利用CRISPR/Cas9系统敲除葡萄中VviEDR2提高对白粉病的抗性

利用CRISPR/Cas9系统定点编辑葡萄白粉病感病基因VviEDR2（Enhanced disease resistance 2），在VviEDR2的DUF1336结构域设计靶位点VviEDR2-T1，构建CRISPR/Cas9敲除载体，通过农杆菌介导法转化‘无核白’葡萄胚性愈伤组织。对PCR阳性植株进行靶位点扩增测序，结果表明，共有8个转基因植株在靶位点处发生不同类型的双等位基因突变，编辑效率为32%；突变体植株生长势较弱，叶片较小，茎秆丛生、细弱。进一步对突变体植株进行抗病检测，结果表明，接种葡萄白粉菌（Erysiphe necator Schw.）5 d后，突变体植株叶片上白粉菌孢子仅能萌发出少量较短初级菌丝，表皮细胞产生大量明显的H2O2，而野生型叶片中白粉菌萌发出大量初级菌丝、次级菌丝和吸器，无明显H2O2产生。这些结果表明，可以利用CRISPR/Cas9技术编辑葡萄感病基因VviEDR2，提高葡萄白粉菌抗性。     

利用CRISPR/Cas9敲除葡萄VviPDS1基因的研究

选择葡萄八氢番茄红素脱氢酶(Phytoene desaturase)基因VviPDS1为靶标,利用CRISPR/Cas9系统构建基因敲除载体,瞬时转化葡萄叶片原生质体,检测到不同类型的突变。通过农杆菌介导转化‘无核白’葡萄胚性愈伤组织,筛选获得卡那霉素抗性植株71株。经PCR鉴定,其中53株为阳性植株,阳性率为74.64%。测序结果表明,共有20株在靶点发生不同类型的突变,编辑效率为37.74%;其中9株产生了双等位基因突变。对其进行氨基酸序列预测,在第202位氨基酸之后发生了不同程度的变异。利用CRISPR/Cas9系统敲除VviPDS1获得的突变体植株呈现整体矮化,其叶片出现不同程度白化。表明CRISPR/Cas9系统可以通过细胞中的瞬时或稳定表达进行基因编辑,可以实现在葡萄编辑植株中产生纯合敲除。     

天然植物消毒液对禽舍和饮水病原微生物杀灭作用及影响因素研究

为研究天然植物消毒液杀菌作用的影响因素及效果,将天然植物消毒液与混有小牛血清的菌液混合作用后,观察其对致病菌的作用,以检验有机物对天然植物消毒液杀菌效能的影响,并将天然植物消毒液作用于禽舍和饮水后分别进行活菌计数,以研究其对禽舍和饮水中细菌的杀灭作用。结果表明:天然植物消毒液与混有不同浓度小牛血清的菌液混合作用后,对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的杀菌率均能达到99.9%以上,说明天然植物消毒液的杀菌效能不受有机物的影响。天然植物消毒液1∶5和1∶10倍稀释后对禽舍中细菌的杀灭率分别为98.39%和96.37%;天然植物消毒液1∶5和1∶20倍稀释后对饮水中细菌的杀灭率均为100%,1∶80倍稀释后对饮水中细菌的杀灭率为74.19%。     

我国兽用生物制品制造工职业技能鉴定实践与思考

介绍了我国兽用生物制品行业人力资源、职业技能鉴定体系工作情况,分析了兽用生物制品制造工职业技能鉴定工作开展的特点及其在兽用生物制品生产中的作用,对兽用生物制品行业职业技能鉴定工作的方向及未来进行了思考,以期为兽药行业职业技能鉴定工作提供参考。     

石空-兰州含蜡原油管道运行方案优化

根据石空-兰州原油管道沿线油温、地温数据以及油品物性,采用常温、加热及加剂综合热处理3种输送工艺,其下游进站油温应分别不低于22℃、20℃和17℃。将全年分为春夏秋冬4个运行时段,对不同输量下的运行方案进行细化,给出了详细的油温控制要求、异常工况应对方案,以及加剂输送时加剂系统故障工况下的保障方案。运行方案要求：进站油温须高于凝点3℃;沿线启炉加热出站油温不低于50℃;1、2月份综合热处理加剂量不低于25g／t,其他月份不低于12．5g／t。此外,在经济性方面,加剂综合热处理输送工艺明显优于加热输送工艺。（图1,表2,参12）     

冠状病毒所引起的动物疾病及其危害

冠状病毒与多种动物和人的疾病有关，在畜牧养殖业中，可引起鸡、猪、牛、鸭等畜禽的传染性疾病。冠状病毒血清型多，哺乳动物冠状病毒的某些毒株之间具有血清学上的交叉反应性，但与禽类冠状病毒迥然不同。感染冠状病毒的动物可引起不同类型的传染病，但都具有传染性强，发病率高，死亡率高等特点，且缺乏有效治疗药物，只能采用被动免疫的方法予以预防，一旦发生，经济损失较大。     

无公害药用蔬菜桔梗栽培技术

桔梗又名铃铛花，原产中国和日本，为我国传统中草药，以地下根茎入药，有祛痰止咳、消肿排脓之功效。主治咳嗽、扁桃体炎、咽喉肿痛、肺脓肿等病症。因其根茎肥嫩、营养丰富，有医疗保健功效，被加工成桔梗菜、桔梗果脯等保健食品，畅销国内外。花色鲜蓝，形如悬钟，但在现蕾时呈气球形，有“中国气球”之称。适宜布置花境，点缀岩石园，也是极好的切花和盆栽材料。     

莫能菌素预混剂HPLC检测方法的建立

为了建立测定莫能菌素预混剂中莫能菌素含量的高效液相色谱(HPLC)检测方法,试验采用C_(18)色谱柱,甲醇-水-冰醋酸(94∶6∶0.1)等度洗脱,甲醇-硫酸-香草醛(95∶2∶3)为衍生试剂,流动相与衍生试剂的流速为0.7 mL/min,衍生温度为98℃,检测波长为520 nm,进样量为200μL,考察方法的专属性、精密度、线性、中间精密度、准确度、耐受性等。结果表明:莫能菌素在0.01～0.03 mg/mL范围内线性关系良好(R~2=0.999 5),方法的专属性、精密度、中间精密度、准确度、耐受性等均符合要求。说明用本试验建立的HPLC检测方法可以准确地测定莫能菌素预混剂中莫能菌素的含量。     

氟苯尼考可溶性粉对鸡大肠杆菌病的疗效试验

以试管2倍稀释法测定20％氟苯尼考可溶性粉和10％氟苯尼考预混剂对鸡大肠杆菌078的最低抑菌浓度(MIC)，然后对实验性鸡大肠杆菌病病鸡进行治疗试验，内服5天、每天2次。结果表明，20％氟苯尼考可溶性粉和10％氟苯尼考预混剂MIC均为16mg／L，以氟苯尼考可溶性粉1．0g／L、0．5g／L、0．25g／L给鸡饮水后，对大肠杆菌病的治愈率分别为93．3％、83．3％和70．0％，药物对照组治愈率为80．0％。感染对照组的死亡率高达60．0％。