拟南芥表达谱芯片对过表达盐生植物灰绿藜和甜土植物水稻NHX1基因及缺失部分C端基因的转基因拟南芥进行基因表达差异的分析.[结果]在盐胁迫的转基因拟南芥组织中,筛选出在四组转基因型拟南芥中共同差异表达的基因有394条,占筛选基因总数的1.64;,其中上调表达的基因有177条,下调表达的基因有217条.将这些差异基因初步分为12类, 包括非生物性与生物性刺激的应答过程、胁迫应答过程、电子转移和能量途径、信号转导和转录等功能类别.[结论]表明植物耐盐过程是一个多基因参与的复杂的变化过程, 涉及到许多相关基因的变化.联系两两比较散点图和聚类分析结果从理论上说明,转基因拟南芥cgNHX1,cgNHX1dc,osNHX1和osNHX1dc耐盐性有依次减弱的趋势.     

基因芯片技术在植物抗逆机理研究中的应用

概述基因芯片技术的原理、特点及其在植物抗冻、耐盐、耐旱等方面的应用前景。     

siRNA干扰lZP3 mRNA表达的研究

【目的】为探索新疆草原兔尾鼠(Lagurus lagurus)卵透明带3(lZP3)在精卵结合中的机理,有效的控制草原兔尾鼠的生育;【方法】将RNA干扰载体pGenesil-ZP31和真核表达质粒p-ACLC一起通过尾静脉大容量快速注射法(Hydrodynamics-based transfectionmethod,HD法)共注射小鼠。【结果】半定量RT-PCR和real-timePCR结果表明,2种质粒共注射时,pGenesil-ZP31的干涉作用至少发生在注射后的8h到10d之间;顺序性注射实验中,注射pGenesil-ZP31后间隔8h和1d再注射p-ACLC时,pGenesil-ZP31能在一定程度上干涉lZP3mRNA的表达,间隔3d以后lZP3mRNA的表达几乎不受影响,未出现干涉现象。而注射p-ACLC后间隔1h、2h、4h和8h再注射pGenesil-ZP31,lZP3mRNA的表达也受到了抑制,间隔24h时抑制现象则消失;【结论】以载体为基础的体内RNAi过程具有时间依赖性,为在卵母细胞水平进一步研究siRNA对lZP3的干涉机制提供借鉴。     

siRNA干扰lZP3 mRNA表达的研究

【目的】为探索新疆草原兔尾鼠（Lagurus lagurus）卵透明带3（lZP3）在精卵结合中的机理，有效的控制草原兔尾鼠的生育；【方法】将RNA干扰载体pGenesil-ZP31和真核表达质粒p-ACLC一起通过尾静脉大容量快速注射法（Hydrodynamics-based transfection method, HD法）共注射小鼠。【结果】半定量RT-PCR和real-time PCR结果表明，2种质粒共注射时，pGenesil-ZP31的干涉作用至少发生在注射后的8 h到10 d之间；顺序性注射实验中，注射pGenesil-ZP31后间隔8 h和1 d再注射p-ACLC时，pGenesil-ZP31能在一定程度上干涉lZP3 mRNA的表达，间隔3 d以后lZP3 mRNA的表达几乎不受影响，未出现干涉现象。而注射p-ACLC后间隔1 h、2 h、4 h和8 h再注射pGenesil-ZP31，lZP3 mRNA的表达也受到了抑制，间隔24 h时抑制现象则消失；【结论】以载体为基础的体内RNAi过程具有时间依赖性，为在卵母细胞水平进一步研究siRNA对lZP3的干涉机制提供借鉴。